2022版高考生物 3-2-1精品系列 专题20 生物技术实践

2022版高考生物3-2-1精品系列专题【专题知识框架】【考纲解读】考点考纲要求考察角度微生物的分离与培养Ⅱ微生物培养所需营养物质；利用选择培养基分离微生物的方法；微生物的培养过程微生物的鉴定及数量的测定Ⅱ微生物的鉴定方法；微生物的筛选原理；微生物的数量测定的原理和方法酶的应用Ⅱ酶的存在与简单制作方法；酶活力测定的一般原理与方法；酶在食品制造和洗涤方面的应用；制备和应用固定化酶传统发酵技术的应用Ⅰ果酒、果醋、腐乳、泡菜的制作原理、实验流程及有关注意事项；检测视频中亚硝酸盐的含量的原理、过程143\n植物有效成分的提取Ⅰ从植物材料中提取芳香油、胡萝卜素等有效成分的方法、原理及实验步骤DNA与蛋白质的提取与分离ⅠDNA提取的方法、步骤及注意事项；从血液中提取蛋白质的方法PCR技术及应用ⅠPCR技术的原理及应用【三年高考命题分析与命题趋势】三年高考命题分析：酶的应用本专题内容主要有三个知识点：果胶酶在果汁生产中应用；加酶洗衣粉的洗涤效果探究；制备和应用固定化酶。在高考命题中，与必修1内容联系紧密。从近几年命题中看出，联系生产生活实际的考题较多。命题角度侧重从生产生活实际出发，侧重从社会现象，新的科学研究入手，利用酶的有关知识分析解决实际问题。考查形式以简答题为主。近几年各省市命题比重较小，选择题很少见。生物技术在食品加工及其他方面的应用从近几年新课标地区高考命题分析，本专题知识点考查主要体现在以下三个方面：（1）传统发酵技术的应用，果酒、果醋和腐乳的制作是考查的重点。（2）生物材料中特定成分的提取和蛋白质的分离在高考中也有体现。（3）PCR技术在高考中也有所涉及。命题角度：本专题与生产生活实际联系紧密，在考查时注重与实践、实验相结合。考查形式：在新课标地区以简答题形式为主，江苏、广东则简答、选择均有出现。命题趋势微生物的利用143\n以理综形式考查的地区多以简答题形式综合考查微生物的培养、分离、纯化过程，注重与实践相结合。而单科命题的地区出了综合性简答题外，选择题多考察培养基制备、灭菌方法和平板划线法等基本技术，但简答题仍是主要命题形式。预计2022年各地命题仍以简答题形式为主，难度系数在0.75左右。酶的应用联系果汁饮料生产、新型洗涤产品等生活实际，考查酶的特性及其在生产中的应用，很可能以探究实践类型的题目出现，预计2022年各地命题可能性较大，难度适中，系数在0.65左右。生物技术在食品加工及其他方面的应用“传统发酵技术的应用”中“果酒、果醋、泡菜、腐乳的制作原理与技术流程”试题较多，为今后高考命题热点。但命题难度不会太大，难度系数一般在0.75左右。“生物材料中有效成分提取”将在今后高考命题中也有出现，但往往以选择题形式出现，难度系数也在0.75左右。【核心考点要点归纳】考点一、微生物的培养与应用1.培养基（1）营养构成：各种培养基一般都含有水、碳源、氮源和无机盐，此外还要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的要求。（2）培养基类型①按培养基物理性质可分为固体培养基和液体培养基两种，其中固体培养基用于菌种分离、鉴定、菌落计数等。而液体培养基常用于科研或工业生产等。②按培养基的功能可分为选择培养基和鉴别培养基。③按照人们对培养基中成分的了解程度可分为天然培养基和合成培养基两种。说明代谢类型不同的微生物，对培养基营养成分的要求不同，如自养型微生物可以利用无机碳源，而异养型微生物则必须利用有机碳源。不论代谢类型如何，微生物对营养物质的要求都包括碳源、氮源、水、无机盐、生长因子五类。2.关于无菌技术（1）实验室常用的灭菌方法有灼烧灭菌、干热灭菌、高压蒸汽灭菌；常用的消毒方法有煮沸消毒、巴氏消毒、化学药剂消毒。对不同的对象需采用不同的消毒或灭菌方法。143\n（2）在微生物培养时，获得纯净培养物的关键是防止外来杂菌入侵。无菌技术围绕着如何避免杂菌的污染展开，主要包括四方面的内容：①对实验操作的空间、操作者的衣着和手进行清洁和消毒。②将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等器具进行灭菌。③为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在酒精灯火焰附近进行。④实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与周围的物品相接触。3.菌种的纯化考点二、果酒、果醋、腐乳、泡菜制作的注意事项1.果酒、果醋制作的注意事项（1）材料的选择与处理选择新鲜的葡萄，榨汁前应先冲洗，再除去枝梗，以避免去除枝梗时引起葡萄破损，增加被杂菌污染的机会。（2）防止发酵液被污染需要从发酵制作的过程进行全面的考虑，因为操作的每一步都可能混入杂菌。为避免杂菌污染：榨汁机要洗净并晾干，发酵装置要洗净并用70%的酒精消毒；若用简易的发酵装置，每隔一定时间排气时只需拧松瓶盖，不要完全揭开瓶盖等。（3）控制发酵条件 果酒果醋温度20℃左右，最适合繁殖；18～25℃，酒精发酵30～35℃，最适合生长氧气前期通O2，然后控制无O2氧气充足143\n其他时间：10～12天；pH:5.0～6.0时间：约7～8天2.腐乳制作的注意事项（1）影响腐乳品质的条件：水、盐、酒、温度、发酵时间等。①水的控制：含水量约70%，用含水量过高的豆腐制腐乳，不易成形。②盐的控制：盐浓度过高，会影响腐乳的口味，浓度过低，腐乳易腐败变质。③酒的控制：酒精含量一般控制在12%左右。酒精含量过高，使腐乳成熟期延长。酒精含量过低，杂菌繁殖快，豆腐易腐败。④温度的控制：温度为15～18℃,适合毛霉生长。发酵时间易控制在6个月左右。考点三、植物的组织培养技术1.植物组织培养原理植物组织培养的原理是细胞的全能性。不同细胞的全能性不一样。生物体的所有细胞全能性大小比较如下：①受精卵>生殖细胞>体细胞；②体细胞中：幼嫩植物组织（如芽尖）>成熟组织细胞。2.植物组织培养技术和花药培养技术的异同 植物组织培养技术花药培养技术相同点理论依据植物细胞的全能性基本过程无菌技术及接种操作基本相同影响因素选材、营养、激素、pH、温度、光照等不同点选材体细胞生殖细胞（精子）143\n3.植物组织培养技术、微生物培养技术和无土栽培技术比较 植物组织培养技术微生物培养技术无土栽培技术概念在无菌条件下，将离体的植物体器官或组织接种在适当的培养基上进行培养，最终发育成完整植株在无菌条件下，在适宜的营养和环境条件下对微生物的培养将植物生长发育过程中所需各种矿质元素按一定比例配成营养液，并利用这种营养液栽培植物培养基成分水、矿质元素、蔗糖、维生素、有机添加物和植物激素等水、无机盐、碳源、氮源等水、必需矿质元素特殊操作要求严格控制无菌操作，在培养过程中要更换培养基，调节细胞分裂素和生长素的比例严格控制无菌操作，整个培养过程无需更换培养基适宜的环境条件，基质垫底并固定幼苗，不需要保证无菌条件考点四、探究不同种类加酶洗衣粉的洗涤效果实验应注意的事项1.实验原理酶的催化作用具有专一性，复合酶洗衣粉加入的酶制剂种类较多，与单一加酶洗衣粉相比，对各种污渍都有较好的洗涤效果。2.实验变量(1)自变量：加酶洗衣粉。(2)无关变量：其他条件相同且适宜（如温度、pH等）。3.实验步骤步骤烧杯编号ⅠⅡⅢ注入自来水500mL500mL500mL加入物质（等量）奶渍布奶渍布奶渍布控制水温37℃37℃37℃加入洗衣粉（等量）蛋白酶复合酶脂肪酶143\n洗衣粉洗衣粉洗衣粉用玻璃捧搅拌5min5min5min观察实验现象   4.实验时注意事项（1）在比较普通洗衣粉和加酶洗衣粉的洗涤效果的实验中，自变量为洗衣粉的种类，设计时应遵循单一变量原则、对照原则，有效控制其他变量，如水的用量、污染物的量、所用实验的布的质地和大小、两种洗衣粉的用量、搅拌及洗涤时间等。（2）在使用加酶洗衣粉时不但要考虑最佳洗涤效果的条件，如最适温度、pH，还要考虑衣物的承受力，如蛋白酶洗衣粉不能洗涤丝绸类衣物；也要考虑洗涤成本问题，因污渍的成分比较复杂，一般选择复合加酶洗衣粉，以减少用量。（3）该实验探究多种加酶洗衣粉对同一污渍的洗涤效果，也可以探究同一种加酶洗衣粉对于不同污渍的洗涤效果。考点五、固定化酶与固定化细胞注：酶更适合采用化学结合法和物理吸附法固定，而细胞多采用包埋法固定。这是因为细胞个大，而酶分子很小，个大的细胞难以被吸附或结合，而个小的酶容易从包埋材料中漏出。3.固定化细胞常用的载体材料常用的载体有明胶、琼脂糖、海藻酸钠、醋酸纤维素和聚丙烯酰胺等。4.固定化酶的优点：（1）易接触；（2）易分离；（3）反复利用。考点六、DNA的粗提取与鉴定1.原理、方法和目的基本原理方法目的143\nDNA在不同浓度的NaCl溶液中的溶解度不同，在0.14mol/L的NaCl溶液中的溶解度最低溶于NaCl溶液中并稀释①NaCl溶液为2mol/L时，DNA溶解，而部分蛋白质发生盐析而生成沉淀，通过过滤可除去部分蛋白质及不溶于NaCl溶液的杂质②当NaCl溶液稀释至0.14mol/L时，DNA析出，过滤可除去溶于NaCl中的部分蛋白质和其他杂质DNA不被蛋白酶所水解加入嫩肉粉嫩肉粉中含木瓜蛋白酶，水解蛋白质DNA不溶于酒精溶液加入冷却酒精（95%）DNA析出，除去溶于酒精的蛋白质DNA可被二苯胺染成蓝色加入二苯胺，并沸水浴鉴定DNA2.实验材料（1）动物（2）植物：新鲜菜花、蒜黄、菠菜等。人和哺乳动物成熟的红细胞中不含细胞核,也没有DNA，不适于作DNA提取的材料，但却是提取血红蛋白的理想材料。3.鉴定比较加入物质结果图示实验组均加入：①4mL二苯胺试剂②2mol/LNaCl溶液5mL丝状物(DNA)溶液逐渐变蓝 对照组——不变蓝4.注意事项①制备鸡血细胞液时，要在取鸡血的同时加入柠檬酸钠，静置后上层是血清，下层为所需要的血细胞。②两次加蒸馏水的目的不同。143\n③鉴定DNA时需沸水浴加热。考点七PCR扩增技术和DNA复制的比较 DNA复制PCR扩增技术场所细胞核内生物体外原理碱基互补配对碱基互补配对酶DNA聚合酶、解旋酶耐热的DNA聚合酶（Taq酶）条件模板、ATP、引物链（RNA）、常温模板、ATP、引物链（DNA及RNA片段）、温度变化（90~95℃→55~60℃→70~75℃）原料四种脱氧核苷酸四种脱氧核苷酸特点形成的是整个DNA分子，一个细胞周期只复制一次短时间内形成大量目的基因DNA片段，呈指数增长——2n考点八、血红蛋白的提取和分离1.蛋白质分离的依据蛋白质各种特性的差异，如分子的形状和大小、所带电荷的性质和多少、溶解度、吸附性质和对其他分子的亲和力等，可以用来提取和分离不同种类的蛋白质。2.方法及原理（1）凝胶色谱法原理蛋白质比较相对分子质量大相对分子质量小凝胶内部不能进入能进入运动方式垂直向下垂直向下和无规则扩散运动经过路程较短较长洗脱次序先流出后流出凝胶色谱柱的直径大小不影响分离效果，但直径过大造成洗脱液体积大，样品稀释度大；凝胶色谱柱的高度与分离度有关。（2）凝胶电泳法原理凝胶电泳法的原理是不同蛋白质的带电性质、电量、形状和大小不同，在电场中受到的作用力大小、方向、阻力不同，导致不同蛋白质在电场中的运动方向和运动速度不同。143\n考点九、蒸馏、压榨和萃取三种方法的比较提取方法水蒸气蒸馏压榨法有机溶剂萃取实验原理利用水蒸气将挥发性较强的芳香油携带出来通过机械加压,压榨出果皮中的芳香油使芳香油溶解在有机溶剂中，蒸发溶剂后就可获得芳香油方法步骤（1）水蒸气蒸馏（2）分离油层（3）除水过滤（1）石灰水浸泡、漂洗（2）压榨、过滤、静置（3）再次过滤（1）粉碎、干燥（2）萃取、过滤（3）浓缩适用范围适用于提取玫瑰油、薄荷油等挥发性强的芳香油适用于柑橘、柠檬等易焦糊原料的提取适用范围广，要求原料的颗粒要尽可能细小，能充分浸泡在有机溶液中优点简单易行，便于分离生产成本低，易保持原料原有的结构和功能出油率高，易分离局限性水中蒸馏会导致原料焦糊和有效成分水解等问题分离较为困难，出油率相对较低使用的有机溶剂处理不当会影响芳香油的质量注：①水蒸气蒸馏要适当延长蒸馏时间，温度不能太高。②用于萃取的有机溶剂必须事先精制，除去杂质。③压榨时原料必须要浸透，这样压榨时不会滑脱，出油率高，不堵塞筛眼；使用石灰水充分浸泡原料，破坏细胞结构，分解果胶，防止橘皮压榨时滑脱，提高出油率。【2022高考真题之－－生物技术实践】1.（2022江苏卷）17．下列关于酶和固定化酵母细胞的研究与应用的叙述，错误的是A．从酶的固定方式看，吸附法比化学结合法对酶活性影响小B．作为消化酶使用时，蛋白酶制剂以口服方式给药C．尿糖试纸含有固定化的葡萄糖酶和过氧化氢酶，可以反复使用D．将海藻酸钠凝胶珠用无菌水冲洗，目的是洗去CaCl2和杂菌143\n2．（2022江苏）16．下列关于“探究加本系洗衣粉和普通洗衣粉的洗涤效果”的叙述，合理的是A．先用热水溶解洗衣粉，再将水温调节到最适温度B．实验的观察指标可以是相同洗涤时间内污渍的残留程度C．相同pH时加酶洗衣粉洗涤效果好于普通洗衣粉D．衣物质地和洗衣粉用量不会影响实验结果【答案】B【解析】A项先用热水可能会影响酶的活性，所以不妥；只有在最适PH值时使用加酶洗衣粉效果才会好于普通洗衣粉，不同质地的衣物会影响实验结果，所以答案B。【考点定位】考查加酶洗衣粉使用条件，属于对理解、应用层次的考查。3.（2022江苏）18．下列关于“DNA粗提取与鉴定实验”的叙述，正确的是A．洗涤剂能瓦解细胞膜并增加DNA在NaCl溶液中的溶解度B．将DNA丝状物放入二苯胺试剂中沸水浴后冷却变蓝C．常温下菜花匀浆中有些酶类会影响DNA的提取D．用玻棒缓慢搅拌滤液会导致DNA获得量减少【答案】C【解析】DNA溶解度与洗涤剂无关，DNA与二苯胺水浴加热变蓝，不需要冷却；用玻璃棒搅拌，使DNA吸附在玻璃棒上，且DNA量不会减少。所以答案C。【考点定位】本题考查DNA提取和鉴定，属于对识记、理解层次的考查。4.（2022江苏卷）21．下列关于制作果酒、果醋和腐乳的叙述，合理的是A．在果酒发酵后期拧开瓶盖的间隔时间可延长B．条件适宜时醋酸菌可将葡萄汁中的糖分解成醋酸C．果酒发酵过程中发酵液密度会逐渐减小143\nD．将长满毛霉的豆腐装瓶腌制时，底层和近瓶口处需加大用盐量【答案】ABC【解析】在果酒发酵后期，由于瓶中的营养物质减少，单位时间内产生的CO2的量减少，所以拧开瓶盖的间隔时间可以延长，A正确；在糖源、氧气充足的条件下，醋酸菌可将葡萄汁中的糖分解成醋酸，B正确；果酒发酵过程中，营养物质消耗，并且有水的生成，密度会逐渐减小，C正确；将长满毛霉的豆腐装瓶腌制时，要分层加盐，加盐量要随着层数的加高而增加，近瓶口表面的盐要铺厚一些，但底层不需要大量用盐，D错误。【考点定位】考查果酒、果醋和腐乳制作的相关知识，属于对识记层次的考查。5.（2022全国理综大纲）5.关于细菌的叙述中，正确的是A.不同种类细菌的生长均需要相同碳源B.常用液体培养基分离获得细菌单菌落C.细菌大量培养过程中，芽孢形成于细菌生长的调整期D.培养基中含有高浓度NaCl有利于金黄色葡萄球菌的筛选【答案】D【解析】自养型微生物需要无机碳源，异养型微生物需要的是有机碳源，A错误。菌落只能在固体培养基上形成，B错误。芽孢是帮助细菌度过不良环境的结构，在稳定期形成。【考点定位】本题考查微生物的培养与增长的有关知识，属于对识记、理解层次的考查。6.（2022上海卷）9．酶在大规模产业化应用中的核心问题是固定化技术，而酶固定化所依据的基本原理在于酶具有A．热稳定性B．催化高效性C．催化特异性D．可反复使用性7.（2022全国卷新课标版）39．（15分）143\n为了探究6-BA和IAA对某菊花品种茎尖外植体再生丛芽的影响，某研究小组在ＭＳ培养基中加入6-BA和IAA，配制成四种培养基（见下表），灭菌后分别接种数量相同、生长状态一致、消毒后的茎尖外植体，在适宜条件下培养一段时间后，统计再生丛芽外植体的比率（m），以及再生丛芽外植体上的丛芽平均数（n），结果如下表。回答下列问题：（１）按照植物的需求量，培养基中无机盐的元素可分为　　　和　　　两类。上述培养基中，6-BA属于　　　　　类生长调节剂。（２）在该实验中，自变量是　　　，因变量是　　　，自变量的取值范围是　　　。（３）从实验结果可知，诱导丛芽总数最少的培养基是　　　号培养基。（４）为了诱导该菊花试管苗生根，培养基中一般不加入　　　（填“6-BA”或“IAA”）。【答案】（1）大量元素微量元素细胞分裂素（2）IAA的浓度菊花再生丛芽外植体的比率和外植体上的丛芽平均数0—0.5mg.L-1(3)1（4）6-BA【解析】（1）根据植物的需求量，元素可以分为大量元素和微量元素，6-BA属于细胞分裂素类的生长调节剂。（2）根据实验目的和实验中的步骤中的数据，可以看出IAA的浓度是自变量，菊花再生丛芽外植体的比率和外植体上的丛芽平均数是因变量；由图表数据可以看出IAA的浓度范围是0—0.5mg.L-1。（3）再生丛芽的外植体数乘以外植体上丛芽平均数即为丛芽总数，所以最少的是1号培养基。（4）诱导试管苗生根需要生长素用量和细胞分裂素用量的比值比较高，所以培养基中不需要加6-BA。143\n【考点定位】本题考查植物组织培养的有关知识，属于对识记层次的考查。8.（2022山东卷）34．（8分）【生物—生物技术实践】辣椒素作为一种生物碱广泛用于食品保健、医药工业等领域。辣椒素的获得途径如图。（1）图中①和②分别表示辣椒组织培养中细胞的_________和_________过程。（2）图中培养外植体的培养基中常用的凝固剂是________。培养基中的生长素和细胞分裂素用量的比值______（填“高”或“低”）时，有利于芽的分化。对培养基彻底灭菌时，应采用的灭菌方法是__________。（3）图中外植体的消毒所需酒精的体积分数是_______。用酶解法将愈伤组织分离成单细胞时，常用的酶是__________和纤维素酶。（4）提取辣椒素过程中，萃取加热时需安装冷凝回流装置，其目的是_________。9.（2022海南卷）30回答下列关于腐乳制作的问题：（1）腐乳是豆腐经微生物发酵后制成的食品。多种微生物参与了该发酵过程，其中起主要作用的微生物是，其产生的蛋白酶可将豆腐中的蛋白质水解为和；其产生的能将豆腐中的脂肪水解为和。（2）发酵完成后需加盐腌制，加盐还可以抑制生长。143\n（3）腐乳制作的后期可加入由酒和多种香辛料配置而成的卤汤。卤汤具有一定的防腐作用外，还能使腐乳具有独特的。（2）发酵过程中加盐腌制，不仅可以调制风味，而且能够抑制杂菌等其他微生物（3）腐乳制作后期加入卤汤，卤汤不仅可以防腐，还可以使腐乳具有独特的风味（或香味）。【答案】(15分)（1）毛霉肽氨基酸脂肪酶甘油脂肪酸（每空2分，共12分）（2）微生物　（2分）（3）风味　　（1分，其他合理答案也给分）【解析】（1）酵过程中起作用的微生物有多种，如青霉、酵母、曲霉、毛霉等，其中起主要作用的是毛霉，毛霉产生的蛋白酶可将豆腐中的蛋白质水解成多肽和氨基酸，产生的脂肪酶能够将豆腐中的脂肪水解为甘油和脂肪酸。（2）发酵过程中加盐腌制，不仅可以调制风味，而且能够抑制杂菌等其他微生物（3）腐乳制作后期加入卤汤，卤汤不仅可以防腐，还可以使腐乳具有独特的风味（或香味）。【考点定位】本题考查腐乳制作的原理和流程，设计到具体操作过程的作用和意义，均为课本上理解识记内容。10.（2022上海卷）(四)回答下列关于微生物和酶的问题。(10分)高温淀粉酶在大规模工业生产中有很大的实用性。研究者从热泉中筛选了高效产生高温淀粉酶的嗜热菌，其筛选过程如图15所示。44．①过程称为_______，②过程是为了__________。45．Ⅰ号培养基称为_____________(按功能分)；该培养基中除了加入淀粉外，还需加入另一种重要的营养成分_____。A．琼脂B．葡萄糖C．硝酸铵D．碳酸氢钠46．一般对配制的培养基采用高压灭菌，其中“高压”是为了__________________。143\n在高温淀粉酶运用到工业生产前，需对该酶的最佳温度范围进行测定。图16中的曲线①表示酶在各种温度下酶活性相对最高酶活性的百分比。将酶在不同温度下保温足够长的时间，再在酶活性最高的温度下测其残余酶活性，由此得到的数据为酶的热稳定性数据，即图16中的曲线②。47．根据图中的数据，判断该酶使用的最佳温度范围是______。A．40℃一50℃B．50℃一60℃C．60℃一70℃D．70℃-80℃48．据图判断下列叙述错误的是______。A．该酶只能在最佳温度范围内测出活性B．曲线②35℃数据点是在80℃时测得的C．曲线①表明80℃是该酶活性最高的温度D．曲线②表明该酶的热稳定性在70℃之后急剧下降143\n【2022高考真题之－－生物技术实践】1、(2022江苏卷)下列果酒、果醋和腐乳制作相关的叙述，正确的是A．腐乳制作所需要的适宜温度最高B．果醋发酵包括无氧发酵和有氧发酵C．使用的菌种分别是酵母菌、醋酸菌、乳酸菌D．使用的菌种都具有细胞壁、核糖体、DNA和RNA答案：D143\n解析：果酒制作酵母菌繁殖适宜温度20度左右，酒精发酵时适宜温度在18~25度，果醋制作适宜温度30~35度，腐乳制作适宜温度15度~18度，所以A选项错误；醋酸菌为好氧细菌，只有当氧气充足时，才能进行旺盛的生理活动，所以B选项错误；果酒、果醋和腐乳制作使用的菌种分别是是酵母菌、醋酸菌、毛霉等。所以C选项错误；D选项正确。2.（2022江苏卷）下列有关酶的制备和应用的叙述，正确的是A．酶解法和吸水涨破法常用于制备微生物的胞内酶B．透析、电泳和酸解等方法常用于酶的分离与纯化C．棉织物不能使用添加纤维素酶的洗衣粉进行洗涤D．多酶片中的胃蛋白酶位于片剂的核心层答案：A解析：酶解法去除细胞壁，吸水涨破法使细胞破裂释放出胞内酶，所以A选项正确；酶的分离和纯化不可以用酸解法，所以B选项错误；纤维素酶本身不能去除衣物上的污垢，它的作用主要是去除棉纺织品表面的浮毛以及表面附着的沉积性顽渍，同时可以使纤维的结构变得蓬松，从而使渗入到纤维深处的尘土和污垢能够与洗衣粉充分接触，从而达到更好的去污效果，所以C选项是错误的；蛋白酶在胃液中发挥作用，应在多酶片的最外层，所以D选项错误。3.（2022江苏卷）下列有关植物组织培养的叙述，正确的是A．愈伤组织是一团有特定结构和功能的薄壁细胞B．二倍体植株的花粉经脱分化与再分化后得到稳定遗传的植株C．用人工薄膜将胚状体、愈伤组织等分别包装可制成人工种子D．植物耐盐突变体可通过添加适量NaCl的培养基培养筛选而获得答案：D解析：愈伤组织是处于未分化的状态，所以没有特定结构和功能，所以A选项错误；二倍体植株的花粉经脱分化与再分化后得到的植株是单倍体，高度不育，所以B选项错误；人工种子就是以植物组织培养得到的胚状体、不定芽、顶芽和腋芽等为材料，经过人工薄膜包装得到的种子，所以C选项错误；可通过添加适量NaCl的培养基培养淘汰不耐盐个体，筛选出耐盐个体，所以D选项正确。4、（2022江苏卷）在利用鸡血进行“DNA的粗提取与鉴定”的实验中，相关叙述正确的是A．用蒸馏水将NaCl溶液浓度调至0.14mol/L，滤去析出物B．调节NaCl溶液浓度或加入木瓜蛋白酶，都可以去除部分杂质C．将丝状物溶解在2mol/NaCl溶液中，加入二苯胺试剂即呈蓝色143\nD．用菜花替代鸡血作为实验材料，其实验操作步骤相同答案：B解析：用蒸馏水将NaCl溶液浓度调至0.14mol/L，析出物就是DNA，不能滤去，所以A选项错误；B选项正确；将丝状物溶解在2mol/NaCl溶液中，加入二苯胺试剂后需水浴加热才呈蓝色，所以C选项错误；鸡血细胞可直接加入蒸馏水使细胞破裂释放DNA，而菜花做材料时需加入洗涤剂溶解细胞膜，使DNA释放，所以D选项错误。5.（2022广东卷）以下关于猪血红蛋白提纯的描述，不正确的是A.洗涤红细胞时，使用生理盐水可防止红细胞破裂B.猪成熟红细胞中缺少细胞器和细胞核，提纯时杂蛋白较少C.血红蛋白的颜色可用于凝胶色谱法分离过程的监测D.在凝胶色谱法分离过程中，血红蛋白比分子量较小的杂蛋白移动慢6.（2022山东卷）研究发现柚皮精油和乳酸菌素（小分子蛋白质）均有抑菌作用，两者的提取及应用如图所示。（1）柚皮易焦糊，宜采用____________法提取柚皮精油，该过程得到的糊状液体可通过___________除去其中的固体杂质。143\n（2）筛选乳酸菌A时可选用平板划线法或____________接种。对新配制的培养基灭菌时所用的设备是_______________。实验前需对超净工作台进行____________处理。（3）培养基中的尿素可为乳酸菌A生长提供______________。电泳法纯化乳酸菌素时，若分离带电荷相同的蛋白质，则其分子量越大，电泳速度___________。（4）抑菌实验时，在长满致病菌的平板上，会出现以抑菌物质为中心的透明圈。可通过测定透明圈的______________来比较柚皮精油和乳酸菌素的抑菌效果。7.（2022新课标全国卷）有些细菌可分解原油，从而消除由原油泄漏造成的土壤污染。某同学欲从含原油的土壤中筛选出高效降解原油的菌株。回答问题：（1）在筛选过程中，应将土壤样品稀释液接种于以为唯一碳源的固体培养基土，从功能上讲，该培养基属于培养基。（2）纯化菌种时，为了得到单菌落，常采用的接种方法有两种，即和。（3）为了筛选出高效菌株，可比较单菌落周围分解圈的大小，分解圈说明该菌株的降解能力。（4）通常情况下，在微生物培养过程中实验室常用的灭菌方法有灼烧灭菌、和。无菌技术要求试验操作应在酒精灯附近进行，以避免周围环境中微生物的污染。答案：（1）原油选择（2）平板划线法稀释涂布平板法（3）强（4）干热灭菌高压蒸汽灭菌火焰解析：本题综合考查了微生物的培养、筛选等相关知识。（1）选择培养基是在培养基中加入某一化学物质或改变某一理化性质，使某一微生物正常生长，而其他微生物则143\n被杀灭或抑制，从而选出所需要的微生物；本小题就是利用该细菌能高效降解原油的特性，用选择培养基将其筛选出来的。（2）纯化菌种的方法包括平板划线法和稀释涂布平板法。（3）（4）见答案。【2022高考真题之－－生物技术实践】1、（10广东卷）小李尝试制作果酒，他将葡萄汁放入已灭菌的发酵装置中进行试验（见图10），恰当的做法是A．加入适量的酵母菌B．一直打开阀b通气C．一直关紧阀a，偶尔打开阀b几秒钟D．把发酵装置放到4℃冰箱中进行试验【答案】AC【解析】本题主要考查学生的理解能力。果酒的制备过程中先让酵母菌在有氧条件下迅速扩增，再让酵母菌在无氧条件下发酵产生酒精。2、（10江苏卷）右图表示果酒和果醋制作过程中的物质变化过程，下列叙述正确的是A.过程①和②都只能发生在缺氧条件下B.过程①和都③只发生在酵母细胞的线粒体中C.过程③和④都需要氧气的参与D.过程①~④所需的最适温度基本相同【答案】C【解析】本题考查果酒果醋制作过程的反应条件等的区别。①过程有氧无氧条件均可以发生，②过程只能发生在无氧条件下，A项错误。①在酵母菌细胞质基质中进行，③在酵母菌线粒体内进行，B项错误。③为有氧呼吸第二、三阶段，需要氧气参与，④需要氧气参与，C项错误。过程①、②、③为酵母菌的呼吸作用，最适宜温度约为20°C左右；④的最适宜温度为30—35°C，D项错误。3、（10北京卷）在家庭中用鲜葡萄制作果酒时，正确的操作是143\nＡ．让发酵装置接受光照Ｂ．给发酵装置适时排气Ｃ．向发酵装置通入空气Ｄ．酵母菌装置放在45℃处【答案】B【解析】本题考查果酒制作的知识。此考点在高考中出现的次数较少。在无氧条件下，酵母菌能进行酒精发酵，发酵装置不需要接受光照，发酵时也不能通入空气，一般将发酵温度控制在18～25℃。4、（2022山东高考理综）生物柴油是一种可再生的清洁能源，其应用在一定程度上能够减缓人类对化石燃料的消耗，科学家发现，在微生物M产生的脂肪酶作用下，植物油与甲醇反应能够合成生物柴油（如下图）。用于生产生物柴油的植物油不易发挥，宜选用_____、_____方法从油料作物中提取。（2）筛选产脂肪酶的微生物M时，选择培养基中的添加的植物油为微生物生长提供____，培养基灭菌采用的最适方法是____法。（3）测定培养液中微生物数量，可选用_____法直接计数；从微生物M分离提取的脂肪酶通常需要检测______，以确定其应用价值；为降低生物柴油生产技术，可利用______技术使脂肪酶能够重复使用。（4）若需克隆脂肪酶基因，可应用耐热DNA聚合酶催化的_____技术。【答案】（1）压榨；萃取。（注：两空顺序无先后）（2）碳源；高压蒸汽灭菌（3）显微镜直接计数；酶活性（或：酶活力）    固定化梅（或：固定化细胞）（4）PCR（或：多聚酶链式反应，聚合酶链式反应）【解析】(1）因为植物油不挥发，所以不适合采用蒸馏法提取，应用压榨法或萃取法提取。（2）植物油中不含矿质元素，只为微生物提供碳源。培养基适合用高压蒸汽灭菌法进行灭菌。143\n（3）测定微生物的数量，可以用显微镜直接计数。分离出的脂肪酶要对其活性进行检测，以确定其实用价值。可以利用酶固定技术重复使用脂肪酶。（4）利用PCR技术可以扩增基因。5、（10海南卷）葡萄发酵可产生葡萄酒，请利用相关的知识回答问题：（1）利用葡萄制作葡萄酒的过程中，发挥作用的微生物是＿＿＿＿＿＿＿＿。（2）该微生物通过无氧呼吸可分解＿＿＿＿＿，产生的终产物是＿＿＿＿和＿＿＿＿＿。（3）甲、乙、丙三位同学将葡萄榨成汁后分别装入相应的发酵瓶中，在温度等适宜的条件下进行发酵，如图所示。发酵过程中，每隔一段时间均需排气一次。据图分析，甲和丙同学的操作有误，其中甲同学的错误是＿＿＿＿＿＿，导致发酵中出现的主要异常现象是＿＿＿＿＿＿＿＿。丙同学的错误是＿＿＿＿＿＿＿，导致发酵中出现的主要异常现象是＿＿＿＿＿＿＿＿＿。上述发酵过程结束后，甲、乙、丙同学实际得到的发酵产品依次是＿＿＿＿、＿＿＿＿、＿＿＿＿。（4）在上述制作葡萄酒的过程中，假设乙同学的某一步骤操作错误导致发酵瓶瓶塞被冲开，该操作错误是＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿。143\n6、（10江苏卷）右图1表示制备固定化酵母细胞的有关操作，图2是利用固定化酵母细胞进行酒精发酵的示意图．下列叙述正确的是A．剐溶化的海藻酸钠应迅速与活化的酵母菌混合制备混合液-B．图1中X溶液为溶液，其作用是使海藻酸钠形成凝胶珠C．图2发酵过程中搅拌的目的是为了使培养液与酵母菌充分接触D．图1中制备的凝胶珠用蒸馏水洗涤后再转移到图2装置中7、（10新课标）下列是与芳香油提取相关的问题，请回答：（1）玫瑰精油适合用水蒸气蒸馏法提取，其理由是玫瑰精油具有的性质。蒸馏时收集的蒸馏液(是、不是)纯的玫瑰精油，原因是。（2）当蒸馏瓶中的水和原料量一定时，蒸馏过程中，影响精油提取量的主要因素有蒸馏时间和。当原料量等其他条件一定时，提取量随蒸馏时间的变化趋势是。（3）如果蒸馏过程中不进行冷却，则精油提取量会，原因是。（4）密封不严的瓶装玫瑰精油保存时最好存放在温度的地方，目的是。（5）某植物花中精油的相对含量随花的不同生长发育时期的变化趋势如图所示。提取精油时采摘花的最合适时间为天左右。143\n(6)从薄荷叶中提取薄荷油时(能、不能)采用从玫瑰花中提取玫瑰精油的方法，理由是。【答案】⑴易挥发、难溶于水、化学性质稳定；不是；玫瑰精油随水蒸气一起蒸馏出来，所得到的是油水混合物；（2）蒸馏温度在一定时间内提取量随蒸馏时间的延长而增加，一定时间后提取量不再增加；（3）下降部分精油会随水蒸气挥发而流失；（4）较低减少挥发；（5）a；（6）能薄荷油和玫瑰精油的化学性质相似【解析】本题以曲线图为信息载体，考查植物芳香油的提取方法及影响出油率的因素，及识记、理解、分析判断、应用和获取有效信息的能力。从图形中能获取有效信息、能运用所学知识解答实际问题是正确解答该题的关键。（1）植物芳香油的提取方法有蒸馏、压榨和萃取等，具体采用哪种方法要根据植物原料的特点来决定。而水蒸气蒸馏法是植物芳香油提取的常用方法，它的原理是利用水蒸气将挥发性较强的植物芳香油携带出来，形成油水混合物，冷却后，混合物又会重新分出油层和水层。玫瑰精油的化学性质稳定，难溶于水，易溶于有机溶剂，能随水蒸气一同蒸馏，所以运用水蒸气蒸馏法提取，收集到的蒸馏液为油水混合物。（2）蒸馏时许多因素都会影响产品的品质，如蒸馏温度、时间等。在一定范围内随着蒸馏时间的延长，精油的提取量会增加，但因原料量等条件一定，故超过一定时间后，提取量不再增加。(3)蒸馏过程中要冷却，让混合物重新分出油层和水层。若不冷却则会有部分玫瑰精油随水蒸气挥发而流失，使精油提取量下降。（4）因玫瑰精油易挥发，故密封不严的瓶装玫瑰油玫瑰油应存放在温度较低的地方，以减少玫瑰精油的挥发。（5）提取精油时采摘花的最适时间为花中精油的相对含量最高的时间，即a天左右。（6）因薄荷油和玫瑰精油的化学性质相似，易挥发、难溶于水等；故也可用于玫瑰精油相同的方法提取。8、（10浙江自选模块）题号：17科目：生物“生物技术实践”模块（10分）请在标有序号的空白处填空，并将序号及相应答案写在答题纸上，每空1分，共10分。某同学进行苹果汁制作实验，工艺如下图所示。143\n（1）图中用的溶液浸泡苹果的目的是______①___________。黑曲霉提取液中含有的_____②____可水解果胶，从而使果汁澄清。固定化柱中填充的石英砂通过____③______方式将酶固定化，酶被固定在用蒸馏水洗涤固定化柱是为了除去________④_________。（2）实验中，操作流程A和B的先后顺序为_________⑤________。在苹果汁澄清过程中，应关闭的流速调节阀是_______⑥__________。要测定从固定化柱流出的苹果汁中式否还有果胶，可取一定量的果汁与等量的_______⑦________混合，如果出现_______⑧________现象，说明果胶还没有被完全水解。为使果胶完全水解，应将流速调____⑨______。试验后，将洗涤过的固定化柱在低温环境中保存若干天，该固定化柱仍可用于苹果汁制作实验，说明固定化酶可被__⑩_____使用。9.(2022江苏卷)某生物兴趣小组开展DNA粗提取的相关探究活动。具体步骤如下： 材料处理：称取新鲜的花菜、辣椒和蒜黄各2份，每份l0g。剪碎后分成两组，一组置于20℃、另一组置于一20℃条件下保存24h。 DNA粗提取：143\n第一步：将上述材料分别放入研钵中，各加入l5mL研磨液，充分研磨。用两层纱布过滤。取滤液备用。第二步：先向6只小烧杯中分别注入10mL滤液，再加入20mL体积分数为95％的冷酒精溶液，然后用玻璃棒缓缓地向一个方向搅拌，使絮状物缠绕在玻璃棒上。第三步：取6支试管，分别加入等量的2mol／LNaCl溶液溶解上述絮状物。DNA检测：在上述试管中各加入4mL二苯胺试剂。混合均匀后，置于沸水中加热5min，待试管冷却后比较溶液的颜色深浅,结果如下表。材料保存温度花菜辣椒蒜黄20℃++++++-20℃+++++++++分析上述实验过程，回答下列问题：(1)该探究性实验课题名称是     。(2)第二步中”缓缓地”搅拌，这是为了减少    。(3)根据实验结果，得出结论并分析。 ①结论1：与20℃相比，相同实验材料在-20℃条件下保存，DNA的提取量较多。   结论2：    。 ②针对结论I．请提出合理的解释：    。(4)氯仿密度大于水，能使蛋白质变性沉淀，与水和DNA均不相溶，且对DNA影响极小。为了进一步提高DNA纯度，依据氯仿的特性．在DNA粗提取第三步的基础上继续操作的步骤是：     ，然后用体积分数为95％的冷酒精溶液使DNA析出。【答案】（1）探究不同材料和不同保存温度对DNA提取量的影响（2）DNA断裂（3）①等质量的不同实验材料，在相同的保存温度下，从蒜黄提取的DNA量最多②低温抑制了相关酶的活性，DNA降解速度慢（4）将第三步获得的溶液与等量的氯仿充分混和，静置一段时间，吸取上清液【解析】本题以实验过程和结果为载体，考查DNA粗提取与鉴定的基本原理、过程及实验的分析能力。熟记实验原理、能从表格中获取准确信息是正确解答该题的关键。（1）从表格可以看出，该实验有两个自变量：材料和温度。所以该探究性实验课题名称为探究不同材料和不同温度对DNA提取量的影响。低温抑制了相关酶的活性，DNA降解速度慢，提取的DNA143\n较多。（2）第二步中用玻璃棒搅拌的目的是获取DNA絮状物，所以若速度快，易造成DNA断裂。（3）本实验的结论可从两个方面来考虑：①相同材料在不同温度下的结论；②不同材料在相同温度下的结论。（4）氯仿能使蛋白质变性，而对DNA影响极小，所以可将第三步获得的溶液与氯仿混合，又氯仿密度大于水，所以蛋白质沉淀位于溶液下部，DNA位于上清液中。【2022最新模拟题之－－生物技术实践】1.（2022届江苏省南师大附中高三模拟）下列关于生物技术实践的叙述中，错误的是(　　)A．蛋白质纯化过程中采用透析法可去除溶液中的小分子杂质B．加入洗涤剂和水后植物细胞的细胞壁分解，DNA从植物细胞释放出来C．利用PCR技术扩增目的基因时，引物Ⅰ和引物Ⅱ的碱基序列不能互补D．腐乳制作过程中，添加料酒、香辛料和盐，均可以抑制杂菌的生长【答案】B【解析】洗涤剂能够瓦解细胞膜，不能分解细胞壁。由于细胞壁的可塑性，加水后细胞不能裂解，DNA不能释放出来。2.（2022届江苏省淮安市高三第四次调研）下列与果酒、果醋和腐乳制作相关的叙述，正确的是（）A．在无氧条件下，醋酸杆菌能够将酒精发酵成醋酸B．使用的菌种分别是酵母菌、醋酸菌、乳酸菌C．在发酵过程中都需要保持在恒定的温度条件下D．使用的菌种都具有细胞壁、核糖体、DNA和RNA【答案】D【解析】制作果酒的菌种是酵母菌，制作果醋的菌种是醋酸菌，制作腐乳的菌种是毛霉，三者都有细胞壁、核糖体、DNA和RNA。3.（2022届吉林省扶余一中下学期期中）固定化细胞常用包埋法固定化，原因是A．包埋法固定化操作最简便B．包埋法对酶活性的影响最小C．包埋法固定化具有普遍性D．细胞体积大，难以被吸附或结合【答案】D143\n【解析】由于细胞体积大，难以被吸附或结合，所以采用包埋法固定化细胞。4.(2022·黄山模拟)实验测定链霉素对3种细菌的抗生素效应，用3种细菌在事先准备好的琼脂平板上画3条等长的平行线(3条线均与图中的链霉素带接触)，将平板置于37℃条件下恒温培养3天，结果如图所示。从实验结果分析，以下叙述不正确的是()A．链霉素能阻止结核菌的生长B．链霉素对结核菌比对霍乱菌更有效C．链霉素对结核菌比对伤寒菌更有效D．链霉素可以用于治疗伤寒病人6.（2022届江苏省泰州中学下学期期中考试）某组织培养实验室的愈伤组织被真菌污染，为查找污染原因工作人员设计了4个实验，实验条件除变量外其他因素均相同，图示为实验结果，由此得出的初步结论中错误的是143\nA．污染主要不是培养基灭菌时间短造成的B．污染主要来源于组织培养所用的离体组织C．调节培养基pH不能解决污染问题D．调节培养温度即可解决污染问题【答案】D【解析】本题主要考查解读表格图的能力。读图可以看出，A随培养时间的变化污染率波动，所以A正确；B中的曲线变化明显，是污染的主要因素；C通过调节pH值的变化污染问题变化不在，说明C选项正确；D选项在不同的温度呈波动状态说明调节培养温度不能解决污染问题。7.（2022届江苏省淮安市高三第四次调研）下列有关蛋白质和DNA提取和分离的说法正确的是（）A．提取植物细胞中的DNA先要用酶解法破壁和吸水涨破法释放B．透析、电泳常用于去除蛋白质、DNA等生物大分子中混有的小分子杂质C．可以用鸡血作为血红蛋白和DNA粗提取的良好材料D．调节NaCl溶液浓度或加入木瓜蛋白酶，都可以去除血红蛋白中的部分杂质【答案】C【解析】鸡血细胞中含有血红蛋白和DNA，是提取血红蛋白和DNA的良好材料。8.（2022届上海市浦东新区高三第三次模拟）下列关于酶制剂的叙述正确的是（）A．需依次经过提纯、沉淀、过滤等过程B．经过固定化的酶才能称为酶制剂C．酶制剂活性的维持需要提供营养物质D．酶制剂中的酶来源于活细胞【答案】D【解析】酶制剂是指从生物中提取的具有酶特性的一类物质，主要作用是催化食品加工过程中各种化学反应，改进食品加工方法。143\n9.（2022届广东省中山一中段考）小李尝试制作果酒，他将葡萄汁放入已灭菌的发酵装置中进行试验（见右上图），正确做法是A．适量的酵母菌B．将发酵装置放到4℃冰箱中进行试验C．关紧阀a，偶尔打开阀b几秒钟D．开阀b通气11.（2022届江苏省重点中学5月质量检测）在20世纪50年代，酶已经大规模地应用于各个生产领域，到了70年代又发明了固定化酶与固定化细胞技术。(1)在实际生产中，固定化酶技术的优点是__________________。与固定化酶技术相比，固定化细胞技术固定的是_________________。(2)制备固定化酵母细胞，常用的包埋材料是________，使用了下图中方法[　]________(填出号码及名称)。143\n(3)制作固定化酵母菌细胞时，充分混合均匀的酵母细胞溶液可在饱和________溶液中形成凝胶珠。部分同学实验制得的凝胶珠不是圆形或椭圆形，其主要原因是__________________________________。(4)用如图所示的装置来进行葡萄糖发酵。a是固定化酵母细胞，b是反应柱。①从上端漏斗中加入反应液的浓度不能过高的原因是______________。②要想得到较多的酒精，加入反应液后的操作是________（打开或关闭）活塞1和________（打开或关闭）活塞2。③为使该实验中所用的固定化酵母细胞可以反复利用，实验过程一定要在________条件下进行。④装置中的长导管起的作用是【解析】制备固定化酵母细胞，由于细胞体积大，难以被吸附或结合，多采用包埋法，常用的载体是海藻酸钠。酵母细胞胶液能在饱和的CaCl2143\n溶液中形成凝胶珠。若海藻酸钠浓度过高或针筒距离液面过近，得到的凝胶珠可能不是圆形。酵母细胞的固定化和应用固定化酵母细胞发酵生产酒精的过程。细胞体积较大，不宜用物理吸附法和化学结合法固定，通常采用包埋法固定。酵母细胞的活化需要加水混合，使其恢复正常的生活状态；凝胶珠是将海藻酸钠和酵母细胞的混合液滴加到CaCl2溶液中制成的；用固定化酵母细胞发酵产生酒精时，要保证酵母菌的生活状态，反应液的浓度应该适合酵母菌的生活；酒精发酵是无氧发酵，将反应液加入反应柱中后应该关闭活塞1和活塞2，以营造无氧环境；要想使固定后的酵母细胞反复利用，就要避免其他微生物的污染，因此实验过程一定要在无菌条件下进行；酒精发酵过程中会产生CO2，因此要设置长导管，它既可以将产生的CO2释放出去，又能避免空气中的杂菌进入反应柱。12.（2022届上海市浦东新区高三第三次模拟）回答下列关于微生物的问题。为探究青霉素对大肠杆菌生长的影响，某学生在涂布大肠杆菌的平板培养基上，依次放置浸有不同浓度青霉素溶液的圆纸片，并将培养基置于37℃恒温培养，3天后，培养结果如图1所示。1．图示实验的原理是。2．图中浸无菌水圆纸片的作用是__________。3．为使实验结果科学、可靠，并控制青霉素剂量，对圆纸片的要求是4．实验结果说明_____________________。5．某小组用上述实验方法研究了相同浓度的5种抗生素对枯草杆菌生长的影响，在图2中表示处理方案，并对处理加以注解。6．上海将抗生素列为处方药的主要目的是。143\n【答案】1．青霉素能抑制大肠杆菌细胞壁的合成，青霉素周围出现无菌的透明圈2．作为对照，以排除圆纸片对细菌生长的影响3．等大、质地相同，浸润溶液后须沥干4．青霉素对大肠杆菌生长起抑制作用，在一定范围内，青霉素浓度越高抑制作用越强5．6．防止滥用抗生素，以免加速细菌的耐药性，杀死人体内的正常菌群进而降低人的免疫能力和维生素等的供应。【解析】本题考查探究青霉素对大肠杆菌生长的影响的实验，图中浸无菌水圆纸片的作用是作为对照，以排除圆纸片对细菌生长的影响，实验结果科学、可靠，并控制青霉素剂量，对圆纸片的要求是等大、质地相同，浸润溶液后须沥干。其余详解见答案。13.（2022届吉林省汪清六中下学期期中考试）有些细菌可分解原油，从而消除由原油泄漏造成的土壤污染。某同学欲从受原油污染的土壤中筛选出高效降解原油的菌株。回答问题：（1）在筛选过程中，应将土壤样品稀释液接种于以为唯一碳源的固体培养基，从功能上讲，该培养基属于培养基。（2）纯化菌种时，为了得到单菌落，常采用的接种方法有两种，即和。（3）为了筛选出高效菌株，可比较单菌落周围分解圈的大小，分解圈大说明该菌株的降解能力。（4）通常情况下，在微生物培养过程中实验室常用的灭菌方法有灼烧灭菌、和。无菌技术要求试验操作应在酒精灯附近进行，以避免周围环境中微生物的污染。【答案】（1）原油选择（2）平板划线法稀释涂布平板法（3）强（4）干热灭菌高压蒸汽灭菌火焰143\n【解析】分离微生物的方法通常采用选择培养基来进行，由于选择出来的是分解原油的细菌，以原油作为唯一碳源，纯化微生物的方法有平板画线法和稀释涂布平板法，细菌将原油分解后就在菌落周围留下透明圈，越大分解能力越强，灭菌的方法有灼烧灭菌、干热灭菌、高压蒸汽灭菌等。14.（2022学年山西省山大附中3月月考）急性肠胃炎、手足口病分别是由细菌、病毒通过消化道进入人体导致的。因此检验饮用水的细菌含量和病毒含量是有效监控疾病发生的必要措施，请回答下列与检验饮用水有关的问题：(1)检验大肠杆菌的含量时，通常将水样进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的水样用涂布器分别涂布到琼脂固体培养基的表面进行培养，记录菌落数量，这种方法称为__________。下面四种菌落分布图中，不可能用该方法得到的是________。(2)用该方法统计样本菌落数时是否需要设置对照组？________，为什么？_________________。(3)如分别取0.1mL已稀释103倍的水样分别涂布到三个琼脂固体培养基的表面进行培养，培养基记录到大肠杆菌的菌落数分别为55、56、57，则每升原水样中大肠杆菌数为____________。(4)已知大肠杆菌能发酵乳糖并产酸产气，现提供足量的已灭菌的乳糖蛋白胨培养液和具塞试管，应如何判断待检水样中是否含有大肠杆菌？_____________________________。(5)手足口病的病原体是柯萨奇病毒。如需检测水样中是否有柯萨奇病毒，可以通过检测柯萨奇病毒特有的DNA片段来实现。但是水样中的病毒DNA极少，这时可以通过________技术扩增病毒DNA片段，然后进行检测。采用这种技术进行DNA扩增时，一定需要用到的酶是__________。15.（2022届湖北省八市高三3月联考）143\n现代人吃什么都讲究天然，所以目前市场上果汁饮料越来越受到青睐。请根据所学的有关知识回答：（1）果汁饮料的包装瓶上写着105℃高温瞬时灭菌的意思是，这样做的目的是。（2）自己在家中榨的果汁很容易腐败，而果汁装瓶上写着“不含任何防腐剂，最长保质期为一年”，其中的奥秘是。（3）在果汁加工过程中可添加酶来提高出汁率和清澈度。（4）苹果醋是很受欢迎的饮料之一，其生产过程中利用了的发酵作用，该过程需控制的温度条件是。（5）在传统发酵技术中，果醋的制作往往在果酒制作基础上进行，请用相关反应式表示：。16.（2022届湖北省八市高三3月联考）柑橘浑身是宝，柑橘中含有丰富的β一胡萝卜素，对夜盲症、皮肤角化有一定疗效，有利于儿童的生长发育并可提高免疫力。柑橘中含有较多维生素C，对坏血病有防治作用。柑橘皮还可以用来提取橘皮精油，橘皮精油是食品、化妆品和香水配料的优质原料，具有很高的经济价值。请回答下列问题：（1）一般提取橘皮精油的方法是法。橘皮在中的浸泡时间为10h以上，并且橘皮要浸透，这样才会得到高的出油率。（2）橘皮精油的提取之所以不采取水蒸气蒸馏法，是因为水中蒸馏会导致原料和有效成分____等问题。（3）如果要对具有优良性状的柑橘树进行组织培养，可选用花药进行离体培养，选择花粉发育至____的花药培养成功率最高。确定花粉发育时期最常用的方法有法，某些植物的花粉不易着色，则须采用法。（4）影响植物组织培养的因素很多，其中最关键的激素有。【答案】143\n【解析】本题考查橘皮精油的提取、植物组织培养等相关知识，属于对识记、理解层次的考查。祥解见答案。17.（2022届江西省高三第一次五校联考）下面是果酒和果醋制作的实验流程和某同学设计的果酒和果醋的发酵装置。根据图示回答下列问题：（1）完成图1中的实验流程，则矩形框内应为。（2）果酒和果醋的制作分别利用了和（填生物名称）两种微生物的发酵原理。由果酒转变成果醋的制作时，需要改变的环境条件是和，主要原因是（答出两点）。（3）图2装置中的充气口在过程中要关闭，而排气口在该过程中应开放，目的是用来排出产生的。排气口要通过一个长而弯曲的胶管与瓶身连接，其目的是。（4）果汁发酵后是否有酒精产生，可用来检验，在酸性条件下呈现色证明有酒精产生。（5）葡萄是否需要灭菌？为什么？。。【答案】（1）醋酸发酵（2）酵母菌；醋酸菌；氧气；温度30—35℃。醋酸菌是好氧细菌，只有当氧气充足，才能进行旺盛的生命活动；醋酸菌的最适生长温度为30—35℃。（2分）（3）酒精发酵；酵母菌无氧呼吸；二氧化碳；避免空气中其它微生物进入发酵装置（防止空气中的微生物污染）（4）重铬酸钾　　灰绿色143\n（5）不需要，在葡萄酒的自然发酵过程中，起主要作用的是附着在葡萄皮上的野生型酵母菌。灭菌会杀死葡萄皮上附着的酵母菌，使发酵不能进行（2分）【解析】本题考查果酒和果醋制作的实验装置、流程、条件控制。解题时同学们要充分运用酵母菌的代谢特征去分析题目给出的问题。⑴醋酸菌可以利用酵母菌无氧呼吸产生的酒精来生产醋酸；所以可以利用酒精发酵的产物进行醋酸发酵。⑵醋酸杆菌需要在有氧且温度是30～35℃条件下，才能将糖转化成醋酸，而此时酵母菌酒精发酵的条件是无氧且温度是18～25℃。⑶用酵母菌制作果酒的后期（酒精生成阶段），充气孔应关闭，创造一个无氧环境；果醋制作过程中要不断补充氧气，要把冲气孔打开。果酒、果醋制作使用的装置，装置中的排气口与一弯曲的胶管连接，可以防止空气中的微生物进入装置造成污染。⑷⑸见答案。【2022最新模拟题之－－生物技术实践】1．(2022·合肥)科学家通过实验发现了细菌的快速进化过程。人们发现，用肉汤培养假单胞杆菌，如果肉汤保持不动，不久后，在肉汤的不同部位，如表面、底部或其他部位，细菌的形态发生了如下图所示的变化，出现一定数量的变异株。下列有关说法错误的是(　　)A．这个实验说明了细菌在不同的小环境中发生了进化B．细菌的生命周期短，繁殖速度快，容易受到外界环境影响而发生变化C．用静止的肉汤培养FS细菌，其菌落形状将趋于一致D．用不断摇动的肉汤培养SM细菌，不会出现FS细菌和WS细菌【答案】C【解析】分析题干信息可知，起初的SM细菌在静止的肉汤表面繁殖，一段时间后，有一部分在肉汤底部繁殖，这部分可能向厌氧方面进化，故细菌在不同的小环境下可发生进化；细菌繁殖周期短，繁殖速度快，容易受外界环境的干扰；用静止的肉汤培养FS细菌，该细菌也有可能向不同方向进化，如进化成WS细菌；搅拌肉汤，SM细菌生活的环境没有差异，就不会出现FS细菌和WS细菌。2．(2022·江苏)发酵工程的一项关键措施是灭菌，关于灭菌的叙述正确的是(　　)A．培养基和发酵设备均需要严格灭菌143\nB．灭菌是杀死培养基中的一切细菌和真菌C．通入无菌空气可以达到灭菌的目的D．pH调到7左右灭菌效果最好【答案】A【解析】本题考查发酵工程的灭菌。灭菌不仅是杀死一切细菌，而且需杀死它们的芽孢和孢子，B错误；通入无菌空气是为了避免混入杂菌造成污染，C项错误；不同微生物的适宜pH不同，灭菌效果最好的pH不一定是7，D项错误。3．(2022·北京东城)探究温度对果胶酶活性的影响、pH对酶活性的影响、果胶酶的用量三个实验中，实验变量依次为(　　)A．温度、酶活性、酶用量B．苹果泥用量、pH、果汁量C．反应时间、酶活性、酶用量D．温度、pH、果胶酶用量【答案】D【解析】解题时首先要明确实验变量、反应变量等基本概念，在此基础上针对三个探究实验进行分析。4．(2022·北京海淀)如图甲是果醋发酵装置，乙是发酵过程中培养液pH变化曲线图，下列叙述正确的是(　　)A．发酵初期不透气，溶液中没有气泡产生B．中期可以闻到酒香，说明进行了酒精发酵C．后期接种醋酸菌，适当通气并保持原有温度D．图乙中能正确表示pH变化的曲线是③5．(2022·北京海淀)为探究落叶是否在土壤微生物的作用下腐烂，下列各项构成了一个实验设计，其中不符合实验目的的步骤是(　　)143\nA．可选择带有落叶的土壤为实验材料，筛选出落叶和土壤B．将落叶平均分成两份，把土壤也平均分成两份C．将灭菌的落叶设为实验组，不做处理的落叶设为对照组D．将落叶分别埋入两组土壤中，观察腐烂情况【答案】C【解析】该实验是为了探究落叶的分解是否与土壤微生物有关，所以该实验的自变量是土壤微生物的有无，其他无关变量实验组和对照组均应保持一致，C错误。6．(2022·唐山)下列关于果酒和果醋制作的叙述，不正确的是(　　)A．参与发酵的微生物都含有线粒体B．发酵过程中培养液pH都会下降C．制果酒时瓶口需密封，而制果醋时需要通入氧气D．果酒制成后可将装置移至温度略高的环境中制果醋【答案】A【解析】果酒发酵要酵母菌，酵母菌具有线粒体等复杂的细胞器，果醋发酵需要醋酸菌，醋酸菌没有线粒体等细胞器，只具有核糖体一种细胞器；果酒发酵过程中会产生二氧化碳，果醋发酵过程中会产生醋酸，培养液的pH均会降低；果酒发酵的后期需密封，酒精是在无氧条件下产生的。7．(2022·南京)关于DNA和血红蛋白的提取与分离实验的叙述中，错误的是(　　)A．可用蒸馏水胀破细胞的方法从猪红细胞中提取到DNA和蛋白质B．用不同浓度的NaCl溶液反复溶解与析出DNA可除去部分杂质C．透析法分离蛋白质的依据是蛋白质不能通过半透膜D．进一步分离与纯化血红蛋白可用凝胶色谱法、离心法和电泳法等【答案】A【解析】猪是哺乳动物，哺乳动物成熟的红细胞中无细胞核和线粒体，不能从其红细胞中提取出DNA。8．(2022·南京)酶制剂、固定化酶、固定化细胞已经广泛地应用于各个领域，下列有关叙述错误的是(　　)A．90℃高温会使TaqDNA聚合酶失去催化活性B．制备固定化酶的方法主要有包埋法、交联法和吸附法等C．固定化酶固定时可能会造成酶的损伤而影响活性D．固定化细胞可以催化一系列酶促反应【答案】A【解析】TaqDNA聚合酶是从一种水生栖热株中分离提取的，具有耐高温的特性，在143\n95℃时仍具有酶活性。9．(2022·江苏)下列是有关血红蛋白提取和分离的相关操作，其中正确的是(　　)A．透析可去除样品中分子量较小的杂质B．用蒸馏水重复洗涤红细胞C．血红蛋白释放后应低速短时间离心D．洗脱液接近色谱柱底端时开始收集流出液【答案】A【解析】渗透袋可允许小分子自由进出，而大分子则保留在袋内，因此通过透析法可以去除样品中相对分子质量较小的杂质；应用生理盐水而不能用蒸馏水重复洗涤红细胞，蒸馏水的作用是涨破红细胞使血红蛋白释放；血红蛋白释放后应高速长时间离心；红色的血红蛋白(红色区带)接近色谱柱底端时开始收集流出液。10．(2022·南京)下列有关果酒、果醋和腐乳制作的叙述，正确的是(　　)A．参与果酒发酵和果醋发酵的微生物都含有线粒体B．果酒制成后只需将装置转移至温度较高的环境中即可制作果醋C．在腐乳制作过程中必须有能生产蛋白酶的微生物参与D．在腐乳装瓶时自下而上随层数的增加逐渐减少盐量11．(2022·南京)关于接种时应注意的事项全部正确的为(　　)①接种室要消毒　②无菌操作　③接种时可以谈话　④外植体如茎段、茎尖可随机放入培养基　⑤接种时要防止交叉污染　⑥接种完立刻盖好瓶口A．①②③④B．①②③④⑤⑥C．③④⑤⑥D．①②⑤⑥【答案】D【解析】整个接种过程必须在无菌条件下进行，不能谈话，防止呼吸产生的污染，因此操作过程应禁止谈话，并戴口罩；接种的外植体放入培养基时注意形态学下端插入，并且分布均匀，不能随机放入，以保证必要的营养面积和光照条件。12．(2022·温州)在做土壤中分解尿素的细菌的分离与计数实验时，甲组实验用氮源只含尿素的培养基，乙组实验用氮源除尿素外还含硝酸盐的培养基，其他成分都相同，在相同条件下操作、培养与观察，则乙组实验属于(　　)143\nA．空白对照B．标准对照C．相互对照D．条件对照【答案】D【解析】本题考查实验设计的有关知识。本实验甲组为实验组，乙组为对照组，给实验组某种处理，给对照组另一条件的处理为条件对照。13．(2022·汕头)(多选)金黄色葡萄球菌有很强的致病力，常引起骨髓炎等，还可能引起食物中毒，下述实验结束后的做法正确的是(　　)A．对接种环进行灼烧处理B．带菌培养基须经高压蒸汽灭菌锅灭菌后才能倒掉C．带菌培养基须经加热后才能倒掉D．接种后双手须经肥皂洗净，再用75%的酒精棉球擦试【答案】ABD【解析】实验结束后应将金黄色葡萄球菌杀死，以免使人致病，接种环应用灼烧灭菌，培养基要高压蒸汽灭菌后才能倒掉，手须用肥皂洗净，再用75%的酒精棉球擦试。14．(2022·南京)(多选)下列有关生物技术实践操作的叙述，正确的是(　　)A．果醋发酵过程中，要适时充气，有利于醋酸菌的代谢B．制作腐乳时，加盐腌制可使豆腐块变硬且能抑制杂菌生长C．制备固定化酵母细胞时，配制海藻酸钠溶液需小火或间断加热D．家庭制作果酒时，用洗涤剂反复冲洗葡萄表面可能影响发酵效果【答案】ABCD【解析】醋酸菌是需氧型微生物，故要适时充气才有利于醋酸菌的代谢。15.（2022河南平顶山）下列常用的无菌操作中错误的是()A．无菌操作不要求杀死培养基中的一切细菌B．用酒精擦拭双手方法对操作者进行消毒C．实验操作过程应在酒精灯火焰附近进行D．玻璃器皿(吸管、培养皿)可用酒精擦拭【答案】D【解析】本题考查微生物培养过程中的无菌操作。应从无菌操作的概念和基本方法入手解答本题，要注意对不同的对象，要用不同的消毒或灭菌方法。无菌技术是用来防止实验室的培养物被其他外来微生物，而不是杀死培养基中的一切细菌，A正确。对操作者应用较温和的方法进行消毒，B正确。实验操作过程应在酒精灯火焰附近进行，防止瓶口的微生物污染培养基，C正确。143\n对无菌操作用到的玻璃器皿要用干热灭菌的方法彻底消灭其中的微生物，用酒精擦拭不能达到目的，D错误。16.（2022山东模拟）苯酚是工业生产排放的有毒污染物质，自然界中存在着降解苯酚的微生物。某工厂产生的废水中含有苯酚，为了降解废水中的苯酚，研究人员从土壤中筛选获得了只能降解利用苯酚的细菌菌株，筛选的主要步骤如下图所示，①为土壤样品。下列相关叙述错误的是（）A.图中②培养目的菌株的选择培养基中应加入苯酚作为碳源B.如果要测定②中活细菌数量，常采用稀释涂布平板法C.若图中④为对照实验，则其中应以苯酚作为唯一的碳源D.使用平板划线法可以在⑥上获得单菌落17.（2022山西汾阳月考）分离纤维素分解菌的实验过程中操作有误的是(   )A．经选择培养后将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上B．富集培养这一步可省略，但培养纤维素分解菌少C．可通过定时测定葡萄糖产量的变化来衡量纤维素分解菌培养液中的纤维素酶产量D．对照组可用同样量的培养液涂布到不含纤维素的培养基上【答案】A【解析】本题考查对土壤中分解纤维素的微生物的分离过程。从实验的原理、基本流程入手来解答该题。经选择培养后，再经稀释，才能将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上；富集培养可省略；在纤维素酶的作用下，纤维素能被水解成葡萄糖。所以可通过143\n定时测定葡萄糖产量的变化来衡量纤维素分解菌培养液中的纤维素酶产量；设置对照能证明经富集培养的确得到了欲分离的微生物。18.（2022新课标单元卷）下列探究某种加酶洗衣粉需要的最适温度的实验正确的是A．取一系列不同温度、其他条件相同的水，加入相同的污物及等量加酶洗衣粉，看哪一个温度中酶的效果最好B．在不同温度的水中，加入不等量洗衣粉，看哪种效果好C．将加酶洗衣粉加入30℃水中发现不如加到45℃水中洗涤效果好，说明45℃为最适温度D．将加酶洗衣粉与普通洗衣粉分别加入37℃的水中洗涤同样的污物，发现加酶洗衣粉效果好，说明加酶洗衣粉的最适温度为37℃【答案】A【解析】本题考查探究某种加酶洗衣粉需要的最适温度的实验。解题时，在区分好自变量、因变量和无关变量基础上，根据实验设计的原则，对其进行科学的控制。本实验的自变量为温度，在对照实验中，除了要观察的变量外，其他变量都应保持相同，B选项错误；C选项可以说明加酶洗衣粉在45℃时比30℃时洗涤效果好，但不能说明45℃为最适温度，错误；D选项只能比较加酶洗衣粉与普通洗衣粉的洗涤效果，不能得出加酶洗衣粉的最适温度，错误。19．（2022浙江十校联合体）某同学进行“加酶洗衣粉和普通洗衣粉的洗涤效果比较”课题研究。下列叙述错误的是(   )A．设计对照实验，分别使用蛋白酶洗衣粉和复合酶洗衣粉B．洗衣粉用量、污渍种类和冼涤温度等无关变量全部相同且适宜C．可根据污渍完全洗净所需时间的差异得出实验结论D．应设计一个既不用加酶洗衣粉洗涤也不用普通洗衣粉洗涤的对照143\n20．（2022江苏泰州9月月考）下列有关现代生物技术操作注意事项或应用的叙述中，正确的是A．在进行果酒发酵过程中要定期“放气”，并注意防止外界细菌进入发酵瓶B．果醋制作时需要经过先通气发酵后密封发酵两个主要阶段C．可以利用DNA在0.14mol/LNaCl溶液中溶解度最小的特点将DNA与杂质分离D．电泳法可以用于蛋白质、DNA、RNA等生物大分子的分离【答案】ACD【解析】醋酸杆菌为好氧性生物；制作果醋时，要始终给发酵罐通入氧气。7．（2022安徽“江南十校”联考）有关现代生物技术的叙述，不正确的是（   ）A．用平板划线法或稀释涂布平板法纯化大肠杆菌时，可以用相同的培养基B．若将加酶洗衣粉设计为加酶搓衣板，会提高酶的利用率，减少污染物的排放C．诱导胚胎干细胞分化成器官过程需要无菌无毒的环境D．动物细胞培养与植物组织培养所用的培养基成分一样【答案】D【解析】动物细胞培养基成分复杂，其中含有动物血奖、血清；而植物培养基成分简单，无动物血奖、血清。21．（2022江苏南京金陵中学）下列实验装置可用于生物技术实践的相关实验，相关叙述不正确的是(　　)143\nA.装置甲可用于果酒或腐乳的制作B.装置乙可用于血红蛋白提取和分离过程中对装于Ⅱ中的样品的处理C.装置丙可先用于果酒的制作，后用于果醋的制作D.使用装置丁进行蛋白质的分离时，Ⅱ中为待分离的样品【答案】D【解析】使用装置丁进行蛋白质的分离时，待分离的样品在Ⅰ中。22．（2022黑龙江哈三中月考）下面是果酒和果醋制作的实验流程和某同学设计的果酒和果醋的发酵装置。根据图示回答下列问题：（1）完成图1中的实验流程，则矩形框内应为               。（2）果酒和果醋的制作分别利用了        和        （填生物名称）两种微生物的发酵原理。由果酒转变成果醋的制作时，需要改变的环境条件是      和       ，主要原因是                                                             （答出两点）。（3）图2装置中的充气口在            过程中要关闭，而排气口在该过程中应开放，目的是用来排出              产生的          。排气口要通过一个长而弯曲的胶管与瓶身连接，其目的是                     。143\n（4）果汁发酵后是否有酒精产生，可用         来检验，在酸性条件下呈现       色证明有酒精产生。（5）葡萄是否需要灭菌？为什么？                                         。【答案】（1）醋酸发酵（2）酵母菌；醋酸菌；氧气；温度30—35℃。醋酸菌是好氧细菌，只有当氧气充足，才能进行旺盛的生命活动；醋酸菌的最适生长温度为30—35℃。（2分）（3）酒精发酵；酵母菌无氧呼吸；二氧化碳；避免空气中其它微生物进入发酵装置（防止空气中的微生物污染）（4）重铬酸钾、灰绿色（5）不需要，在葡萄酒的自然发酵过程中，起主要作用的是附着在葡萄皮上的野生型酵母菌。灭菌会杀死葡萄皮上附着的酵母菌，使发酵不能进行（2分）【解析】本题考查果酒和果醋制作的实验装置、流程、条件控制。解题时同学们要充分运用酵母菌的代谢特征去分析题目给出的问题。用酵母菌制作果酒的后期（酒精生成阶段），充气孔应关闭，创造一个无氧环境；果醋制作过程中要不断补充氧气，要把冲气孔打开。果酒、果醋制作使用的装置，装置中的排气口与一弯曲的胶管连接，可以防止空气中的微生物进入装置造成污染。酵母菌在无氧环境中通过无氧呼吸产生酒精和二氧化碳，所以排气孔排出的气体中只有二氧化碳；醋酸菌是在有氧环境条件下产生醋酸的，所以果醋发酵时排出的气体中除了含二氧化碳，还有氧气。23．（2022宁夏银川一中一模）“每天喝一点，健康多一点”，这是“宁夏红”率先提出的消费理念，将积淀了千百年的枸杞药食文化和中国红文化完美结合起来，更增添了品牌的文化魅力和优势。下图为“宁夏红”枸杞果酒生产工艺流程简图，据图回答：选料→ ？→粉碎→灭菌→接种→发酵→ ？→ 果酒（1）流程中？处的内容应为_____________、________________。（2）制作果酒时，温度应该控制在________________，果酒酿造过程中如果果汁灭菌不合格，含有醋酸杆菌，在酒精发酵旺盛时，醋酸杆菌能否将果汁中的糖发酵为醋酸？说明理由。_______、 _________________________________________________________。（3）果酒制作离不开酵母菌，与醋酸杆菌相比，酵母菌在结构上的主要特点是___________________________________________________________________。143\n（4）枸杞果酒制作过程中，接种完成后要先向发酵罐中通入一段时间的无菌空气，目的是_____________。（5）若要提高果酒的产量，发酵过程中关键要控制好哪些条件？________________________________________________。（6）果酒制作是否成功，需发酵后用__________________来鉴定，在___________条件下，该物质与酒精反应呈现_____________色。24．（2022河南郑州第二次质检）请回答下列与大肠杆菌有关的问题。（1）从生态系统的成分上看，大肠杆菌属于________________；它的同化作用类型是______________。（2）下表是某公司研发的一种培养大肠杆菌菌群的培养基配方。根据用途划分该培养基属于_____________（选择、鉴别）培养基。该培养基中的碳源是___________________.143\n（3）在微生物培养操作过程中，为防止杂菌污染，需对培养基和培养皿进行__________（消毒、灭菌）；操作者的双手需要进行清洗和_____________。静止空气中的细菌可用紫外线杀灭，其原因是紫外线能使蛋白质变性，还能___________。培养大肠杆菌时，常用的接种方法是平板划线法和_________________。通常，对获得的纯菌种还可以依据菌落的形状、大小等菌落特征对细菌进行初步的_____________。培养大肠杆菌时，在接种前需要检测培养基是否被污染。对于固体培养基应采用的检测方法是___________________。若用大肠杆菌进行实验，使用过的培养基及其培养物必须经过______________处理后才能丢弃，以防止培养物的扩散。（4）以下微生物发酵生产特定产物时，所利用主要微生物的细胞结构与大肠杆菌相同的是______________.A．制作果酒    B．由果酒制作果醋     C．制作泡菜       D．制作腐乳（5）利用培养基不仅可以分离培养微生物，也可以进行植物组织培养。在植物组织培养的过程中，也要对外植体等进行一系列的消毒、灭菌，并且要求无菌操作，原因是_______________________________（2分。至少写出两条）。【解析】本题考查有关微生物的培养。祥解见答案。25．(2022江西省会昌中学月考)尿素是一种重要的农业肥料，但若不经细菌的分解，就不能更好地被植物利用。生活在土壤中的微生物种类和数量繁多，同学们试图探究土壤中微生物对尿素是否有分解作用，设计了以下实验，并成功筛选到能高效降解尿素的细菌（目的菌）。培养基成分如下表所示，实验步骤如右图所示。请分析回答问题：143\nKH2PO41.4gNa2HPO42.1gMgSO4.7H2O0.2g葡萄糖10g尿素1g琼脂15g将上述物质溶解后,用自来水定容到1000mL(1)此培养基能否用于植物组织培养？______________，理由是   ________。 (2)培养基中加入尿素的目的是______________，这种培养基属于__________培养基。(3)“目的菌”生长所需的氮源和碳源分别来自培养基中的____________和________，实验需要振荡培养，原因是______________________。(4)转为固体培养时，常采用______________的方法接种，获得单菌落后继续筛选。(5)下列材料或用具中：①培养细菌用的培养基与培养皿；②玻棒、试管、锥形瓶和吸管；③实验操作者的双手。需要灭菌的是：______________；需要消毒的是：______________。（填序号）(6)在进行分离分解尿素的细菌实验时，A同学从培养基上筛选出大约150个菌落，而其他同学只选择出大约50个菌落。A同学的实验结果产生的原因可能有（  ）（填序号）①由于土样不同 ②由于培养基污染 ③由于操作失误 ④没有设置对照(7)在以尿素为唯一氮源的培养基中加入____________，细菌合成的____________将尿素分解为氨，PH增高，使指示剂变红色。143\n26．（2022黑龙江省哈三中等四校一模）随着环境污染的加剧和石油危机出现，越来越多的国家使用乙醇作为代替燃料，生产中玉米和麦草的秸秆可以用来生产燃料乙醇，已知秸秆的主要成分是纤维素，回答下列问题：（1）人们首先利用纤维素分解菌将纤维素分解，纤维素分解菌多分布在         的土壤中，该微生物产生的纤维素酶是一种复合酶，一般包括三种成分，                 ，              和                 。前两种酶能使纤维素分解成纤维二糖，第三种酶将纤维二糖分解成葡萄糖。（2）从土壤中筛选纤维素分解菌需要配制         培养基，该培养基中需要加入纤维素粉作为唯一的            。（3）经过梯度稀释后，要将样品均匀涂布在用于鉴别纤维素分解菌的培养基上，在该培养基中需要加入的特殊染料是           ，当形成菌落以后可以根据菌落周围是否产生                来筛选纤维素分解菌。当利用涂布器涂布平板之后需要对涂布器进行            处理。（添“消毒”或者“灭菌”。（4）产生葡萄糖后需要用到            （微生物种类）发酵产生酒精，还可以使用           检测产物是否为酒精，该试剂在酸性条件下可与酒精反应，溶液呈灰绿色。143\n【答案】（1）富含纤维素    C1酶   Cx酶   葡萄糖苷酶（2）选择   碳源（3）刚果红透明圈灭菌（4）酵母菌  重铬酸钾2分【解析】本题考查对土壤中分解纤维素的微生物的分离过程的理解。从分解纤维素的微生物的代谢特征和微生物的培养、分离相关技术入手解答该题。经选择培养后，再经稀释，才能将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上。由于生物与环境的相互依存关系，在富含纤维素的环境中，纤维素分解菌的含量相对提高，因此从这种土样中获得目的微生物的几率要高于普通环境。如果找不到合适的环境，可以将滤纸埋在土壤中，过一个月左右也会有能分解纤维素的微生物生长。在筛选出能产生纤维素酶的微生物之前，可用含纤维素的液体培养基培养，增加微生物的浓度。刚果红是一种酸性染料，可与纤维素反应形成红色复合物；如果有分解纤维素的微生物存在的地方，纤维素被分解，出现透明圈。27．（2022山西汾阳二模）葡萄酒、葡萄汁是日常生活中常用的一类饮料。在呈酸性的果汁发酵液中，红葡萄皮的色素也会进入发酵液中，且有酸碱指示剂的作用。据某些医学研究机构调查表明，适量饮用红葡萄酒、葡萄汁，对人体有着非同小可的意义。随着人们物质文化生活水平的提高，国内红葡萄酒、葡萄汁的产、销量均逐年增长。请根据有关材料回答下列问题：（1）在葡萄酒的自然发酵过程中，菌种的来源主要是附着在葡萄皮上的野生型酵母菌。为提高果酒的品质，可以直接在果汁中加入人工培养的纯净酵母菌。要筛选得到纯净的酵母菌种，通常使用的培养基按功能来分称为 ________，如在培养基中加入__________可从细菌和酵母菌的混合液中分离酵母菌。（2）在微生物的实验室培养中常要进行消毒和灭菌的工作，常用的消毒方法有：______。灭菌指____________________________________。（3）为提高果汁的出汁率及使果汁变得澄清，在果汁生产中常用到                  。（4）为提高果酒的品质及节约生产成本，厂家已尝试使用固定化细胞技术。酵母细胞的固定多采用            。请列出用干酵母和海藻酸钠制备固定化酵母细胞的步骤：①酵母细胞的活化，②                  ，③                             ，④143\n                                  ，⑤                                 。（5）现有a、b两个品牌颜色一样的红葡萄酒，其中a品牌是用100%红葡萄汁酿造，b品牌是以化学物质用人工方法勾兑而成。现提供小苏打、白醋、小烧杯若干，请设计一个实验鉴别两个品牌的红葡萄酒，得出正确结论并说明原理。①步骤1：                                                            ；②步骤2：                                                            ；③结论：                                                              ；④原理：                                                              。143\n28．（2022届江西省樟树中学高三上学期第四次月考）从自然菌样中筛选较理想生产菌种的一般步骤是：采集菌样→富集培养→纯种分离→性能测定。（1）不同微生物的生存环境不同，获得理想微生物的第一步是从适合的环境采集菌样，然后再按一定的方法分离、纯化。培养噬盐菌的菌样应从环境采集。（2）富集培养指创设仅适合待分离微生物旺盛生长的特定环境条件，使其群落中的数量大大增加，从而分离出所需微生物的培养方法。对产耐高温淀粉酶微生物的富集培养应选择的培养基，并在条件下培养。（3）下面两图是采用纯化微生物培养的两种接种方法接种后培养的效果图解，请分析接种的具体方法。获得图甲效果的接种方法是，获得图乙效果的接种方法是。143\n（4）配制培养基时各种成分在熔化后分装前必须进行，接种前要进行。在整个微生物的分离和培养中，一定要注意在条件下进行。【答案】（1）海滩等高盐（2）以淀粉为唯一碳源高温（3）稀释涂布平板法平板划线法（4）pH调整高压蒸汽灭菌无菌【解析】本题考查微生物的分离、培养、纯化的有关知识。解题时，对菌样采集必须考虑到所分离的微生物的生理特性和相应的土壤特点。培养微生物则要考虑它对营养的需要和对氧气、pH的不同要求。根据图甲和乙不难得出甲和乙的接种方法。配制培养基的步骤包括配制培养基、调节pH、分装、包扎、灭菌、搁置斜面等。29．（2022江西瑞金模拟）据中国食品产业网报道：纤维素酶从被发现起就受到世界各国生物界的关注。当今世界，能源和资源日趋危机，人们希望能借助纤维素酶将地球上最丰富（占全球总生物量80%）、最廉价的可再生资源纤维素转化为能直接利用的能源和资源。目前纤维素酶已被广泛应用到医药、食品发酵、烟草及饲料等各个领域。纤维素酶的成本能否下降，是能否实现纤维素酶在工业生产中被广泛应用的关键因素。纤维素酶可以从能分解纤维素的细菌培养液中提取。某同学设计了如下分离土壤中纤维素分解菌的实验流程：土壤取样→选择培养→→鉴别培养。⑴请补充实验流程：。⑵寻找纤维素分解菌应到的土壤环境中。A．湿润B．富含纤维素C．富含N、PD．干旱如果找不到合适的环境，可采取的办法是。⑶选择培养的目的是，该过程研究人员用化合物A、硝酸盐、磷酸盐、以及微量元素配制的培养基进行选择培养，该培养基为（物理特性）培养基，其中加入的化合物A是______________，为微生物的生长提供_____________。⑷为了鉴别纤维素分解菌和进一步纯化菌种，可以在鉴别培养基上加入__________染液，将筛选获得的菌液稀释后用方法接种到鉴别培养基上，然后挑选产生的菌落作为菌种进行扩大培养。【答案】（1)梯度稀释⑵B⑶增加微生物的浓度液体纤维素碳源⑷刚果红　涂布平板法　透明圈【解析】143\n本题考查对土壤中分解纤维素的微生物的分离过程的理解。从分解纤维素的微生物的代谢特征和微生物的培养、分离相关技术入手解答该题。⑴经选择培养后，再经稀释，才能将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上。⑵由于生物与环境的相互依存关系，在富含纤维素的环境中，纤维素分解菌的含量相对提高，因此从这种土样中获得目的微生物的几率要高于普通环境。如果找不到合适的环境，可以将滤纸埋在土壤中，过一个月左右也会有能分解纤维素的微生物生长。⑶在筛选出能产生纤维素酶的微生物之前，可用含纤维素的液体培养基培养，增加微生物的浓度。⑷刚果红是一种酸性染料，可与纤维素反应形成红色复合物；如果有分解纤维素的微生物存在的地方，纤维素被分解，出现透明圈。30.（2022新课标单元复习）PCR（多聚酶链式反应）技术是一项在生物体外复制特定的DNA片段的核酸合成技术，下图表示合成过程，请据图分析回答：（1）A过程高温使DNA变性解旋，对该过程的原理叙述，正确的是。A.该过程用到耐高温的解旋酶破坏氢键B.该过程用到限制酶破坏磷酸二酯键C.该过程不需要解旋酶的作用D.该过程与人体细胞的过程完全相同（2）C过程要用到的酶是。这种酶在高温下仍保持活性，因此在PCR扩增时可以加入,（需要/不需要）再添加。PCR反应除提供酶外，还需要满足的基本条件有:。（3）如果把模板DNA的两条链用15N标记，游离的脱氧核苷酸不做标记，控制“94℃~55℃~72℃”温度循环3次，则在形成的子代DNA中含有15N标记的DNA占。（4）如果模板DNA分子共有a个碱基对，其中含有胞嘧啶m个，则该DNA复制10次，需要加入胸腺嘧啶脱氧核苷酸个。（5）PCR中由碱基错配引起的变异属于。假设对一个DNA进行扩增，第一次循环时某一条模板链上发生碱基错配，则扩增若干次后检测所用DNA的扩增片段，与原DNA相应片段相同的占。【答案】（1）C（2）TaqDNA聚合酶一次不需要DNA模板，分别与两条模板链相结合的两种引物，四种脱氧核苷酸，同时通过控制温度使DNA143\n复制在体外反复进行（3）25%（4）（210-1）（a-m）（5）基因突变75%31．（2022江苏淮安四调）某同学使用下列装置或操作进行有关实验，请据图回答问题： （1）用图甲的装置制作果酒时，在营养充足的条件下，为适当提高果酒生产速率，进气口应                ；排气口要通过一个长而弯曲的胶管与瓶身相连，这样做的原因是                 。（2）乙图中加入蒸馏水的目的是                  ，用            替代蒸馏水也能达到相同的结果。（3）丙、丁用于提取和分离血红蛋白，先对样品进行处理要用图      装置进行      ；丁图底端试管中首先收集到的是相对分子质量较       (大／小)的蛋白质。（4）如果用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳处理丁实验中获得的蛋白质，蛋白质迁移的取决于           。143\n【答案】（1）先打开后关闭   防止杂菌污染（2）降低NaCl溶液的浓度，析出DNA；冷却的无水乙醇（3）丙   透析   大     （4）相对分子质量【解析】（1）用酵母菌制作果酒的后期（酒精生成阶段），充气孔应关闭，创造一个无氧环境；果醋制作过程中要不断补充氧气，要把冲气孔打开。果酒、果醋制作使用的装置，装置中的排气口与一弯曲的胶管连接，可以防止空气中的微生物进入装置造成污染。（2）（3）（4）见答案。32．(2022·济南)白僵菌高孢粉是国家林业局推广的高效生物杀虫剂之一，应用于多种林木和农作物害虫的防治。白僵菌分生孢子在寄主表皮、气孔或消化道上，遇适宜条件开始萌发，生出芽管。同时产生脂肪酶、蛋白酶、几丁质酶等溶解昆虫的表皮，通过芽管入侵虫体，在虫体内生长繁殖，消耗寄主体内的养分，产生各种毒素，形成大量菌丝和孢子，布满虫体全身。请根据上述材料回答下面的问题：(1)从自然菌样中筛选较理想的生产用菌种的一般步骤是：采集菌样→富集培养→________→性能测定。白僵菌的菌样应从________中采集。(2)分离白僵菌菌种的培养基属于________培养基。在配制白僵菌培养基时常加入蔗糖、硫酸铵、硝酸钾等成分，蔗糖属于________(营养物质)。(3)白僵菌纯化培养常用的接种方法是________和________。(4)分离与培养过程中，培养基和接种工具都要进行________处理，利用高温可以使微生物的________等物质发生变性。【答案】　(1)纯种分离　感病昆虫　(2)选择　碳源(3)平板划线法　稀释涂布平板法　(4)灭菌　蛋白质和核酸33.(2022·北京西城)某实验小组从土壤中筛选出能分泌淀粉酶的芽孢杆菌，设计实验步骤如下，请给予合理的补充。(1)采集与培养：将采集的土样混匀后称取1g，置于经过________法灭菌处理的________(填“固体”或“液体”)培养基中，28℃振荡培养。(2)接种与选择：为避免培养液中菌体浓度过高，需将培养液进行________处理。之后，将菌液涂布接种于以________为唯一碳源的固体培养基上，30℃条件下培养。为避免污染，需将培养皿呈________状态放置。此外，为排除其他因素的影响，提高实验可信度，本步骤需设计________作为空白对照。(3)筛选与纯化：将适量的碘液滴加在平板上的菌落周围，如果菌落周围的现象是________，则说明此种菌能够____________________________________。从平板中挑取实验效果明显的目的菌株，采用________法接种于新的培养基平板，可对菌株进行进一步的纯化。【答案】　(1)高压蒸汽灭菌　液体143\n(2)系列稀释(或“梯度稀释”)　淀粉　倒置　未接种的空白培养基(或“接种等量无菌水的培养基”)(3)出现透明圈　分泌淀粉酶使淀粉发生水解　平板划线【解析】(1)对培养基的灭菌方式是高压蒸汽灭菌，因为后面要进行涂布，所以应该用液体培养基来培养。(2)减小培养液菌体浓度一般用稀释方法。由于题目要求选出能分泌淀粉酶的芽孢杆菌，所以培养基就应含有且只有淀粉。倒置可以减少培养基受污染，为排除其他因素影响，需要设置未接种的空白的培养基作对照组。(3)淀粉被水解，培养基会出现透明的现象。用平板划线法来培养，可进一步纯化菌种。34．(2022·北京东城)霍乱是由霍乱弧菌引起的一种烈性肠道传染病，及早检测出霍乱弧菌对控制该病的流行和治疗有极其重要的意义。临床上检测霍乱弧菌的简单方法如下：步骤一：将蛋白、氯化钠、牛肉膏、亚硫酸钠、庆大霉素、琼脂、蒸馏水等按培养基配方的比例配制，调节pH为8.0，灭菌后分装；步骤二：将待测样本用接种环接种；步骤三：35℃培养箱中培养18～24h，观察结果。(霍乱弧菌在此培养基上生长时，菌落中心呈黑褐色，因而易于与其他杂菌区分)请分析回答下列问题：(1)培养基中的各种成分可为微生物的生长提供的主要营养物质有________。培养基成分中的庆大霉素具有一定的抑菌作用，在此培养基上，它的主要作用是抑制________的生长，由此判断该培养基属于________培养基。(2)用接种环接种时，可采用________法接种。(3)若________，则可推断待测样本中有霍乱弧菌。35．(2022·南昌)日常生活中人们常用酵母菌发酵发面蒸馒头，某学生想探究酵母菌的细胞呼吸方式，设计了下列实验，请你帮助他完成有关内容：(1)实验目的：探究酵母菌的细胞呼吸方式。(2)实验原理：细胞的不同呼吸方式释放的能量多少不同，但每种方式所释放的能量中都有一部分以热能的形式散失，从而导致细胞周围的环境温度升高。(3)材料用具：酵母菌培养液、质量浓度为0.1g/mL的葡萄糖溶液、液体石蜡油、蒸馏水、保温瓶、温度计、棉花。143\n(4)实验步骤：①将质量浓度为0.1g/mL的葡萄糖溶液加热沸腾后冷却备用；②取3只保温瓶，编号为A、B、C，并将C瓶设计为对照；③在3只保温瓶中分别加入等量的葡萄糖溶液；④________________________________________________________________________；⑤3个保温瓶中均放入温度计，用棉花轻轻塞上瓶口，并保证保温瓶通气；⑥24小时后观察并记录3个保温瓶中温度的变化。(5)预测实验现象和实验结果：若A瓶温度>C瓶温度，B瓶温度＝C瓶温度，则________；若B瓶温度>C瓶温度，A瓶温度＝C瓶温度，则________；若________________，则________________________________________________________________________。(6)某同学也想以酵母菌为实验材料探究相关问题，请你帮他设计探究性实验课题名称：____________________________________。36．(2022·南京)加酶洗衣粉是指含有酶制剂的洗衣粉。请回答下列问题：(1)由下图推知，该实验的目的是______________________，50℃时加酶洗衣粉中碱性蛋白酶的最适含量是________%。(2)下表是添加脂肪酶的加酶洗衣粉和普通洗衣粉洗涤效果的实验记录，请据表回答问题：143\n脸盆编号洗涤物(等量)洗涤温度洗衣粉(等量)水量洗涤所需时间1油污布45℃加酶2L4min2油污布45℃普通2L7min2油污布5℃加酶2L9min2油污布5℃普通2L8min①该实验设计体现了________原则。②若实验组1号洗净所需时间接近7min，最可能的原因是________________________________________________________________________。(3)下列衣料不适宜用添加蛋白酶的加酶洗衣粉洗涤的有________。①棉织品　②毛织品　③腈纶织品　④蚕丝织品(4)根据以上实验结果，写出两项提高加酶洗衣粉洗涤效果的措施：________________________________________________________________________。【答案】　(1)探究温度、碱性蛋白酶含量对去污力的影响　0.6(2)对照、单一变量　酶失活(3)②、④(4)用温水浸泡；延长浸泡时间；增加洗衣粉的用量等(写出两项合理答案即可)【解析】由题图可知，实验中存在两个变量：温度与碱性蛋白酶含量，即实验探究的是温度、碱性蛋白酶含量对去污力的影响。在50℃时，洗衣粉的去污力在碱性蛋白酶含量为0.6%时达到最大，由表中数据可知，1、3号为实验组，2、4号为对照组，1、2号与3、4号中只有是否加酶一个变量，该实验过程体现了对照原则和单一变量原则。若实验组1号加酶后洗净时间接近7min，很可能的原因是酶已经失活。蛋白酶可分解蛋白质，故毛织品、蚕丝织品等以蛋白质为主要成分的衣料不能用含蛋白酶的加酶洗衣粉洗涤。用温水浸泡(提高酶的活性)，延长浸泡时间(增加酶的催化时间)，增加酶的用量等都可以提高加酶洗衣粉的洗涤效果。1.下列关于果醋制作的说法正确的是                             A．醋酸菌是好氧菌，在制作过程中要一直打开发酵瓶B．在制作葡萄醋的过程中，温度应严格控制在18～25℃C．当糖源不足时，醋酸菌先将酒精转变成乙醛，再将乙醛变为醋酸D．醋酸菌在糖源和氧气充足时，能将葡萄糖分解成醋酸和二氧化碳【答案】C143\n【解析】在糖源和氧气充足时，醋酸菌能将葡萄糖氧化成醋酸；当糖源不足时，醋酸菌先将酒精转变成乙醛，再将乙醛变为醋酸。在制作葡萄醋的过程中，应向发酵瓶内充入无菌空气，温度应严格控制在30～35℃。2.下图是果醋和果酒的发酵装置，相关描述错误的是 A．出料口可以用来取样B．排气口能排出酒精发酵时产生的二氧化碳C．充气口在醋酸发酵时要连接充气泵进行充气D．充气口的开关始终要处于打开状态【答案】D【解析】考查果酒和果醋发酵装置的知识。D，果酒发酵时需关闭充气口，因为酒精发酵是在无氧条件下进行的。果醋发酵需打开充气口，因为醋酸菌是异养需氧型。3、下列有关果酒发酵、果醋发酵、腐乳制作前期发酵的比较，不正确的是（   ）A．都可以使用自然界微生物作为菌种B．发酵的实质都是微生物的无氧呼吸C．控制的发酵温度、培养基成分有所不同D．发酵过程中必须尽可能防止杂菌污染4、用平板划线法或稀释涂布平板法纯化大肠杆菌时（   ）   ①可以用相同的培养基      ②都需要使用接种针进行接种   ③都需要在火焰旁进行接种  ④都可以用来计数活菌143\n   A．①②B．③④C．①③D．②④【答案】C【解析】考查纯化技术的操作。平板划线法或稀释涂布平板法都使用固体培养基，故①正确；平板划线法采用接种针进行操作，而稀释涂布平板法采用涂布器进行操作，故②错误；纯化时，要进行无菌操作，需要在火焰旁接种，避免空气中的微生物混入培养基，故③正确；平板划线法一般用于分离而不是计数，故④错误。5、用蔗糖、奶粉和经蛋白酶水解后的玉米胚芽液，通过乳酸菌发酵可生产新型酸奶，下列相关叙述错误的是                       （   ）A．蔗糖消耗量与乳酸生成量呈正相关       B．酸奶出现明显气泡说明有杂菌污染C．此发酵过程为厌氧发酵   D．培养液中只有奶粉为乳酸菌发酵提供氮源【答案】D【解析】乳酸菌发酵分解蔗糖生成乳酸，所以蔗糖消耗量与乳酸生成量呈正相关；乳酸菌发酵无二氧化碳产生，酸奶出现明显气泡说明有杂菌污染；产生乳酸的发酵过程为厌氧发酵；培养液中奶粉、蛋白酶都为乳酸菌发酵提供氮源。6、下列关于酵母菌的有关说法正确的是（   ）A．酵母菌产生酒精的条件与醋酸菌发酵产生醋酸的条件相同B．利用酵母菌生产酒精的过程中固定化酶技术比固定化酵母细胞更好C．培养液中是否产生酒精可用溴麝香草酚蓝检验D．若要测定培养液中酵母菌的数量，采用稀释涂布平板法比平板划线法误差要小一些【答案】D【解析】考查与微生物的培养与应用的有关内容。酵母菌产生酒精的最适温度是18-25℃，醋酸菌发酵产生醋酸的最适温度是30-35℃，故条件不同；利用酵母菌生产酒精的过程中固定化酵母细胞比固定化酶技术更好；培养液中是否产生酒精可用重铬酸钾来检验；测定培养液中酵母菌的数量，采用稀释涂布平板法溶液更易让细菌分布均匀，平板划线法接种环上是固体菌种，容易让多个酵母菌叠加在一起，所以采用稀释涂布平板法比平板划线法误差要小一些。7、下列评价果酒和果醋制作是否成功的方法中，不合理的是（   ）143\nA．通过观察相关微生物的存在或数量变化进行鉴定B．通过向果酒发酵液中加入重铬酸钾试剂进行鉴定C．通过检测果醋发酵前后发酵液的pH变化进行鉴定D．通过检测果酒发酵前后发酵液的温度变化进行鉴定8、下列有关果酒，果醋和腐乳制作的叙述，正确的是（   ）A参与果酒发酵和果醋发酵的微生物都含有线粒体B果酒制成后只需将装置转移至温度较高的环境中即可制作果醋C在腐乳制作过程中必须有能生产蛋白质的微生物参与D在腐乳装瓶时自下而上随层数的增加逐渐减少盐量【答案】C【解析】考查果酒、果醋和腐乳的制作过程。果醋发酵利用的是醋酸菌，为原核生物不含有线粒体；制作果醋不仅需要比果酒温度较高的环境，还需要氧气；在腐乳装瓶时，自下而上随层数的增加逐渐增加盐的用量。9、（多选）下列有关果酒发酵和果醋发酵的叙述中，正确的是（   ）A．参与发酵的微生物都含有线粒体B．都需要持续通入无菌空气C．发酵过程中培养液pH都会下降D．果酒制成后可将装置转移至温度较高的环境中制果醋【答案】CD143\n【解析】考查果酒和果醋发酵的知识。A，果酒发酵的微生物是酵母菌，果醋发酵的微生物是醋酸菌，二者都属于原核生物，均没有线粒体。B，果酒发酵的后期需密封，因为酒精是在无氧条件下形成的。10、在制作腐乳时，加卤汤密封腌制过程中，对腐乳风味和质量无影响的因素是（   ）A．酒的种类和用量                 B．周围环境中的湿度C．香辛料的组成和用量             D．腌制的温度和时间【答案】B【解析】考查腐乳的制作。据题干信息可知：在加卤汤密封腌制过程中，罐中的腐乳与外界环境之间的物质完全隔离，不能交换，因此此刻环境中的物质因素，如湿度等不会对其形成造成影响，其余选项见课本基础知识。11、在果酒、果醋和腐乳制作中，都要防止微生物污染，有关叙述正确的是（   ）A．果醋发酵阶段应封闭充气口，防止杂菌进入B．腌制腐乳的卤汤中应含有12％左右的酒精以抑制细菌的增殖C．利用自然菌种发酵果酒时，将封有葡萄汁的发酵瓶进行高压灭菌D．将长满毛霉的豆腐放在瓶中，并逐层加盐，接近瓶口部分的盐要铺薄一些【答案】B【解析】本题考查的是果酒，果醋，腐乳制作的基本过程及相关注意事项。醋酸菌是好氧菌，发酵的时候需要通入无菌空气；利用自然菌发酵时利用的就是葡萄汁中的酵母菌，高压灭菌会杀死酵母菌；腐乳制作时装坛时越靠近坛口盐越要厚一些。12、人们利用某些微生物制作食品时，需要分析微生物的特点，控制微生物的发酵条件。下列与此有关的各项内容都正确的是（ 　 ）【答案】B【解析】本题考查微生物的应用知识，考查内容143\n较较广，比较贴近生活。A、制果酒时是利用酵母菌的无氧呼吸来生产酒精，所以不能通所。C、应该先接种毛霉，让其生长，再加盐。D、制泡菜用乳酸菌，而不是醋酸菌。13、下图甲表示某种细菌合成精氨酸的途径，图乙表示接种该细菌后可能出现的三种生长曲线。据图分析，下列有关描述中，正确的组合是（  ）①．图甲显示了该细菌通过调节酶的活性来调节精氨酸的合成②．从图甲可知，精氨酸的合成是由该细菌的3对等位基因共同控制的③．图乙的结果可说明加大接种量能缩短细菌生长的调整期④．精氨酸依赖型突变菌的产生，可能是因为控制酶1合成的基因发生突变A．①　B．②③④　   C．③④　  D．①②③④14、(多选)左下图为遗传信息传递和表达的途径，由下表为几种微生物的作用原理，结合图标分析，下列说法错误的是（   ）143\nA环丙沙星和红霉素都能抑制②③过程 B青霉素和利福平均能抑制细菌的①过程C结核杆菌的④⑤过程都发生在细胞质中D①-⑤过程可发生在人体的健康细胞中【答案】ABCD【解析】考查对所给材料信息的分析与判断、推理能力。由图中信息可以推断：环丙沙星抑制的是①、②过程，红霉素抑制的是③过程；因为细菌细胞壁中含有肽聚糖，所以其合成与转录、翻译有关，而利福平抑制的是RNA聚合酶的活性，即抑制的是③过程；结核杆菌的遗传物质是DNA，不会发生④⑤过程；在人体健康细胞中不会发生④⑤过程。15、目前，酶已经大规模地应用于各个领域，下列属于酶应用中面临的实际问题的是（   ）A．酶对有机溶剂不敏感，但对高温、强酸、强碱非常敏感    B．加酶洗衣粉因为额外添加了酶制剂，比普通洗衣粉更易污染环境C．固定化酶可以反复利用，但在固定时可能会造成酶的损伤而影响活性D．酶的催化功能很强，但需给以适当的营养物质才能较长时间维持其作用【答案】C【解析】本题考查的是有关酶的相关内容。酶不仅受高温，强酸，强碱的影响同时也会受表面活性剂等有机溶剂；加酶洗衣粉减少了N、P元素的使用量，从而减少了对环境的影响；酶在固定的时候会由于损伤而影响酶的活性；酶是催化集，本身并不会在化学反应前后发生改变也不会消耗能量。15、已知某样品中存在甲、乙、丙、丁、戊五种物质，其分子大小、电荷的性质和数量情况如下图所示。下列叙述正确的是（　　）143\nA．将样品装入透析袋中透析12h，若分子乙保留在袋内，则分子甲也保留在袋内B．若五种物质为蛋白质，则用凝胶色谱柱分离时，甲的移动速度最快C．将样品以2000r/min的速度离心10min，若分子戊存在于沉淀中，则分子丙也存在于沉淀中D．若五种物质为蛋白质，用SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳分离样品中的蛋白质分子，则分子甲和分子戊形成的电泳带相距最近【答案】C【解析】甲比乙的分子量大，在透析时，容易透过透析袋；在用凝胶色谱法分离蛋白质时，分子量较大的蛋白质无法进入凝胶内部的通道，只能在凝胶外部移动，导致移动速度较快，故最快的应为丙；蛋白质在聚丙烯酰胺凝胶中电泳时，它的迁移率取决于它所带净电荷以及分子的大小和形状等因素，故分子丁和分子戊形成的电泳带相距最近。16、下表有关“DNA粗提取和鉴定”的相关操作中所选取的试剂，不正确的是（   ） 相关操作选取的试剂A破碎鸡血细胞蒸馏水B溶解核内DNA2mol/LNaCl溶液C提取杂质较少的DNA冷却的95%的酒精DDNA的鉴定双缩脲试剂【答案】D【解析】考查“DNA粗提取和鉴定”的实验。D，DNA用二苯胺鉴定。17、下列有关“血红蛋白提取和分离”的相关叙述中，正确的是（   ）A．，其目的是去除细胞表面杂蛋白B．较大的杂质C．使血红蛋白溶于有机溶剂D．整个过程不断用磷酸缓冲液处理，是为了维持血红蛋白的结构143\n【答案】D【解析】考查“血红蛋白提取和分离”的实验。A，用蒸馏水进行红细胞的洗涤，目的是让红细胞吸水涨破，释放血红蛋白。B，将血红蛋白溶液进行透析，其目的是去除相对分子质量较小的杂质。C，血红蛋白释放时加入有机溶剂，其目的是是为了溶解细胞膜。18、下列关于生物技术实践的叙述中，错误的是(   )A．加酶洗衣粉中添加的酶包括纤维素酶、脂肪酶、淀粉酶和碱性蛋白酶等B．与斐林试剂检测相比，用尿糖试纸检测尿液中的葡萄糖，特异性更强、灵敏度更高C．利用PCR技术扩增目的基因时，引物Ⅰ和引物Ⅱ的碱基序列应互补D．腐乳制作过程中，添加料酒、香辛料和盐，均可以抑制杂菌的生长【答案】C【解析】综合考查选修一生物技术实践的内容。利用PCR技术扩增目的基因时，引物Ⅰ和引物Ⅱ分别与目的DNA两条链的两端互补，引物Ⅰ和引物Ⅱ的碱基序列没有关系19、下列说法不正确的是（   ）A．科学家从70～80℃热泉中分离得到耐高温的TaqDNA聚合酶B．制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的操作顺序为计算、称量、溶化、倒平板、灭菌C．用来判断选择培养基是否起到了选择作用需要设置的对照是接种了的牛肉膏蛋白胨培养基D．同其他生物环境相比，土壤中的微生物数量最大，种类最多20、下列关于微生物分离和培养的有关叙述，错误的是A．微生物培养前，需对培养基进行消毒B．测定土壤样品中的细菌数目，常用菌落计数法C．分离土壤中不同的微生物，要采用不同的稀释度D．分离能分解尿素的细菌，要以尿素作为培养基中唯一的氮源143\n【答案】A【解析】考查微生物分离和培养。本题为选修1微生物的培养与应用，有一定难度。当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌。通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品中大约含有多少活细菌。为了保证结果准确，一般设置3～5个平板，选择菌落数在30～300的平板进行计数，并取平均值。统计的菌落数往往比活菌的实际数目低，因此，统计结果一般用菌落数而不是活菌数来表示。根据选择培养的菌种的生理代谢特点加入某种物质以达到选择的目的。例如，培养基中不加入有机物可以选择培养自养微生物；培养基中不加入氮元素，可以选择培养能固氮的微生物；加入高浓度的食盐可选择培养金黄色葡萄球菌等。C：这是因为土壤中各类微生物的数量（单位：株/kg）是不同的，例如在干旱土壤中的上层样本中：好氧及兼性厌氧细菌数约为2185万，放线菌数约为477万，霉菌数约为23.1万。因此，为获得不同类型的微生物，就需要按不同的稀释度进行分离，同时还应当有针对性地提供选择培养的条件。21、在下列各项试验操作中加清水或蒸馏水是主要原理与其他项不同的是（   ）A在DNA粗提取时第一次加入蒸馏水   B 在DNA粗提取时第二次加入蒸馏水C制备细胞膜时在红细胞液中加入蒸馏水 D在已质壁分离的细胞一侧加入清水【答案】B【解析】考查DNA粗提取、制备细胞膜以及植物细胞质壁分离等实验的相同点。在A、C、D三个实验中，加入的蒸馏水或清水都是让细胞来吸水膨胀的，而B实验中加入蒸馏水的目的是让DNA从溶液中稀释出来。22、固定化酶是从20世纪60年代迅速发展起来的一种技术。科研人员用海藻酸钠作为包埋剂来固定小麦酯酶，以研究固定化酶的相关性质和最佳固定条件。酶活力为固定化酶催化化学反应的总效率，包括酶活性和酶的数量。下图甲、乙、丙为部分研究结果。下列有关叙述中，错误的是(   )A．由甲图可知，固定化酯酶比游离酯酶对温度变化适应性更强B．由乙图可知，浓度为3%的海藻酸钠包埋效果最好143\nC．由丙图可知，固定化酯酶一般可重复使用3次，之后若继续使用则酶活力明显下降D．固定化酶的酶活力较高，主要原因是增加了酶与底物的接触面积【答案】D【解析】以固定化酶实验为背景，考查学获取信息的能力。据甲图，温度为45℃时，固定化酶的活性很高而游离酶的活性下降，A正确；结合乙、丙图可知B、C正确；酶用海藻酸钠固定后，降低了酶与底物的接触面积，则D错误。23、筛选是生物技术中的一个重要环节。下列叙述不正确的是（   ）  A．基因工程中，利用目的基因对受体细胞进行筛选  B．杂交育种中，利用病原体感染法筛选出F2中抗病植株  C．细胞工程中，利用特定的选择培养基筛选出杂交细胞  D．微生物培养中，利用尿素作为唯一氮源的培养基筛选出分解尿素的细菌【答案】A【解析】考查生物技术中的筛选环节，属识记范畴。A、基因工程中，利用标记基因对受体细胞进行筛选。24、下列关于生物技术的叙述，不正确的是               （   ）A．DNA连接酶能特异性识别粘性末端从而将切割位点连接起来B．植物体细胞杂交过程中得到的杂种细胞具有连续分裂并分化形成完整植株的潜能C．单克隆抗体制备时需要利用特定的选择培养基筛选出杂交瘤细胞D．微生物培养中可以利用以尿素为唯一碳源的培养基筛选出能分解尿素的细菌【答案】A【解析】综合考查了选修教材中的生物技术。A选项中DNA连接酶没有特异性识别黏性末端的能力。25、（多选）腐乳制作过程中，豆腐含水量、盐的用量、发酵温度和酒的用量等均会影响腐乳风味和质量。下列相关叙述正确的是（   ）A．豆腐含水量过高，腐乳不易成形B．加盐量过多，腐乳硬度会增大C．前期发酵温度过低，腐乳“皮”不易形成D．酒的用量过多，后期成熟时间延长143\n26、如图是应用固定化酵母细胞进行葡萄糖发酵的装置，下列说法中不正确的是   A．为使固定化酵母细胞可以反复使用，实验过程一定要在无菌条件下进行B．加入反应液后应保持活塞1始终打开，活塞2则必须关闭C．装置的长导管主要是为了释放CO2并防止杂菌进入反应柱D．加入的反应液浓度不能过高以免酵母细胞因失水过多而死亡【答案】B【解析】考查葡萄糖发酵的知识。B，酒精发酵是在无氧条件下进行的，所以加入反应液后，活塞1应关闭；另由于使用固定化酵母细胞进行葡萄糖发酵，故活塞2要打开。27、“筛选”是生物学中培育生物新类型常用的手段，下列有关技术筛选不成功的是（   ）A．细胞中DNA的合成有D和S两种途径，效应B细胞中这两种合成途径都有，该细胞一般不增殖；骨髓瘤细胞中只有D途径。在细胞工程中若要将杂交瘤细胞从中筛选出来，可在培养基中加入能阻断D途径的药物。B．可以用添加伊红和美蓝的培养基分离大肠杆菌C．将具有不同优良性状的亲本杂交后，不断自交，并不断淘汰不符合要求的个体，直至后代不在发生性状分离，可培育出具有优良性状的新品种。D．在基因工程中，通过对细胞单独培养并检测目的基因表达的产物来筛选基因工程细胞【答案】B143\n【解析】以“筛选”为框架把不同知识组合一起．添加伊红和美蓝的培养基只能鉴别大肠杆菌。28、某兴趣小组准备开展“不同种类的加酶洗衣粉对同一污物的洗涤效果”的探究活动。对下列说法，你认为不正确的是   A．该实验的原理是酶的专一性        B．自变量是不同种类的加酶洗衣粉C．水质、水量、pH均可看作无关变量 D．洗涤过程中水温只要保持相同即可【答案】D【解析】在控制无关变量时，不仅要保证它们是相同的，而且要保证是适宜的。29、（多选）在探究活动中采集和处理实验材料是十分重要的一环。下列有关材料选择及处理的叙述中，正确的是（   ）A．利用猪血红细胞提取血红蛋白，采集血液时须加人生理盐水，否则血液会发生凝集B．利用干酵母探究细胞呼吸方式，须先将酵母细胞活化，否则实验现象不明显C．利用猪肝组织块探究酶的高效性，须先进行研磨，否则会影响气泡产生的速率D．利用天竺葵探究光合作用是否产生淀粉，须先进行黑暗处理，否则影响实验结果【答案】BCD【解析】考查实验材料的知识。A，防止血液凝集的措施是加入柠檬酸钠，加入生理盐水的目的维持红细胞正常的形态。30、葡萄美酒夜光杯，欲饮琵琶马上催。醉卧沙场君莫笑，古来征战几人回。”自古   酒就与人类生活息息相关。请回答下列酿制葡萄美酒的有关问题。（1）人类使用酿制葡萄酒的微生物主要是酵母菌，它的同化作用类型是            ，其无氧呼吸的反应式是                                           。（2）酵母菌繁殖的最适温度是          ；酒精发酵一般将温度控制在         。传统葡萄酒发酵技术所使用的酵母菌的来源是                            。143\n（3）葡萄酒呈现深红色的原因是                                       。（4）现在工厂化生产果酒，为提高果酒的品质，更好地抑制其它微生物的生长，采取的措施是                 ，并接入合适的菌种。（5）某同学人工自酿葡萄酒时，在发酵后期向发酵液中通入空气，并将发酵液置于30～35℃环境中，结果发现发酵液中有          出现，这类微生物在糖类缺乏时可以使       转化为          ，后者再转化为            （物质）。31、某制药厂排出的废气有很大异味，经测定废气中含有NH3，于是同学们想找到一种能分解NH3的细菌，请回答在细菌培养与选择方面的相关问题。（1）同学们从杂菌中选择所需菌种时，培养基中应该加入化学物质________以便选择出能分解NH3的菌种，从培养基的用途上看这种培养基叫做________________。（2）在配制培养基时除了要满足营养物质的需求外，还需满足微生物生长对______________、_________以及___________的要求。（3）获得纯净目的菌种的关键是_____________________，对实验操作的空间、操作者的衣着和手进行___________________________；培养皿、接种器具和培养基等进行_________。143\n（4）在纯化菌种时，可以选择平板划线法或者________________，前者一定注意接种环在接触菌体前要___________以避免菌种死亡，整个操作都要在____________附近进行。32、下表为某微生物培养基的配方，请回答：（l）该培养基中的碳源是        ，依用途划分，该培养基属于        培养基。不论何种培养基，在各成分溶化分装前，要进行的是          。（2）若用该培养基培养尿素分解菌，应除去的物质是      ，加入的物质是       。（3）为检测尿素分解菌的存在与否，还应加入     ，将呈    反应。（4）细菌种群进化过程中，起主要作用的变异来源是              。【答案】（1）(CH2O）  选择  先调整pH（2）青霉素和NaNO3  尿素（3）酚红   红色（4）基因突变【解析】考查微生物相关知识。（1）培养基中的碳源是由含碳有机物来提供，该培养基中含有青霉素可以用来选择某些微生物，应属于选择培养基；制备培养基时，在各种成分溶化前需要先调pH，在进行分装；143\n（2）尿素分解细菌是以尿素为氮源，而其它微生物不能以尿素为氮源，因此需要将培养基中的氮源除去，同时也需要把青霉素除去，添加尿素；（3）尿素分解细菌可将尿素分解为氨使培养基呈碱性，可使酚红试剂变红；（4）细菌只有基因突变一种变异方式。33、【生物——生物技术实践】2022年，我国利用秸秆生产车用燃料乙醇的关键技术获得了重大突破，目前已顺利进入工业化实验阶段。实验显示，每4吨秸秆（玉米、麦草秸秆等）可生产1吨燃料乙醇。秸秆的主要成分是纤维素，通过自主创新，我国已经掌握了纤维素的水解技术。请回答：（1）利用玉米秸秆生产乙醇首先选用_______________酶处理秸秆，使之转化为发酵所需的_________等物质，然后进行发酵，获得乙醇。（2）在培养分离纤维素分解菌的过程中，接种微生物可以采用平板划线法和____________________法。进行平板划线时，在划线结束后仍然要灼烧接种环，原因是__________________________________________________。（3）在筛选纤维素分解菌的过程中，通常采用____________染色法，这种方法能够通过颜色反应直接对纤维素分解菌进行筛选。从物理状态看，培养基应使用____________培养基。（4）在酒精发酵过程中，在不同时间内对发酵液样品进行检测，发现发酵液的pH一直下降，原因是_______________________________________________________________。（5）为了提高乙醇的品质和降低生产成本，研究人员提出可以使用固定化酵母细胞。制备固定化酵母细胞多采用_______________法。【答案】（1）纤维素    葡萄糖（2）稀释涂布平板法     及时杀死接种环上残留的菌种，避免细菌污染环境或感染实验操作者    （3）刚果红   固体（４）酵母菌在进行发酵过程中产生CO2溶于发酵液中，使pＨ下降。（5）包埋【解析】考查微生物的分离与培养，微生物的发酵工程。植物细胞壁的成分是纤维素，所以需要用纤维素酶将降解为葡萄糖，才能为微生物的培养提供能量；接种微生物常用的方式是平板划线法和稀释涂布平板法；发酵过程需要液体培养基，但微生物的培养常用固体培养。影响发酵液中pH变化的原因是培养液中酵母菌进行呼吸作用形成的二氧化碳的含量变化；固定化酵母细胞多采用包埋法。34、红茶菌液是一种传统的活菌饮料，制作流程是：制备红茶糖液→接种红茶菌种→发酵→红茶菌液。据此回答：(1)红茶菌种是酵母菌、醋酸菌和乳酪菌的共生体，可以用__________143\n法分离纯化得到不同的菌种。(2)在接种之前，红茶糖液要先煮沸后冷却，这是为了____________________________。(3)马铃薯去皮鲜切后，很容易发生由多酚氧化酶(PPO)催化的酶促褐变，严重影响外观。为了探究红茶菌液对鲜切马铃薯的保鲜作用及机理，某研究小组进行了如下实验：实验步骤：分三组，其中A组(实验组)处理液是_________________，B组是红茶糖液，C组是_____________。用各组处理液浸泡鲜切马铃薯条30min，取出后进行相同的风干、馐和冷藏处理。将马铃薯条保存5天，_________________________，并进行记录。①补充完成上述实验步骤。②为保证实验的科学性，还需要控制哪些无关变量？③实验结论如下：【解析】考查微生物培养的知识。(2)认真审题题干中的关键词“先煮沸后冷却”(3)①根据实验设计的单一变量原则和对照原则及参照题目中的信息（坐标中表明是实验是每天记录数据是各组ppo酶活力）②题干中的为表示强调等量原则，所以应该回答各组处理液的量要相等(1分)，马铃薯条数量相同、形状大小一致(1分)。③红茶菌液对鲜切马铃薯有一定的保鲜(或防褐变)作用(2分)143\n，这种作用可能是由红茶糖液发酵所带来的(2分，答出可能与红茶菌种或发酵有关部分都可给分)35、[生物——选1生物技术实践]现在大力提倡无纸化办公，但是仍然不可避免的每年要产生大量的废纸，其主要成分是木质纤维，人类正努力将其转化为一种新的资源——乙醇。右图是工业上利用微生物由纤维素生产乙醇的基本工作流程，请回答相关问题：（1）自然界中①环节需要的微生物大多分布在________________________的环境中。将从土壤中获得的微生物培养在以________________________为碳源、并加入_____________的培养基上筛选周围有________________________的菌落。（2）如上所述的筛选中获得了三个菌落，对它们分别培养，并完成环节②，且三种等量酶液中酶蛋白浓度相同，则你认为三种酶液的活性________________________（一定相同、不一定相同、一定不同），可以通过________________________进行定量测定。（3）根据测定结果，①环节常选择木霉，则②中获得的酶是________________________酶。该酶至少包括________________________三个组分。（4）生产中可以满足④环节的常见菌种是________________________，为了确保获得产物乙醇，⑤环节要注意___________________，④过程要注意避免_________________。（5）该技术虽然有广阔的前景，但存在酶的成本高等问题，为了降低成本主要从以下几方面入用改进该过程。首先要通过________________________等技术手段对产酶微生物改造，提高酶的产量。其次，可利用________________________等技术使酶能够重复利用。【答案】[生物——选修1生物技术实践]（15分）（1）富含纤维素（其他答案合理给分，如落叶较多等）  纤维素   刚果红    透明圈（2）不一定  对纤维素酶分解纤维素后所产生的葡萄糖（2分）（3）纤维素   C1酶、CX酶、葡萄糖苷酶（2分）143\n（4）酵母菌  发酵装置密闭（或保证无氧条件等）     污染杂菌（5）基因工程（基因突变）  固定化酶   【解析】（1）自然界中①环节需要的微生物大多分布在富含纤维素的环境中。将从土壤中获得的微生物培养在以纤维素为碳源、并加入刚果红的培养基上筛选周围有透明圈的菌落。（2）如果从三个菌落中获得三种等量酶液中酶蛋白浓度相同，则三种酶液的活性也不一定相同，可以通过对纤维素酶分解纤维素后所产生的葡萄糖进行定量测定。（3）根据测定结果，如果①环节常选择木霉，则②中获得的酶是纤维素酶。该酶至少包括C1酶、CX酶、葡萄糖苷酶三个组分。（4）生产中可以满足④环节的常见菌种是酵母菌，为了确保获得无氧呼吸产物乙醇，因此⑤环节要注意保证无氧条件，④过程要注意避免污染杂菌。 （5）为了降低成本首先要通过基因工程或基因突变等技术手段对产酶微生物改造，提高酶的产量。其次，可利用固定化酶等技术使酶能够重复利用。36、现在大力提倡无纸化办公，但是每年仍然不可避免的产生了大量废纸，其主要成分是木质纤维，人类正努力将其转化为一种新的资源——乙醇。下图是工业上利用微生物由纤维素生产乙醇的基本工作流程，请回答相关问题：（1）从生物体内提取出来的酶，将其分离提纯的最简便易行的方法是          技术，其原理是根据蛋白质分子的             大小和所带            多少分离蛋白质。（2）上述工作流程中①环节需要的微生物大多分布在                  的环境中。可利用                         技术，使②中的酶能够重复利用。（3）生产中可以满足④环节的常见菌种是                  ，④过程要注意对接种器材进行                 。为了确保⑤环节成功，后期要注意发酵装置               。【答案】（1）电泳（1分） 相对分子质量（1分）电荷（1分）（2）富含纤维素（其他答案合理给分，如落叶较多等）（1分）固定化（1分）143\n（3）酵母菌（1分）灭菌（1分）密闭（或保证无氧条件等）（1分）【解析】本题以文字材料和图解为信息载体，综合考查生物技术实践的相关基础知识，分离蛋白质最简便易行的方法就是电泳法，利用蛋白质分子的相对分子质量大小和所带电荷多少分离蛋白质。微生物大多分布生活环境和条件适宜的地方，寻找微生物需要到特定的环境中去寻找。固定化酶可以重复利用酶，提高酶的利用率。发酵产生酒精的常见菌种就是酵母菌，酵母菌的酒精发酵需要无氧条件，为避免发酵失败，需要对接种器材进行灭菌。37、【生物——生物技术实践】有些微生物能合成纤维素酶，通过对这些微生物的研究，使人们能够利用秸秆等废弃物生产酒精，用纤维素酶处理服装面料等。研究人员用化合物A、硝酸盐、磷酸盐以及微量元素配制的培养基，成功地筛选到能产生纤维素酶的微生物。分析回答问题。  （1）培养基中加入的化合物A是        ，为微生物的生长提供         ，这种培养基属于            培养基。  （2）为了筛选出能产生纤维素酶的微生物，向培养基中加入              。  （3）在筛选出能产生纤维素酶的微生物之前，可用液体培养基培养，增加微生物的浓度。若获得纯净的菌株，常采用平板划线的方法进行接种，此过程所用的接种工具是     ，操作时采用       灭菌的方法；还可用               方法操作。  （4）实验结束后，使用过的培养基应该进行灭菌处理才能倒掉，这样做的目的是     。143\n38、加酶洗衣粉是指含有酶制剂的洗衣粉。请回答下列问题：（1）为了探究某加酶洗衣粉中碱性蛋白酶含量与洗涤效果关系，某同学通过实验获得右图所示的结果。由图可知，加酶洗衣粉中碱性蛋白酶的最适含量是        %，本实验的自变量是          。（2）下表是围绕加酶洗衣粉的一项研究结果：温度/℃203040455060普通洗衣粉去污力/%1518202121.522加酶洗衣粉去污力/%304048504837上述实验结果可以得出的结论有：①                    ；②                   。143\n（3）在使用加酶洗衣粉过程中，对于特别脏的衣服、较大的洗衣量，写出两项提高洗涤效果的措施：①__________________________；②__________________________。【答案】（1）0.6% 碱性蛋白酶的浓度（2）①在相同温度条件下加酶洗衣粉的去污力比普通洗衣粉高 ②使用加酶洗衣粉时的适宜温度为45℃左右（或40～50℃）（3）用温水浸泡 延长浸泡时间 增加洗衣粉的用量等【解析】考查选修1教材中加酶洗衣粉的洗涤效果的相关探究与分析。（1）分析曲线，在碱性蛋白酶含量达到0.6%时去污力达到最高，再增加其含量去污力也不再增加，反而造成资源的浪费。自变量为坐标曲线的横坐标：碱性蛋白酶的浓度。（2）表中的结果纵向分析得出结论为：在相同温度条件下加酶洗衣粉的去污力比普通洗衣粉高；横向分析加酶洗衣粉的去污力，则可知：45℃左右（或40～50℃）加酶洗衣粉的去污力最强。（3）加酶洗衣粉的洗涤效果还受水温、浸泡时间、洗衣粉用量等方面的影响。因此可通过用温水浸泡，适当延长浸泡的时间，增加洗衣粉的用量等措施来提高洗涤效果。39、科学家运用植物组织培养的方法，已经把许多植物离体的组织或细胞，培养成了完整的植物体。操作流程如下：（1）该项生物技术利用的原理是        ；过程②表示        。（2）植物激素中生长素和细胞分裂是启动细胞生命活动的关键性激素，两者的用量比例会影响细胞的发育方向，生长素与细胞分裂素用量比值适中时，促进          ；生长素与细胞分裂素用量比值低时，有利于        、抑制         。（3）在植物组织培养的过程中，为什么要对外植体等进行一系列的消毒、灭菌，并且要求无菌操作?                                 。（4）通过花药培养可以得到单倍体植株，其过程一般有两种途径：一种是花粉通过  阶段发育为植株，另一种是在诱导培养基上先形成       再将其诱导分化成植株。（5）用PCR技术扩增产生抗癌药物的关键基因时，应向扩增仪中加入模板DNA、引物，此外还应加入        和      。DNA体外扩增过程包括了三个连续的步骤分别是变性、      和       。需要设计两种引物，引物的作用是143\n       。40.近几年我国柑橘大丰收，提取橘皮精油是提高其经济价值的重要途径。请分析回答提取过程的有关问题：   （1）提取橘皮精油，常采用＿＿＿＿＿＿法而不用蒸馏法，原因是＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿。   （2）提取橘皮精油时，为了提高出油率，首先将橘皮＿＿＿＿＿＿，并用石灰水浸泡，石灰水的作用是＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿。   （3）压榨过程，为了使橘皮油易与水分离，常加入＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿。   （4）得到压榨液后，过滤除去固体物和残渣，然后＿＿＿＿，进一步除去质量较小的残留固体物，再用分液漏斗或吸管将上层的橘皮精油分离出来。此时，橘皮油中含有少量的水和果醋，需＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿使杂质沉淀，用吸管吸出上层澄清橘皮油，其余部分过滤，＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿混合合并后成为最终的橘皮精油。143\n41.〔生物—生物技术实践〕生活中有许多微生物技术的应用，请分析回答： (1)家庭酿酒时先将米煮熟，其目的是                 。冷却到30℃后才能加酒药的原因是                           。如果时常开坛盖取酒，不久酒就会变酸，其原因是                                              。 (2)腐乳制备过程中，豆腐相当于微生物生长的                      ，豆腐变为味道鲜美腐乳的原理是                                        ，写出制作腐乳的实验流程：                                                   。 (3)在制作泡菜过程中，主要起作用的微生物是          ，欲检测泡菜中亚硝酸盐含量，使用对氨基苯磺酸溶液和                      溶液检测，泡菜溶液会出现玫瑰红色。【答案】(1)主要为了杀灭其他杂菌  太高的温度会抑制甚至杀死酵母菌 醋酸菌在有氧条件下，将酒精变为醋酸 (2)培养基 毛霉等微生物产生的蛋白酶能将豆腐中蛋白质分解成易于吸收的小分子肽和氨基酸，脂肪酶能将豆腐中的脂肪分解成甘油和脂肪酸。 让豆腐上长出毛霉→加盐腌制→加卤汤装瓶→密封腌制143\n(3)乳酸菌N-1-萘基乙二胺盐酸盐【解析】考查传统发酵技术的应用知识。(1)家庭酿酒时先将米煮熟，主要是为了杀灭杂菌。冷却到30℃后才能加酒药，这是因为太高的温度会抑制甚至杀死酵母菌。时常开坛盖取酒会导致酒变酸，原因是在酒坛中的醋酸菌是好氧型微生物，在有氧的情况下，醋酸菌会将酒精变为醋酸，所以酿酒后期必须保证无氧环境。(2)腐乳制备过程中，豆腐相当于微生物生长的培养基，腐乳制作原理是毛霉等微生物产生的蛋白酶能将豆腐中蛋白质分解成易于吸收的小分子肽和氨基酸，脂肪酶能将豆腐中的脂肪分解成甘油和脂肪酸。其流程主要是让豆腐上长出毛霉→加盐腌制→加卤汤装瓶→密封腌制。(3)泡菜制作过程中主要起作用的微生物是乳酸菌。检测泡菜中亚硝酸盐含量的原理是：使用对氨基苯磺酸与N-1-萘基乙二胺盐酸盐发生重氮化反应，生成玫瑰红色染料，然后与标准显色液比较。42.某实验小组欲从土壤中筛选出能分泌淀粉酶的芽孢杆菌，设计实验步骤如下，请给予合理的补充。（1）采样与培养：将采集的土样混匀后称取lg，置于经过      法灭菌处理的   （填“固体”或“液体”）培养基中，28℃振荡培养。（2）接种与选择：为避免培养液中菌体浓度过高，需将培养液进行      处理。之后，将菌液涂布接种于以       为唯一碳源的固体培养基上，30℃条件下培养。为避免污染，需将培养皿呈         状态放置。此外，为排除其他因素的影响，提高实验可信度，本步骤需设计           作为空白对照。（3）筛选与纯化：将适量的碘液滴加在平板中的菌落周围，如果菌落周围的现象是        ，则说明此种菌能够        。从平板中挑取实验效果明显的目的菌株，采用       法接种于新的培养基平板，可对菌株进行进一步的纯化。【答案】（1）高压蒸汽灭菌；液体（2）系列稀释（或“梯度稀释”）；淀粉；倒置；未接种的空白培养基（或“接种等量无菌水的培养基”）（3）出现透明圈；分泌淀粉酶使淀粉发生水解；（平板）划线【解析】本题主要考查微生物培养有关知识。（1）灭菌方法一般用高压蒸汽灭菌，由于接下来要用划线法接种，所以在些要用液体培养基（或者从第2小题也可以得出）。143\n（2）减小培养液菌体浓度一般用稀释方法。由于题目要求选出能分泌淀粉酶的芽孢杆菌，所以培养基就给含有且只有淀粉的培养基，倒置可以减少培养基受污染，为排除其它因素影响，需要设置未接种的空白的培养基对照组。（3）淀粉被水解，培养基会出现透明的现象。用划线法来培养,可进一步纯化菌种。43.回答与利用酵母菌制作果酒相关的下列问题：（1）在葡萄酒的自然发酵过程中，酵母菌的来源是                               。（2）酵母菌异化作用的类型是                       ；利用酵母菌制作果酒的原理可用反应式                                            表示。（3）现在工厂化生产果酒，为提高果酒的品质，更好地抑制其它微生物的生长，采取的措施是                                                              。（4）果汁发酵后是否有酒精产生，可用                      来检验。在酸性条件下，该试剂与酒精反应呈现                                            。【答案】（1）附着在葡萄皮上的野生型酵母菌                          （2）兼性厌氧型                 （3）直接在果汁中加入人工培养的酵母菌（4）重铬酸钾   灰绿色【解析】（1）在葡萄酒的自然发酵过程中，酵母菌的来源是附着在葡萄皮上的野生型酵母菌；（2）酵母菌异化作用的类型是兼性厌氧型，制作果酒涉及到的主要是酵母菌进行无氧呼吸产生酒精的反应；（3）若直接在果汁中加入人工培养的酵母菌，则没有其他杂菌的干扰，酵母菌将生活得更好；（4）在酸性条件下，重铬酸钾与酒精反应呈现灰绿色。44、【生物——生物技术实践】从自然界获得纯种的酿酒酵母，基本程序是：配制培养基—143\n接种—培养—观察记录—纯化培养。请回答下列有关的问题：（1）酵母菌的培养最好使用下列哪种培养基？（  ） A．牛肉膏蛋白胨培养基       B．麦芽汁琼脂培养基C．伊红-美蓝培养基           D．MS培养基（2）采用平板划线法接种时，开始接种时要灼烧接种环，目的是                  。要把接种后的培养基和一个未接种的培养基同时放入恒温箱培养，设置“未接种的培养基”做对照的目的是                  。（3）将得到的纯种酿酒酵母接种到葡萄汁中，经过发酵可以得到            。（4）将酵母菌破碎并提取得到酵母菌的蛋白质，利用聚丙烯胺凝胶电泳技术将得到的蛋白质进行分离，在电泳过程中，影响蛋白质迁移速度的因素包括蛋白质分子的           、          以及分子的形状等。（5）把从酵母细胞中提取的淀粉酶固定在尼龙布上制成固定化酶，采用的方法是        ，与传统酶应用技术相比，此技术最显著的优点是                        。45.[生物----生物技术与实践]143\n酵母菌等微生物在人类的日常生活中发挥着越来越大的作用。请回答下列问题：（1）利用酵母菌将葡萄汁发酵后是否有酒精产生，可以用重铬酸钾来检验，在酸性条件下，重铬酸钾与酒精反应呈现________色。在发酵过程中,随着酒精度的提高,发酵液逐渐呈现深红色,原因是_____________。（2）为了提高葡萄酒品质可以在葡萄汁中加入人工培养的酵母菌，可利用___________培养基来分离获得较为纯净的酵母菌种。（3）具有耐高糖和耐酸特性的酵母菌是理想的酒精发酵菌种的原因是______________。对野生酵母菌进行诱变可筛选出具有耐高糖和耐酸性的高产突变菌株，利用__________技术可大量获得突变菌所携带的特殊基因。（4）在酵母菌的纯化培养中，培养基上会出现一些分别由一个酵母菌繁殖而成的_______。为了能反复利用，需要将纯化后并经过繁殖培育得到的酵母菌与海藻酸钠溶液混合制成“凝胶珠”，这是使用___________技术来固定酵母细胞。【答案】（1）灰绿色  红葡萄皮的色素进入发酵液（2）选择（3）高糖环境会使杂菌细胞失水发生质壁分离，酵母菌发酵产生的CO2使发酵液pH降低抑制杂菌的繁殖（2分）    PCR（4）菌落   固定化细胞【解析】⑴酒精在酸性环境中与重铬酸钾呈现灰绿色，随着发酵的进行，酒精不断增多，使生物膜的透性增大，存在液泡中的色素进入发酵液而呈现红色。⑵选择培养基可以抑制不需要的微生物而获取所需要的微生物。⑶高糖使培养液的外界溶液浓度高导致一些杂菌失水而死亡，酵母菌在无氧呼吸过程中会产生酒精和二氧化碳，二氧化碳会降低培养液的PH值；通过PCR技术可以大量扩增相应的基因。⑷在微生物培养过程中，有一个微生物培养形成的集合成为一个菌落；海藻钠作为载体固定酵母细胞是固定化细胞技术的载体之一。46.多氯联苯是人工合成的含碳有机氯化物，用途很广（润滑油、油漆、油墨等都含有）。其是一种致癌因子。某研究小组依照下列实验方案筛选出能降解多氯联苯的微生物：143\n（1）配制④的固体培养基时，除添加③中液体培养基成分外，还应添加1%的____________。（2）设置⑥的目的是___________________。⑥与⑦培养基的主要区别在于        ；使用        法可以在④上获得单菌落。①一③重复培养的目的是_____________________________.（3）实验中培养基、培养皿、接种环、实验操作者的双手、空气所采用的灭菌、消毒方法依次是(  ) ①化学消毒 ②灼烧灭菌 ③干热灭菌 ④紫外线灭菌 ⑤高压蒸汽灭菌 ⑥巴氏消毒法A．⑤③②①④    B．①②③④⑤   C．⑥②③④①    D．③④②①⑥（4）日本科学家发现了一种生有超过身长1/10“大嘴”的细菌，可以大口吞噬物质，于是联想到可以通过生物技术手段高效降解多氯联苯等污染物。下列技术中最可能使用的是：A、PCR技术    B、固定化细胞技术   C、单克隆抗体技术   D、基因工程技术143\n47.目前，加酶洗衣粉中的蛋白酶主要是中温蛋白酶，最适酶活温度在50°C左右，由于日常洗涤用水的温度达不到该温度，导致蛋白酶活性受到影响。适冷蛋白酶是从适冷鱼类体内分离纯化或由深海适冷菌分泌出的酶类，最适酶活温度在20°C左右，用其作为洗衣粉添加剂可在较低的温度下达到理想的洗涤效果。下图为分离可分泌蛋白酶的适冷菌的操作步骤，据图回答问题：  （1）在将配制好的牛肉膏蛋白胨培养基分装到三角瓶中时，为避免培养基沾到瓶口，必须使用             进行分装，并及时进行        操作。143\n  （2）将扩大培养后的深海微生物用           法接种到含酪蛋白的固体培养基表面，在适宜条件下培养一段时间，挑出形成透明圈的菌落，即为初选出的适冷菌。  （3）为进一步检测分离出的适冷菌分泌的适冷蛋白酶的最适酶活温度，将该菌按上图所示分7组进行培养，这7组实验问形成了          ，         组所对应的温度为最适酶活温度。  （4）由操作过程可知该适冷菌的代谢类型为             。  （5）若将分离到的适冷菌接种到一定容积的牛肉膏蛋白胨液体培养基中，置于适宜条件下振荡培养，细菌数量将呈        增长，其环境容纳量主要取决于        。【解析】本题以实验题形式，综合考查微生物学的相关知识，（1）用三角漏斗进行分装，可以避免培养基沾到瓶口，还要及时进行灭菌操作，以避免污染；（2）稀释涂布平板法接种一般用于微生物分离纯化；（3）实验的不同组之间形成对照，因为要选的是适冷菌分泌出来的蛋白酶，所以要选透明圈与菌落直径比值最大所对应的温度为酶的最适温度；（4）从题意：未密封和加有机碳源可知，该适冷菌的代谢类型为异养需氧型的；（5）一定条件下细菌的增长是S型增长，其环境容纳量主要取决于培养基的体积和提供的营养物质的量。48.请回答下列与大肠杆菌有关的问题：  （1）从生态系统的成分上看，大肠杆菌属于＿＿＿＿；它的同化作用类型是＿＿＿＿。  （2）下表是某公司研发的一种培养大肠杆菌菌群的培养基配方。成分含量蛋白胨10.0g乳糖5.0g蔗糖5.0gK2HPO42.0g显色剂0.2g143\n琼脂12.0g将上述物质溶解后，用蒸馏水定容到1000mL根据用途划分该培养基属于＿＿＿＿培养基（选择、鉴别）。该培养基中的碳源是＿＿＿＿＿＿。  （3）培养大肠杆菌时，常用的接种方法是平板划线法和＿＿＿＿＿＿＿＿。为防止杂菌污染需要对培养基和培养皿进行＿＿＿＿。  （4）现有一升水样，用无菌吸管吸取1mL转移至盛有9mL无菌水的试管中，依次稀释103稀释度。各取0.1mL已稀释103倍的水样分别接种到三个培养基上培养，记录的菌落数分别为55、56、57，则每升原水样中大肠杆菌数为＿＿＿＿。  （5）以下微生物发酵生产特定产物时，所利用主要微生物的细胞结构与大肠杆菌相同的是＿＿＿＿。   A．制作果酒B．由果酒制作果醋  C．制作泡菜D．制作腐乳  （6）利用培养基不仅可以分离培养微生物，也可以进行植物组织培养。与微生物培养明显不同的是，用于组织培养的培养基中还需要加入＿＿＿＿。【答案】（1）分解者 异养型  （2）鉴别 乳糖、蔗糖（蛋白胨）  （3）稀释涂布平板法 灭菌  （4）5.6×108  （5）B、C  （6）植物激素（或生长素和细胞分裂素）【解析】(1)大肠杆菌在体外环境条件下培养是腐生生物，因此为分解者，同化作用类型是异养型。(2)培养基中有显色剤，用于鉴别不同种类的微生物，所以为鉴别培养基。(3)培养大肠杆菌常用的接种方法是平板划线法和稀释涂布平板法，培养基和培养皿需要灭菌。(4)每升原水样中大肠杆菌数计算式为(55+56+57)/(10-3×10-3×0.1)=5.6×108(5)所利用的微生物是：A为酵母菌B为醋酸菌，C为乳酸菌，D主要是毛霉。大肠杆菌为原核生物，与其结构结构相同的是醋酸菌和乳酸菌。(6)植物组织培养与微生物培养明显不同的就是，组织培养的培养基中还需要加入植物激素，主要是生长素和细胞分裂素。49.某校两个生物兴趣小组的同学打算用车前草和酵母菌完成一些高中生物实验，有些问题需要你的帮助。143\n(1)甲组选用车前草作材料进行如下实验：①取其叶片进行《观察植物细胞的质壁分离和复原》的实验时，取叶片的下表皮细胞(不含叶绿体)，在盖玻片的一侧滴入含有伊红(植物细胞不吸收的红色染料)的O．3g／ml的蔗糖溶液，则在显微镜下观察到原生质体内外的颜色分别是＿＿＿＿＿、＿＿＿＿＿。若将叶片的下表皮细胞依次浸于蒸馏水、O．3g／ml蔗糖和O．7g／mlKNO3溶液中，观察其原生质体的体积随时间的变化，结果如图1所示，则A、B、C三条曲线中表示细胞在蒸馏水中和在O．7g／mlKNO3溶液中的依次是＿＿＿＿、＿＿＿＿。②利用其完成《用显微镜观察多种多样的细胞》实验时，用10×的目镜和10×的物镜，在视野直径范围内看到一列相连的20个细胞，如果目镜不变，改用40×的物镜所看到的这列细胞的个数是＿＿＿＿。(2)乙组选用酵母菌作材料进行如下实验：①用附着于葡萄皮上的野生酵母菌制作果酒时，需要适时拧松瓶盖，但不能完全打开，其目的是＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿，实际操作中发现随着发酵时间的推移拧松瓶盖间隔时间延长，其原因是＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿。②用其进行《探究培养液中酵母菌种群数量的动态变化》实验，设计三组实验，定期对三组培养液中的酵母菌进行计数，绘制图2，分析三组实验产生不同现象的原因最可能是＿＿＿＿＿＿＿＿不同。③用其进行《酵母细胞的固定化技术》实验，绘制图3(注：酶活力为固定化酶催化化学反应的总效率，包括酶活性和酶的数量)。图示曲线表明浓度为＿＿＿＿的海藻酸钠包埋效果最好，当海藻酸钠浓度较低时，酶活力较低原因是＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿。143\n50、【生物——生物技术实践】有些微生物能合成纤维素酶，通过对这些微生物的研究，使人们能够利用秸秆等废弃物生产酒精，用纤维素酶处理服装面料等。研究人员用化合物A、硝酸盐、磷酸盐以及微量元素配制的培养基，成功地筛选到能产生纤维素酶的微生物。分析回答问题。  （1）培养基中加入的化合物A是        ，为微生物的生长提供         ，这种培养基属于            培养基。  （2）为了筛选出能产生纤维素酶的微生物，向培养基中加入              。  （3）在筛选出能产生纤维素酶的微生物之前，可用液体培养基培养，增加微生物的浓度。若获得纯净的菌株，常采用平板划线的方法进行接种，此过程所用的接种工具是     ，操作时采用       灭菌的方法；还可用               方法操作。  （4）实验结束后，使用过的培养基应该进行灭菌处理才能倒掉，这样做的目的是     。143\n51.为了检测饮用水中是否含有大肠杆菌，培养基的配方如下表：蛋白胨乳糖蔗糖K2HPO4蒸馏水10g5g5g2g1000mL（1）表中漏掉的物质是___________，根据培养基的物理性质，该培养基应为_______。（2）该培养基所含的碳源有____________________，其功能是____________________。配制培养基时，必须注意各种营养物质的__________和__________。（3）不论何种培养基，在各种成分都溶化后分装前，要进行的是___________。（4）当大肠杆菌体内某代谢产物X含量过高时，X会与酶Y结合，导致Y的结构__________变化，Y的活性降低。人工控制微生物代谢的措施包括改变微生物的遗传特性、__________等。【答案】(1)伊红　　美蓝(或伊红、美蓝、琼脂)，固体培养基(2)蛋白胨、乳糖、蔗糖　　合成细胞物质及一些代谢产物　　浓度　　比例(3)调pH(4)发生可逆性　　控制生产过程中的各种条件(或控制发酵条件)【解析】考查大肠杆菌的培养基的知识。（1）在培养基中加入伊红和美蓝，可以用来鉴别大肠杆菌等细菌。鉴定菌种的培养基主要是固体培养基。143\n（2）凡是能为微生物提供生长繁殖所需碳元素的营养物质，称为碳源。碳源主要用于合成微生物的细胞物质和一些代谢产物。配制培养基时，必须注意各种营养物质的浓度和比例，否则会产生不良后果。（3）见答案。（4）酶活性发生改变的主要原因是，代谢过程产生的物质与酶结合，致使酶的结构产生变化。但这种变化是可逆的，当代谢产物与酶脱离时，酶结构便会复原，又恢复原有的活性。人工控制微生物代谢的措施包括改变微生物的遗传特性、控制生产过程中的各种条件(或控制发酵条件)等。52.有如下图所示的探究性实验装置共6个，6个装置中分别加入葡萄糖饱和溶液和两个凝胶珠，实验开始时，小液滴都在c点（刻度管足够长，瓶内氧气充足）。6个装置分别置于0℃、15℃、25℃、35℃、45℃、55℃温度下10分钟后记录各个装置中的小液滴位置，并描绘出坐标曲线图（如甲曲线）（1）实验的目的是                                ，自变量是                。（2）瓶中氢氧化钠溶液的作用是          ，小液滴移动的距离表示        。（3）实践上如果通过固定化醋酸菌生产醋酸，那么制备的凝胶珠大小与固定化酵母菌生产酒精相比，应该注意什么问题?为什么?（4）如果制备固定化醋酸菌细胞实验中，海藻酸钠浓度过低，请在坐标系中画出实验开始10分钟后的曲线乙。（5）工业生产中利用固定化细胞技术进行生产，从哪些方面可以达到延长利用固定化细胞的时间（至少两点）?【答案】（1）探究温度与醋酸发酵速度之间的关系 温度     143\n（2）吸收二氧化碳、防止产生的醋酸挥发影响实验结果的准确性 有氧呼吸消耗的氧气量    （3）注意固定化醋酸菌的凝胶珠要小一些。因为醋酸菌发酵生产醋酸是一个有氧呼吸的过程，凝胶珠小有利于氧气的供应，增加醋酸产量。（4）如图（5）无菌操作，控制好温度、pH值。【解析】该题考查了酶的应用（固定化细胞技术）、发酵、酶促反应的速度和温度之间的关系，能够全面地考查学生的生物技术实践能力。其中由于氢氧化钠能吸收二氧化碳、防止产生的醋酸挥发，故装置中小液滴在细管中的移动距离表示有氧呼吸消耗的氧气量。而由于体积较小的凝胶珠能获得与反应溶液较大的接触面积，使内部被固定的细胞反应更充分，故固定化醋酸菌所用凝胶珠比固定化酵母细胞小。53、【生物一生物技术实践】尿素是一种高浓度氮肥且长期施用没有不良影响，但尿素只有通过土壤中某些细菌分解为氨后，才能被植物吸收利用。分解尿素的细菌都能合成脲酶，脲酶能催化尿素水解。某同学要分离土壤中能分解尿素的细菌，并统计每克土壤样品中活菌数目，培养基配方如下：KH2PO4Na2HPO4MgSO4·7H2O蛋白胨葡萄糖尿素琼脂1.4g2.1g0.2g1.0g10.0g1.0g15.0g  （1）根据培养基的成分判断，该同学能否分离出土壤中分解尿素的细菌?_____（能／不能），原因是__________________________________。  （2）要统计每克土壤样品中活菌数目，宜采用    法接种，根据土壤样品的稀释倍数和接种稀释液的体积，统计平板上的__________________就能大约推测出样品中活菌数。  （3）初步分离脲酶通常用      法，如下图，试管中收集到的液体最先出现的是___________。鉴定分离出的脲酶纯化程度，一般采用_______法。143\n  （4）该同学设想：由活性脲酶和尿素混合，制成“加酶尿素"，尿素肥效一定更高。为了提高“加酶尿素"中脲酶的利用率，应当采用         技术。54.下图是“DNA粗提取与鉴定”相关实验步骤，请据图分析回答：（1）鸡血细胞是进行该实验较好的实验材料，这是因为_________________________。从鸡血细胞中释放出核物质的处理方法是_________________________。143\n（2）图a表示释放核物质后进行过滤的过程，过滤后取             进行下一步实验。（3）图b表示的相关操作过程中，加入2mol/LNaCl溶液的作用是                。（4）图c表示在滤液中加入冷却的95%的酒精，其目的是__________________________。55.下列有关酵母菌和醋酸菌的叙述，不正确的是（）A两者的正常繁殖都离不开氧气B在无氧条件下，酵母菌可以生产酒精，醋酸菌则不能生产醋酸C两者都是异养生物，生存都离不开葡萄糖D醋酸菌可以以酵母菌的某种代谢产物为原料来合成醋酸【答案】C【解析】本题考查酵母菌和醋酸菌的代谢特点。要求同学们从对两者的代谢过程的识别、比较过程中来分析各个选项。醋酸菌是好氧型生物，在氧气充足的环境中才能完成其正常的生命现象（包括繁殖和代谢产生醋酸）；酵母菌属于兼性厌氧型生物，在有氧和无氧环境中都能生存，但其无氧呼吸产生的能量少，不足以满足其繁殖对能量的需求，所以两者的正常繁殖都离不开氧气，AB正确。醋酸菌在缺乏糖源时，能把乙醇氧化成乙醛，再将乙醛氧化成乙酸；而酵母菌在无氧环境中能产生酒精，C错误，D正确。143\n56.在果酒、果醋和腐乳制作中，都要防止微生物污染，有关叙述正确的是（   ）A．果醋发酵阶段应封闭充气口，防止杂菌进入B．腌制腐乳的卤汤中应含有12％左右的酒精以抑制细菌的增殖C．利用自然菌种发酵果酒时，将封有葡萄汁的发酵瓶进行高压灭菌D．将长满毛霉的豆腐放在瓶中，并逐层加盐，接近瓶口部分的盐要铺薄一些【答案】B【解析】本题考查的是果酒，果醋，腐乳制作的基本过程及相关注意事项。醋酸菌是好氧菌，发酵的时候需要通入无菌空气；利用自然菌发酵时利用的就是葡萄汁中的酵母菌，高压灭菌会杀死酵母菌；腐乳制作时装坛时越靠近坛口盐越要厚一些。3.在利用葡萄自然发酵产生果酒的过程中，未经杀菌，但其他杂菌不能生长的原因是（   ）A．经冲洗后的葡萄上只有野生型酵母菌，无其他杂菌B．其他杂菌不能利用葡萄汁中的糖作为碳源C．在缺氧和呈酸性的发酵液中，酵母菌能大量繁殖，其他杂菌不适应环境而被抑制D．酵母菌发酵产生大量酒精，杀死了其他杂菌【答案】C【解析】本题主要考查学生对发酵过程的记忆和理解。冲洗的目的是洗去浮尘，在冲洗的过程中，杂菌和酵母菌被洗掉的机会是均等的；异养微生物都能利用糖，根本原因还是其他微生物不适应缺氧和酸性环境。57.金黄色葡萄球菌有很强的致病力，常引起骨髓炎等，还可能引起食物中毒，下述实验结束后的做法错误的是（）A．对接种环进行灼烧处理B．带菌培养基须经高压蒸气锅灭菌后才能倒掉C．带菌培养基须经加热后才能倒掉D．接种后双手须经肥皂洗净，再用75%的酒精棉球擦试【答案】C【解析】143\n金黄色葡萄球菌有很强的致病力，所以在操作时一定要做到安全防范，接种后双手用肥皂洗净，再用75%酒精棉球擦拭起到杀菌的作用；对接种环进行灼烧也可以杀灭细菌防止污染环境；高压蒸汽灭菌也可杀死培养基中的金黄然葡萄球菌。如是果只对带菌培养基进行加热杀不死其中的致病菌，因为此菌的耐高温能力很强，会污染环境。58.用稀释涂布平板法来统计样品中活菌的数目，其结果与实际值相比（）A．比实际值高B．比实际值低C．和实际值一致D．比实际值可能高也可能低【答案】B【解析】因为当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落，而样品稀释度无论多高都很难使其中的细菌都单个分布于培养基上。59.在做分离分解尿素的细菌实验时，A同学从对应106培养基上筛选出大约150个菌落，而其他同学只选择出大约50个菌落。下列有关叙述，不正确的是（）A甲同学出现这种结果的原因可能是由于土样不同，也可能是操作过程出了问题B可以将甲同学配制的培养基在不加土样的情况下进行培养作为空白对照，以证明培养基是否受到污染C将其他同学用与甲同学一样的土壤进行实验，如果结果与甲同学一致，则可以证明甲同学无误DB、C选项的实验思路都遵循了实验的对照原则【答案】D【解析】同学们应从样品、培养基和操作过程等角度寻找原因。在实验设计时通过设置对照排除无关变量的影响。甲同学出现这种结果的原因可能的原因有两种：一是由于土样种微生物多或繁殖能力强；二是由于培养基本身或操作过程失误被杂菌污染。若要证明培养基是否受污染，就用培养基在不加土样的情况下进行培养，如果菌落出现，说明培养基被污染，反之，养基没有被污染。若要证明是由于土壤本身的因素造成的，就让其他同学用与甲同学一样的土壤进行实验，如果结果与甲同学一致，则可以证明甲同学无误；如果结果与甲同学不一致，则可能是由于甲同学实验用的培养基或操作过程失误被杂菌污染。B选项的实验思路遵循了实验的对照原则;C选项的实验思路没有遵循实验的对照原则。60.下列有关刚果红染色法的叙述，不正确的是（）A刚果红可以在细菌菌落形成前倒平板时加入B刚果红可以在菌落形成后加入C在菌落形成前倒平板时加入，刚果红不需要灭菌D在菌落形成后加入刚果红时，刚果红不需要灭菌143\n【答案】C【解析】同学们从纤维素分解菌的两种筛选方法的异同点入手，结合微生物培养过程无菌条件的控制入手解答该题。刚果红可以与纤维素形成红色复合物，当纤维素被纤维素酶分解后，红色复合物无法形成，出现以纤维素分解菌为中心的透明圈，我们可以通过是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌。刚果红可以在细菌菌落形成前倒平板时加入，可以在菌落形成后加入。在细菌菌落形成前倒平板时加入前，要进行灭菌，以防杂菌的侵入，影响纤维素分解菌落的形成；在菌落形成后，用刚果红，则不需要灭菌。61.下列①②③④代表产生花粉植株的过程或中间结构，其中在两种途径中代表的内容不相同的是（）A．①②B.①④C.②③D.③④62.下列关于果胶酶的作用叙述错误的是A、分解水果细胞壁中的果胶，从而瓦解细胞壁B、可将果胶分解成半乳糖醛酸，水果汁变清C、分解水果细胞壁中的纤维素和果胶以及细胞间质D、可使果汁榨取变得容易，提高出汁率【答案】C【解析】果胶酶能分解成分是果胶的物质，比如细胞壁，可将果胶分解为半乳糖醛酸，从而使果汁榨取的时候比较容易；要分解纤维素，需要纤维素酶。63.下列有关固定化酶和固定化细胞的说法正确的是A．某种固定化酶的优势在于能催化系列生化反应B．固定化细胞技术一次只能固定一种酶143\nC．固定化酶和固定化细胞都既能与反应物接触，又能与反应物分离D．固定化酶和固定化细胞都能适宜用包埋法制备【答案】C【解析】固定化酶和固定化细胞，就是利用理化方法将酶或细胞固定在一定空间内的技术。固定化酶既能与反应物接触，又能与产物分离，同时酶还可以被反复利用，其中酶的特性没有发生改变。固定化细胞还能产生一系列酶，可以进行反应。固定化细胞适宜用包埋法制备，固定化酶适宜用化学结合法、物理吸附法制备。64..多聚酶链式反应（PCR）是一种体外迅速扩增DNA片段的技术。PCR过程一般经历下述三十多次循环：95℃下变性（使模板DNA解旋）→55℃下复性（引物与DNA模板链结合）→72℃下延伸（形成新的脱氧核苷酸链）。下列有关PCR过程的叙述中不正确的是A.变性过程中破坏的是DNA分子内碱基对之间的氢键，也可利用解旋酶实现B.复性过程中引物与DNA模板链的结合是依靠碱基互补配对原则完成C.延伸过程中需要DNA聚合酶、ATP、四种核糖核苷酸D.PCR与细胞内DNA复制相比所需要酶的最适温度较高【答案】C【解析】本题考查PCR不同阶段温度的控制及作用。解题时同学们应注意细胞内DNA复制过程是在常温下进行的；而PCR过程的各个阶段温度都比较高。变性是为了使DNA内部的氢键断裂，双螺旋打开，体内复制时借助解旋酶来实现；借助碱基互补配对原则，引物可与DNA模板链的结合；延伸时是形成新的DNA分子，需要以脱氧核苷酸为原料；PCR过程的温度高，会导致一般的DNA聚合酶失活，需特定的耐高温DNA聚合酶。65.相对分子质量不同的两种蛋白质在凝胶色谱柱中的行进过程，可表示为图中哪一个：()【答案】B【解析】考查凝胶色谱法的原理，利用分子量大的蛋白质只能从凝胶间隙通过，路程短，速度快，先到达色谱柱的下端；分子量小的蛋白质分子可进入到凝胶内部的通道，路程远，速度慢，后到达色谱柱的下端。143\n66.在植物有效成分的提取过程中，常用萃取法、蒸馏法和压榨法，下列关于这三种方法叙述错误的是（    ）A、蒸馏法的实验原理是利用水将芳香油溶解下来，再把水蒸发掉，剩余的就是芳香油B、压榨法的实验原理是通过机械加压，压榨出果皮中的芳香油，C、萃取法的实验原理是使芳香油溶解在有机溶剂中，蒸发掉溶剂后就可获得芳香油D、蒸馏法适用于提取玫瑰油、薄荷油等挥发性强的芳香油【答案】A【解析】本题考查物有效成分提取的原理。同学们应从各种方法的特点、适用范围入手，结合被提取物质的理化性质入手解答该题。蒸馏法是利用水蒸气将挥发性较强的芳香油携带出来，适用于提取玫瑰油、薄荷油等挥发性强的芳香油；压榨法通过机械加压，压榨出果皮中的芳香油，适用于柑橘、柠檬等易焦糊原料的提取；萃取法使芳香油溶解在有机溶剂中，蒸发掉溶剂后就可获得芳香油，它的适用范围广，要求原料的颗粒要尽可能细小，能充分浸泡在有机溶液中。67.对胡萝卜素的提取过程中分析正确的是（    ）A．在把新鲜的胡萝卜切成米粒大小的颗粒置于烘箱中烘干时，温度越高、干燥时间越长，烘干效果越好B．在萃取过程中，在瓶口安装冷凝回流装置是为了防止加热时有机溶剂的挥发C．在浓缩干燥前，没有必要进行过滤D．将滤液用蒸馏装置进行蒸馏，要收集蒸发出去的液体，蒸发出去的是胡萝卜素，留下的是有机溶剂68、某科研小组研究营养物质浓度对细菌数量的影响，获得如图所示的结果。据图能得出的结论是             （   ）143\n A．营养物质浓度很低时，其浓度不会影响生长速率  B．随营养物质浓度升高，生产速率将不再受营养物质浓度影响  C．超过一定浓度，营养物质浓度只影响最终菌体产量，不影响生长速率  D．高浓度的营养物质对生长速率和菌体产量都不产生影响69.下面是果酒和果醋制作的实验流程和某同学设计的果酒和果醋的发酵装置。根据图示回答下列问题：⑴完成图1中的实验流程。⑵冲洗的主要目的是，冲洗应特别注意不能，以防止菌种的流失。⑶图2装置中的充气口在时关闭，在时连接充气泵，并连续不断地向内。排气口通过一个长而弯曲的胶管与瓶身连接有什么作用？。⑷排气口在果酒发酵时排出的气体是由产生的，在果醋发酵时排出的是。⑸若果汁中含有醋酸菌，在果酒发酵旺盛时，醋酸菌能否将果汁中的糖发酵为醋酸？说明原因。143\n。⑹在酒精发酵时瓶内温度一般应控制为。醋酸发酵时温度一般应控制为。【答案】（1）醋酸发酵（2）洗去浮尘反复冲洗（3）果酒发酵果醋发酵泵入空气（氧）（4）酵母菌CO2剩余（含氧量少）的空气、CO2（5）不能。因为果酒发酵时的缺氧能抑制醋酸菌生长，且醋酸菌发酵条件是氧气充足（6）18～25℃30～35℃【解析】本题考查果酒和果醋制作的实验装置、流程、条件控制。解题时同学们要充分运用酵母菌的代谢特征去分析题目给出的问题。⑴醋酸菌可以利用酵母菌无氧呼吸产生的酒精来生产醋酸；所以可以利用酒精发酵的产物进行醋酸发酵。⑵对于果酒的自然发酵，冲洗不要反复进行，因为酵母菌被冲掉的机会和一般杂菌均等；当酵母菌数量减少，发酵周期加长，产生酒精含量下降。⑶用酵母菌制作果酒的后期（酒精生成阶段），充气孔应关闭，创造一个无氧环境；果醋制作过程中要不断补充氧气，要把冲气孔打开。果酒、果醋制作使用的装置，装置中的排气口与一弯曲的胶管连接，可以防止空气中的微生物进入装置造成污染。⑷酵母菌在无氧环境中通过无氧呼吸产生酒精和二氧化碳，所以排气孔排出的气体中只有二氧化碳；醋酸菌是在有氧环境条件下产生醋酸的，所以果醋发酵时排出的气体中除了含二氧化碳，还有氧气。⑸⑹见答案。70..如图所示，图Ⅰ为植物组织培养流程图，图Ⅱ为植物组织培养过程的部分示意图，请据图回答：⑴从理论上讲，植物细胞有形成再生植株的可能性，这是的表现。⑵图Ⅰ中外植体是指从植物分离出来的，a、b分别代表和过程。⑶图Ⅰ中的②和图Ⅱ143\nA中培养基上的培养物都是由无特定形态与功能的细胞组成，称为。⑷图Ⅱ中D培养物已经形成幼体。请根据植物组织培养过程对图Ⅱ重新排序：。⑸图Ⅱ中B中为胡萝卜根尖细胞，则培养成的新植株的叶片的颜色是，这说明根尖细胞具有。【答案】（1）植物细胞的全能性（2）器官、组织、细胞、原生质体（3）愈伤组织（4）B→A→D→C⑸绿色含有控制叶片绿色性状的基因【解析】同学们从植物组织培养的原理、过程入手解答该题。在解题过程中，要结合细胞分化的有关知识，去解释植物组织培养过程中细胞发生的变化。植物组织培养依据的原理是植物细胞的全能性。植物组织培养的基本过程是：；其中外植体是从植物器官、组织、细胞或原生质体分离出来的；根据图Ⅱ中的植物的发育情况可以看出培养过程为B→A→D→C。胡萝卜根尖细胞中含有该植物的全部基因；其中含有控制叶片绿色性状的基因，所以由其培养成的新植株的叶片也是绿色的。71.我国水果生产发展迅速，由于收获的季节性强，易造成积压，腐烂变质，为了解决上述问题且满足不同人群的需求，可以加工制作果汁、果酒、果醋等。在果汁生产中用到果胶酶，某课题研究小组为了探究果胶酶的某些特性，进行了如下实验：（1）实验方法：请将图中所示的操作进行排序。（2）实验结果：对照组与实验组进行了相同时间的实验，结果如图所示：①图中自变量是温度，除此之外还可用表示。A.酶的浓度B.苹果泥的量C.水的加入量D.pH143\n②图中的纵坐标还可用来表示。③步骤b中在果胶酶和苹果泥混合前，将两者分装在不同试管中，恒温的目的是。④实验小组改变了实验条件后重复做实验，得到曲线乙，苹果汁的澄清度最高点对应的横坐标是同一位置的原因是。引起曲线乙下移的原因是（至少答出两条）。⑶下表是某实验小组的详细实验结果：温度/℃1020304050607080果汁量/mL813152515121110根据上述结果实验结果表明，当温度为时果汁量最多，能不能确定该温度就是果汁酶的最适温度，如果不能，请设计出进一步探究果汁酶的最适温度的实验方案。。143\n72.关于DNA粗提取的实验材料的选择，也经过了多次实验效果的比较，最终选择鸡血做实验材料。请据图4—18回答下列问题：(1)鸡血细胞中红细胞__________，家鸡属于鸟类，新陈代谢旺盛，因而血液中__________细胞数目较多，可以提供丰富的__________。(2)实验前由老师用血细胞液供同学们做实验材料，而不用鸡全血，主要原因是__________。(3)在牧区采集牛、羊和马血比较方便，若用该材料按实验要求完成实验步骤后，结果是__________，这是因为这些动物和人类一样，____________________，但若改用动物肝脏做实验材料，实验能顺利进行。这是因为__________。(4)若选用动物肝脏做实验材料，在提取之前，最好增加____________________程序，使组织细胞更易分离。73.下图一和图二均为“DNA粗提取和鉴定”实验的相关操作。识图后回答相关问题。143\n图一图二⑴图一的正确操作顺序是_____________________。图二实验材料A可以是等，研磨前加入的B应是。⑵上图一C、E步骤都加入蒸馏水，但其目的不同，分别是_______和_______。图二所示步骤得到滤液Ｃ后，再向滤液中加入2moL/L的NaCl溶液的目的是，再过滤得到滤液D，向滤液D中加入蒸馏水和图一（C或E）的目的相同。⑶上图一A步骤中所用酒精必须是经过__________才能使用，该步骤的目的是__________。⑷在“DNA的粗提取和鉴定”实验中，将含有一定杂质的DNA丝状物分别放入体积为2mL的四种溶液中，经搅拌后过滤，获得4种滤液，含DNA最少的是滤液　　　　。1Ｂ液中搅拌研磨后过滤滤液E22mol／L的NaCl溶液搅拌后过滤滤液F30.014mol／L的NaCl溶液中搅拌后过滤滤液G4冷却的95％的酒精溶液中搅拌后过滤滤液H⑸为实验中所得到的丝状物的主要成分为DNA，可滴加___________试剂，沸水浴，如果出现____________则该丝状物的主要成分为DNA。【答案】(1)C→B→E→A→D洋葱（菜花等）　洗涤剂和食盐②加速血细胞的破裂降低NaCl溶液的浓度，使DNA析出使DNA溶解（于NaCl溶液中）E③充分预冷　　143\n提取含杂质较少(或较纯净)的DNA（4）滤液H　(5)二苯胺(或甲基绿)蓝色(蓝绿色)【解析】本题考查“DNA的粗提取与鉴定”的实验步骤。同学们从动物和植物细胞中DNA的粗提取与鉴定的个操作步骤和每一步的理论依据入手解答该题。⑴鸡红细胞中的DNA粗提取的步骤是：制备鸡血细胞液→提取核DNA→溶解细胞核内DNA→析出并滤取DNA→DNA再溶解→提取较纯净的DNA；植物细胞有细胞壁，在蒸馏水中不易胀破，可用研磨的方法破坏细胞使其细胞核中的DNA释放出来；研磨前加入洗涤剂和食盐，洗涤剂能瓦解细胞膜，食盐用来溶解DNA。⑵第一次加水是为了使血细胞吸水膨胀破裂；第二次加蒸馏水是为了稀释氯化钠溶液，使DNA的溶解度降低；DNA在2moL/L的NaCl溶液中的溶解度最大，图二所示步骤得到滤液Ｃ后，再向滤液中加入2moL/L的NaCl溶液的目的是使DNA溶解；滤液D中加入蒸馏水使NaCl溶液浓度降低，使DNA的溶解度降低，与图一的E步作用相同。⑶DNA不溶于酒精，而细胞中某些蛋白质溶于酒精；利用这一原理，可以将蛋白质和DNA进行分离。⑷DNA在0.014mol／L的NaCl溶液中溶解度最低，而滤液H是滤液G经进一步过滤产生的，所以滤液H中含DNA最少。(5)鉴定实验所得的丝状物的主要成分是DNA，除了可用二苯胺做鉴定试剂外，还可用甲基绿试剂直接滴在玻璃棒上的丝状物上，因甲基绿与DNA亲和力强，所以若丝状物被染成蓝绿色则证明该物质是DNA。74.Ⅰ.下面图一为胡萝卜素粗品鉴定装置示意图，图二为胡萝卜素的纸层析结果示意图，请据图回答下列问题。（1）图一中b的名称是，a的作用是，e为，对于e实验时应注意，f为，常用，如果层析液没及e会导致。（2）图二中A、B、C、D四点中，属于标准样品的样点是_____，属于提取样品的样点是_____。基线一般距底边________cm；在图中的层析谱中，①代表的物质是_______，②代表的物质是___________。Ⅱ143\n.为了探讨提取溶剂系统对类胡萝卜素提取的影响，科研人员分别用六种不同的溶剂系统按相同的提取步骤进行提取，比较类胡萝卜素的含量，以寻找不同植物品种的最佳的提取溶剂，请据图表作答：。（1）表中所用的提取溶剂，均为有机溶剂，原因是____________。（2）在本实验中，提取步骤必需相同，理由：________________。（3）请依据图一，写出它的实验课题：______________________________，其实验自变量为__________，因变量为___________。（4）从图一和图二及两者比较中，你能得出哪两个结论？_________________________。【答案】答案：Ⅰ.（1）色谱容器，防止层析液挥发，样品原点，点样应该快速细致并保持滤纸干燥，溶液石油醚，胡萝卜素溶解在层析液中，导致鉴定失败；（2）A和D；B和C；2，胡萝卜素；其他色素和杂质。Ⅱ.（1）有机溶剂能充分溶解类胡萝卜素；（2）确保单一变量；（3）探究六种溶剂系统对枸杞中类胡萝卜素提取的影响；六种溶剂；类胡萝卜素量；（5）结论一：六种溶剂对同一品种的类胡萝卜素的提取量影响不同；结论二：不同品种的最佳提取的溶剂种类不同。143\n【热点题型分析】热点题型1掌握微生物实验室培养的基本知识，解答微生物培养的有关问题【例1】有关平板划线操作正确的是（）A.使用已灭菌的接种环、培养皿，操作过程中不再灭菌B.打开含菌种的试管需通过火焰灭菌，取出菌种后需马上塞上棉塞C.将沾有菌种的接种环迅速伸入平板内，划三至五条平行线即可D.最后将平板倒置，放入培养箱中培养解析：本题考查平板划线操作的基本方法。应从平板划线操作过程中的细微之处如对无菌环境的控制入手来解答该题。在培养基上接种时，一定要做到无菌操作，以防止杂菌污染影响实验或研究的结果。微生物无处不在，包括空气中也充满了各种微生物，所以无菌操作显得很困难，但在酒精灯火焰附近约10cm的四周为无菌区，因而菌种试管和待接种试管管口不能离开火焰附近，接种环、棉塞也不能离开火焰附近。接种完毕之后为了防止菌体污染，保证安全要用火焰灼烧管口和接种环，立即盖上皿盖。为防止皿盖上的水珠落入培养基造成污染，应将平板倒置。答案：D【例2】下列常用的无菌操作中错误的是()A．无菌操作不要求杀死培养基中的一切细菌B．用酒精擦拭双手方法对操作者进行消毒C．实验操作过程应在酒精灯火焰附近进行D．玻璃器皿(吸管、培养皿)可用酒精擦拭解析：本题考查微生物培养过程中的无菌操作。应从无菌操作的概念和基本方法入手解答本题，要注意对不同的对象，要用不同的消毒或灭菌方法。无菌技术是用来防止实验室的培养物被其他外来微生物，而不是杀死培养基中的一切细菌，A正确。对操作者应用较温和的方法进行消毒，B正确。实验操作过程应在酒精灯火焰附近进行，防止瓶口的微生物污染培养基，C正确。对无菌操作用到的玻璃器皿要用干热灭菌的方法彻底消灭其中的微生物，用酒精擦拭不能达到目的，D错误。答案:D【例3】甲、乙两同学学习完微生物的实验室培养后，要利用所学知识研究水中微生物的情况。Ⅰ.甲为了检测饮用水中是否会有某种细菌，配制如下培养基进行培养：143\n蛋白胨10g乳糖5g蔗糖5gK2HPO42g蒸馏水1000mL将pH调到7.2（1）该培养基所含有的碳源有___________，其功能是____________________。（2）该培养基所含有的氮源有___________，其功能是____________________。（3）该培养基除含碳源、氮源外，还有微生物需要的营养物质，是____________________。（4）用该培养基培养微生物时，还需要控制哪些理化条件？。Ⅱ.乙同学为了调查湖水中细菌的污染情况而进行了实验。实验包括制备培养基、灭菌、接种及培养、菌落观察。请回答与此实验相关的问题。（1）乙同学培养基为（物理性质）培养基，其中含有的蛋白胨、淀粉分别为细菌培养提供了__    __和__   ____。（2）对培养基进行灭菌，应该采用的方法是___        ____。（3）为了尽快观察到细菌培养的实验结果，应将接种了湖水样品的平板置于__ ____中培养，培养的温度设定在37℃。要使该实验所得结果可靠，还应该同时在另一平板上接种___  ___作为对照进行实验。143\n题型攻略【知识储备】1.病毒的生存离不开细胞，不能用含有机物的培养基直接培养，应用相应的宿主细胞来培养。2.微生物和动物、植物营养要素比较碳源氮源能源无机盐、水动物糖类、脂肪等蛋白质或其降解物同碳源都需要，种类及功能基本相同微生物异养型糖类、脂肪、醇、有机酸等蛋白质或其降解物、铵盐、硝酸盐、N2等同碳源自养型CO2、碳酸盐等NH3、铵盐、硝酸盐等氧化无机物或利用光能绿色植物铵盐、硝酸盐光能3.消毒和灭菌比较项目理化因素的作用强度消灭微生物的数量芽孢和孢子能否被消灭消毒较为温和部分生活状态的微生物不能灭菌强烈全部微生物能4.两种纯化细菌的方法的比较143\n优点缺点适用范围平板划线分离法可以观察菌落特征，对混合菌进行分离不能计数适用于好氧菌稀释倒平板法可以计数，可以观察菌落特征吸收量较少，较麻烦，平板不干燥效果不好，容易蔓延适用于厌氧，兼性厌氧【方法技巧】（1）培养基的营养构成①各种培养基的具体配方不同，但一般都含有水、碳源、氮源和无机盐；②不同培养基还要满足不同微生物对pH、特殊营养物质以及氧气的要求。（2）配制牛肉膏蛋白胨固体培养基的注意事项①倒平板的温度一般50℃左右适宜，温度过高会烫手，过低培养基又会凝固；②平板需倒置，这样既可使培养基表面的水分更好地挥发，又可防止皿盖上的水珠落入培养基，造成污染。（3）平板划线操作的注意事项①第一次划线及每次划线之前都需要灼烧接种环灭菌；②灼烧接种环之后，要冷却后才能伸入菌液，以免温度太高杀死菌种；③划线时最后一区域不要与第一区域相连；④划线用力大小要适当，防止用力过大将培养基划破。热点题型2掌握微生物的计数方法，解答微生物的计数问题【例1】用稀释涂布平板法来统计样品中活菌的数目，其结果与实际值相比（）A．比实际值高B．比实际值低C．和实际值一致D．比实际值可能高也可能低解析：本题考查微生物的计数问题。弄清稀释涂布平板法的原理是正确解答该题的前提。因为当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落，而样品稀释度无论多高都很难使其中的细菌都单个分布于培养基上。答案：B【例2】（2022·安徽卷）下列是关于“检测土壤中细菌总数”实验操作的叙述，其中错误的是A．用蒸馏水配制牛肉膏蛋白胨培养基，经高温、高压灭菌后倒平板B．取104、105、106倍的土壤稀释液和无菌水各0.1ml，分别涂布于各组平板上C．将实验组和对照组平板倒置，37℃恒温培养24-48小时143\nD．确定对照组无菌后，选择菌落数在300以上的实验组平板进行计数【例3】自然界中的微生物往往是混杂生长的。人们在研究微生物时一般要将它们分离提纯，然后进行数量的测定。下面是对大肠杆菌进行数量测定的实验，请回答有关问题。      实验步骤：  （1）制备稀释倍数为102、103、104、105、106的系列稀释液。  （2）为了得到更加准确的结果，你选用                          法接种样品。  （3）适宜温度下培养。      结果分析：  （1）测定的大肠杆菌数，在对应稀释倍数为106的培养基中，得到以下几种统计结果，正确可信的是，其理由是                                       。      A．一个平板，统计的菌落数是230      B．两个平板，统计的菌落数是220和260，取平均值240      C．三个平板，统计的菌落数分别是210、50和520，取平均值260      D．四个平板，统计的菌落数分别是210、300、240和250，取平均值250  （2）一同学在稀释倍数为105的培养基中测得平板上菌落数的平均值为234，那么每毫升样品中的菌落数是（涂布平板时所用稀释液的体积为0．2mL）             。  （3）用这种方法测定的大肠杆菌密度，实际活菌数量要比测得的数量              ，因为                                             。  解析:本题考查微生物的计数方法。从两种接种方法的优缺点和统计菌落数目应注意的问题入手解答该题。为了得到更加准确的结果，应用稀释涂布平板法接种样品。⑴143\n选取多个菌落数相差不大的平板计数，取其平均值。⑵23.4÷0.2×106=1.17×108。⑶因为菌落可能由1个或多个细菌连在一起生长而成，所以实际活菌数量要比测得的数量多。答案：（2）稀释涂布平板法结果分析：（1）D暋在设计实验时，一定要涂布至少3个平板作为重复组，才能增强实验的说服力与准确性；在分析实验结果时，要考虑所设置的重复组的结果是否相当（2）1．17×108（3）多 当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察的是一个菌落题型攻略【知识储备】统计菌落数目的方法（1）显微镜直接计数法①原理：利用特定细菌计数板或血细胞计数板，在显微镜下计算一定容积的样品中微生物数量；②方法：用计数板计数；③缺点：不能区分死菌与活菌。（2）间接计数法（活菌计数法）①原理：当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌。通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品中大约含有多少活菌。②操作a.设置重复组，增强实验的说服力与准确性。b.为了保证结果准确，一般选择菌落数在30~300的平板进行计数。③计算公式：每克样品中的菌株数=(C÷V)×M，其中C代表某一稀释度下平板上生长的平均菌落数,V代表涂布平板时所用的稀释液的体积（mL），M代表稀释倍数。【易错指导】解错本类试题的原因是不理解菌落数目的统计规则，用稀释涂布平板法统计活菌数目。实验时，每一个浓度至少涂布三个平板，以增强实验的说服力和准确性。当样品稀释倍数足够高时，培养基表面生长的一个菌落来源于样品稀释液中的一个活菌。计数时选择菌落数在30—300的平板计数，若某两个或多个稀释浓度下获得的菌落数符合条件时，再看菌落数的比值，若小于2，则取两者的平均值；若大于2，则取大者。热点题型3运用选择培养基的选择原理，解答从环境中分离所需微生物的综合题【例1】苯酚是工业生产排放的有毒污染物质，自然界中存在着降解苯酚的微生物。某工厂产生的废水中含有苯酚，为了降解废水中的苯酚，研究人员从土壤中筛选获得了只能降解利用苯酚的细菌菌株，筛选的主要步骤如下图所示，①为土壤样品。下列相关叙述错误的是（）143\nA.图中②培养目的菌株的选择培养基中应加入苯酚作为碳源B.如果要测定②中活细菌数量，常采用稀释涂布平板法C.若图中④为对照实验，则其中应以苯酚作为唯一的碳源D.使用平板划线法可以在⑥上获得单菌落【例2】为了探究土壤中的微生物对尿素是否有分解作用，设计了以下实验，并成功筛选到能高效降解尿素的细菌（目的菌）。培养基成分如下表所示，实验步骤如下图所示。请分析回答问题：（1）简述土壤中可分解尿素的细菌的鉴定方法及原理:。（2）培养基中加入尿素的目的是筛选，这种培养基属于培养基。143\n（3）“目的菌”生长所需的氮源和碳源分别来自培养基中的和，实验中需要振荡培养，原因是。（4）转为固体培养基时，常采用接种，获得单菌落后继续筛选。（5）实验结束后，使用过的培养基应该进行处理后，才能倒掉。【例3】从自然菌样中筛选较理想生产菌种的一般步骤是：采集菌样→富集培养→纯种分离→性能测定。（1）不同微生物的生存环境不同，获得理想微生物的第一步是从适合的环境采集菌样，然后再按一定的方法分离、纯化。培养噬盐菌的菌样应从环境采集。（2）富集培养指创设仅适合待分离微生物旺盛生长的特定环境条件，使其群落中的数量大大增加，从而分离出所需微生物的培养方法。对产耐高温淀粉酶微生物的富集培养应选择的培养基，并在条件下培养。（3）下面两图是采用纯化微生物培养的两种接种方法接种后培养的效果图解，请分析接种的具体方法。获得图甲效果的接种方法是，获得图乙效果的接种方法是。143\n（4）配制培养基时各种成分在熔化后分装前必须进行，接种前要进行。在整个微生物的分离和培养中，一定要注意在条件下进行。解析：本题考查微生物的分离、培养、纯化的有关知识。解题时，对菌样采集必须考虑到所分离的微生物的生理特性和相应的土壤特点。培养微生物则要考虑它对营养的需要和对氧气、pH的不同要求。根据图甲和乙不难得出甲和乙的接种方法。配制培养基的步骤包括配制培养基、调节pH、分装、包扎、灭菌、搁置斜面等。答案：（1）海滩等高盐（2）以淀粉为唯一碳源高温（3）稀释涂布平板法平板划线法（4）pH调整高压蒸汽灭菌无菌题型攻略【知识储备】从混合样品中获得某种微生物的方法通常有两种：第一种是可利用该分离对象对某一营养物质有一“嗜好”的原理，专门在培养基中加入或不加该营养物质，从而使它成为一种选择培养基（如在含高浓度NaCl的培养基上分离金黄色葡萄糖球菌，在不含N的培养基上分离圆褐固氮菌）；或根据分离对象对pH、温度和氧气浓度的喜好，改变培养环境的理化性质，使环境条件最适宜该微生物的生存，从而达到分离的目的，将培养基放在高温环境中培养只能得到耐高温的微生物。第二种办法可利用该分离对象对某种抑菌物质的抗性，在混合培养物中加入该抑制物，经培养后，原来占优势的微生物生长受抑制，而分离对象却可乘机大大增殖，使之在数量上占优势（如在加入青霉素的培养基上分离真核微生物）。【方法技巧】该实验中的注意事项（1）设立重复组：统计某一稀释度下平板上的菌落数时，要至少涂布3个平板作重复组，增强实验结果的说服力与准确性。（2）对照原则①判断培养基中是否有杂菌污染，需将未接种的培养基同时进行培养。②判断选择培养基是否具有筛选作用，需设立牛肉膏蛋白胨培养基进行接种后培养，观察两种培养基上菌落数目，进行对比得出结论。【易错指导】对以下两点不清是解错该类试题主要原因：①牛肉膏蛋白胨培养基和选择培养基应各有一个空白对照，即不涂布菌液，目的是验证培养基中是否含杂菌；②样品稀释度将直接影响平板上生长的菌落数。热点题型4143\n运用鉴别培养基的鉴别原理，解答从环境中分离分解纤维素的微生物的综合题【例1】下列有关刚果红染色法的叙述，不正确的是（）A刚果红可以在细菌菌落形成前倒平板时加入B刚果红可以在菌落形成后加入C在菌落形成前倒平板时加入，刚果红不需要灭菌D在菌落形成后加入刚果红时，刚果红不需要灭菌解析：本题考查刚果红染色法的原理和方法。从纤维素分解菌的两种筛选方法的异同点入手，结合微生物培养过程无菌条件的控制入手解答该题。刚果红可以与纤维素形成红色复合物，当纤维素被纤维素酶分解后，红色复合物无法形成，出现以纤维素分解菌为中心的透明圈，我们可以通过是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌。刚果红可以在细菌菌落形成前倒平板时加入，可以在菌落形成后加入。在细菌菌落形成前倒平板时加入前，要进行灭菌，以防杂菌的侵入，影响纤维素分解菌落的形成；在菌落形成后，用刚果红，则不需要灭菌。答案：D【例2】分离纤维素分解菌的实验过程中操作有误的是(   )A．经选择培养后将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上B．富集培养这一步可省略，但培养纤维素分解菌少C．可通过定时测定葡萄糖产量的变化来衡量纤维素分解菌培养液中的纤维素酶产量D．对照组可用同样量的培养液涂布到不含纤维素的培养基上解析：本题考查对土壤中分解纤维素的微生物的分离过程。从实验的原理、基本流程入手来解答该题。经选择培养后，再经稀释，才能将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上；富集培养可省略；在纤维素酶的作用下，纤维素能被水解成葡萄糖。所以可通过定时测定葡萄糖产量的变化来衡量纤维素分解菌培养液中的纤维素酶产量；设置对照能证明经富集培养的确得到了欲分离的微生物。答案：A【例3】据中国食品产业网报道：纤维素酶从被发现起就受到世界各国生物界的关注。当今世界，能源和资源日趋危机，人们希望能借助纤维素酶将地球上最丰富（占全球总生物量80%）、最廉价的可再生资源纤维素转化为能直接利用的能源和资源。目前纤维素酶已被广泛应用到医药、食品发酵、烟草及饲料等各个领域。纤维素酶的成本能否下降，是能否实现纤维素酶在工业生产中被广泛应用的关键因素。143\n纤维素酶可以从能分解纤维素的细菌培养液中提取。某同学设计了如下分离土壤中纤维素分解菌的实验流程：土壤取样→选择培养→→鉴别培养。⑴请补充实验流程：。⑵寻找纤维素分解菌应到的土壤环境中。A．湿润B．富含纤维素C．富含N、PD．干旱如果找不到合适的环境，可采取的办法是。⑶选择培养的目的是，该过程研究人员用化合物A、硝酸盐、磷酸盐、以及微量元素配制的培养基进行选择培养，该培养基为（物理特性）培养基，其中加入的化合物A是______________，为微生物的生长提供_____________。⑷为了鉴别纤维素分解菌和进一步纯化菌种，可以在鉴别培养基上加入__________染液，将筛选获得的菌液稀释后用方法接种到鉴别培养基上，然后挑选产生的菌落作为菌种进行扩大培养。题型攻略【知识储备】选择培养基与鉴别培养基种类制备方法原理用途举例选择培养基培养基中加入某些化学物质依据某些微生物对某些物质或环境条件的嗜好、抗性而设计从众多微生物中分离所需的微生物加入青霉素分离得到酵母菌和霉菌伊红—143\n鉴别培养基培养基中加入某种试剂或化学药品依据微生物产生的某种代谢产物与培养基中的特定试剂或化学药品反应，产生明显的特征变化而设计鉴别不同种类的微生物美蓝培养基可以鉴别大肠杆菌【方法技巧】①纤维素分解菌的培养基为液体培养基，因培养基中无凝固剂，利用液体培养基以增加纤维素分解菌的浓度；②该培养基以纤维素做碳源和能源，其他绝大多数微生物不能正常生长；鉴别培养基因含琼脂，故为固体培养基，刚果红染色法就是应用的此培养基；③为流程中的“选择培养”是否需要，应根据样品中目的菌株数量的多少来确定。热点题型5明确酶的作用条件及特点，解答与影响酶促反应因素相关的试题【例1】（2022·广东文基）嫩肉粉是以蛋白酶为主要成分的食品添加剂，就酶的作用特点而言，下列使用方法中最佳的是()A.炒肉的过程中加入B.肉炒熟后起锅前加入C.先用沸水溶解后与肉片混匀，炒熟D.室温下与肉片混匀，放置一段时间，炒熟【例2】下图表示某研究小组在探究果胶酶的用量的实验结果。有关说法不正确的是A在ab段限制反应速率的主要因素是酶的用量B在bc段限制反应速率的因素是温度、pH、反应物浓度等C在ac段增加反应物浓度，可以明显加快反应速率D在该实验给定条件下，果胶酶的最佳用量是b点对应的值143\n解析:本题以酶浓度对酶促反应速率的影响曲线为载体，综合考查影响酶促反应速率的因素。应从酶的浓度和活性、底物的浓度两方面对反应曲线进行分析。由曲线图可以看出，在ab段，随着酶的用量的增大，酶促反应速率加快，说明此阶段限制反应速率的主要因素是酶的用量；此时增加反应物浓度，反应速率不会明显加快。在bc段，随着酶的用量的增大，酶促反应速率不再加快；此时反应物浓度成为限制反应速率的因素之一，增加反应物浓度，反应速率会加快。答案:C【例3】我国水果生产发展迅速，由于收获的季节性强，易造成积压，腐烂变质，为了解决上述问题且满足不同人群的需求，可以加工制作果汁、果酒、果醋等。在果汁生产中用到果胶酶，某课题研究小组为了探究果胶酶的某些特性，进行了如下实验：（1）实验方法：请将图中所示的操作进行排序。（2）实验结果：对照组与实验组进行了相同时间的实验，结果如图所示：①图中自变量是温度，除此之外还可用表示。A.酶的浓度B.苹果泥的量C.水的加入量D.pH②图中的纵坐标还可用来表示。③步骤b中在果胶酶和苹果泥混合前，将两者分装在不同试管中，恒温的目的是。④实验小组改变了实验条件后重复做实验，得到曲线乙，苹果汁的澄清度最高点对应的横坐标是同一位置的原因是。引起曲线乙下移的原因是（至少答出两条）。⑶下表是某实验小组的详细实验结果：温度/℃1020304050607080果汁量/mL813152515121110143\n根据上述结果实验结果表明，当温度为时果汁量最多，能不能确定该温度就是果汁酶的最适温度，如果不能，请设计出进一步探究果汁酶的最适温度的实验方案。。解析：本题以探究果胶酶的某些特性的实验为载体，综合考查了影响酶活性的因素、探讨温度对酶活性的影响的实验。在解答本题过程中，注意运用影响酶活性的各种因素对实验结果进行综合分析；注意实验自变量的设置、因变量的检测、无关变量的控制及实验的操作步骤；注意运用影响酶活性的因素的相关知识对图形曲线、图表数据进行分析。⑴实验顺序是：准备水果泥和配置果胶酶、水果泥和果胶酶分别水浴保温、水果泥和果胶酶混合保温、过滤果汁后用量桶计量。⑵果胶酶的活性受温度、pH等条件的影响，而与底物的量、酶的浓度和水的加入量没有关系；且每一种酶都有一个最适温度和最适pH值且该值恒定。衡量实验结果的指标有两种：一是果汁的量，另一个是果汁的澄清度。为了保证实验在相应温度下进行，必须使酶和底物分别保温达到要求后再混合。在相同温度条件下，pH、酶的浓度和底物浓度也会改变反应速率。⑶根据表格中数据可看出，在40℃时产生果汁量最多，C装置的温度比较接近酶的最适温度。要将温度确定得更加精确，以40℃为中心，以更小的温差（如0.5℃）设置自变量。答案：⑴acdb⑵①D②苹果汁的体积③保证底物和酶在混合时的温度是相同的④同一种酶的最适温度是一定的，不会因酶的浓度、底物量不同而改变pH、酶的浓度和苹果泥的量等因素⑶40℃不能以再设置多套装置，以40℃为中心，以更小的温差（如0.5℃）测量在更小范围内的温度内的果汁的产生量，果汁的产量最高的温度更接近酶的最适宜温度题型攻略【知识储备】影响酶促反应的因素包括酶的浓度、酶的活性和底物浓度三大方面；其中影响酶活性的因素有温度、pH值、酶的激活剂和抑制剂等。【方法技巧】探究影响酶促反应的环境条件时需要注意下列事项：①探究温度对酶活性的影响时，可以选用10℃作为温度梯度，设置的具体温度为10℃、20℃、30℃、40℃、50℃和60℃等，也可以根据酶的特点，尝试以5℃作为温度梯度。②探究pH对酶活性的影响时，只须将温度梯度改成pH梯度，并选定一个适宜的温度进行水浴加热。反应液中的pH可以通过体积分数为0.1%的氢氧化钠或盐酸溶液进行调节。③探究酶的用量是建立在探究最适温度和pH对果胶143\n酶活性影响的基础之上的。此时，研究的变量是果胶酶的用量，其他因素都应保持不变。实验时可以配制不同浓度的果胶酶溶液，也可以只配制一种浓度的果胶酶溶液，然后使用不同的体积即可。需要注意的是，反应液的pH必须相同，否则将影响实验结果的准确性。④在混合反应物和酶之前，一定要让两者分别达到相应的条件。这样可以避免底物和酶在混合时条件变化，从而影响实验结果。⑤将酶加入反应物后，应不时地用玻璃棒搅拌，使酶能更充分地催化反应。热点题型6联系影响酶促反应的因素，解答探究加酶洗衣粉洗涤效果的实验题【例1】下列探究某种加酶洗衣粉需要的最适温度的实验正确的是A．取一系列不同温度、其他条件相同的水，加入相同的污物及等量加酶洗衣粉，看哪一个温度中酶的效果最好B．在不同温度的水中，加入不等量洗衣粉，看哪种效果好C．将加酶洗衣粉加入30℃水中发现不如加到45℃水中洗涤效果好，说明45℃为最适温度D．将加酶洗衣粉与普通洗衣粉分别加入37℃的水中洗涤同样的污物，发现加酶洗衣粉效果好，说明加酶洗衣粉的最适温度为37℃【例2】某同学进行“加酶洗衣粉和普通洗衣粉的洗涤效果比较”课题研究。下列叙述错误的是(   )A．设计对照实验，分别使用蛋白酶洗衣粉和复合酶洗衣粉B．洗衣粉用量、污渍种类和冼涤温度等无关变量全部相同且适宜C．可根据污渍完全洗净所需时间的差异得出实验结论D．应设计一个既不用加酶洗衣粉洗涤也不用普通洗衣粉洗涤的对照解析:本题考查143\n加酶洗衣粉洗涤效果的实验问题。在解答本题时，首先应弄清楚实验的目的。本实验的目的是比较加酶洗衣粉和普通洗衣粉的洗涤效果，自变量为洗衣粉的种类（即加酶洗衣粉和普通洗衣粉），而A选项给予的都是加酶洗衣粉，错误。除了自变量，凡是影响该实验结果呈现的因素（如洗衣粉用量、污渍种类和冼涤温度等）全是无关变量，各组应保持无关变量相同且适宜，B正确。污渍完全洗净所需时间越长，说明洗涤效果不明显；污渍完全洗净所需时间越短，说明洗涤效果越明显，C正确。应该设置一空白对照来说明洗衣粉的作用，D正确。答案:A【例3】洗衣粉是人们日常生活所必需的，有同学对加酶洗衣粉的作用很感兴趣，为此做了以下实验探究。实验过程：①用天平称取加酶洗衣粉若干份，每份5克。②制作被牛奶(主要含蛋白质和脂肪)和蓝墨水[主要成分：阿拉伯树胶(植物纤维)、鞣酸与硫酸亚铁]处理过的同一布料若干份(污渍大小以滴管滴数为准)。③取2只500毫升烧杯，依次编号为A、B，分别加入200毫升水和一份已称好的洗衣粉，放人10℃水浴锅中并搅拌。④取2块被牛奶和蓝墨水处理过的布料各一份，分别同时放人烧杯中，用玻璃棒搅拌，并用秒表记录除去污渍所需时间。然后，分别以水浴锅温度依次为20℃、30℃、40℃、50℃、60℃、70℃、80℃，重复步骤③④实验，记录除去污渍所需时间，结果如下表。不同温度除去不同污渍所需时间(分钟)水温(℃)1020304050607080奶渍48432812641217蓝墨水93868072686781105(1)请以温度为横坐标，酶促反应速度为纵坐标画出除去奶渍实验的大致情况图。(2)解释在同一水温下除去两种污溃时间不同的可能原因是:(3)请你为上述探究实验命题。(4)上述探究过程(①至④)隐含和两个步骤。(5)上述实验牵涉两项对照关系，一项是针对的成分对照，另一项是针对的条件对照。这里的条件对照与一般实验空白对照的区别是：。解析：本题以不同温度条143\n件下洗衣粉对不同污渍去污率的影响实验为背景，综合考查了酶的特性、实验的基本理论、实验分析、科学探究的一般过程，及数据处理分析能力和用图表等多种形式描述实验结果的能力。⑴用描点法就可以绘出曲线。⑵根据图表数据，在相同温度下，同一种酶除去两种污溃所用的时间不同；说明同一种酶对不同污溃的处理效果不同，体现了酶的专一性。⑷科学探究的一般过程包括观察现象、发现问题、提出假说、设计实验验证假说和对结果进行交流和评价，本题探究过程(①至④)为设计实验过程，设计思路中隐含了要探究的问题（即提出的假说）。⑸从图表每一列的数据反应的是同一种酶对对不同污渍的作用效果，实验变量为污渍的种类（即底物的种类）；每一行的数据反应的是不同温度下同一种酶对对同一污渍的作用效果，实验变量为温度的高低。答案：(2)加酶洗衣粉含蛋白酶和脂肪酶，而酶有专一性且不同的酶其活性受温度的影响不同(3)不同温度条件下洗衣粉对不同污渍去污率的影响(4)提出假设设计实验(5)不同底物不同温度条件对照组互为对照(或互为实验组)题型攻略【知识储备】探究加酶洗衣粉洗涤效果的实验应注意的几个问题：⑵洗涤方式和材料的选择。洗衣机又可以分为半自动和全自动两种，相比之下，采用全自动洗衣机比较好，并且应该尽量使用同一型号小容量的洗衣机，其机械搅拌作用相同。洗涤材料的选择也有一些讲究。用衣物作实验材料并不理想，这是因为作为实验材料的衣物，其大小、颜色、洁净程度等应该完全一致，而这并不容易做到；此外，人为地在衣物上增加污物，如血渍、油渍等，也令人难以接受。因此，选用布料作为实验材料比较可行。在作对照实验时，可以控制布料的大小、颜色以及污物的量，使其相同；同时，也便于洗涤效果的比较。⑶水量、水质和洗衣粉用量的问题。143\n水的用量和布料的大小是成正比的。做实验用的布料不易过大，水量不易过多，但应该让布料充分浸泡在水中。水量和洗衣粉的用量可以参考下表。实验时可根据表中的数据换算出实际用量。如果在实验中使用手洗的方法，如使用1000mL的烧杯作为容器，可以用500mL的水，洗衣粉的用量可以用1g或1.5g。洗涤方式机洗手洗水量0.5L0.5L洗衣粉量0.5g1g或1.5g其他相关问题简述如下。实验中可以用滴管控制污物的量，待污物干燥后再进行实验；布料应放在洗衣粉溶液中浸泡相同的时间；采用玻璃棒或筷子搅拌的方式模拟洗衣过程；模拟搅拌的时间、次数和力量应基本相同。【方法技巧】①实验变量包括自变量、因变量和无关变量；实验设计时可以根据实验目的改变自变量，但个实验组无关变量应保持一致。②探究加酶洗衣粉发挥作用的最适温度、pH，实验的自变量为一系列温度、pH，看哪个温度、pH范围内加酶洗衣粉效果最明显；设置1~2个实验组是不能探究出最适温度、pH范围的。热点题型7理清基本原理和基本方法，解答固定化酶和固定化细胞的制作与应用题【例1】关于固定化酶技术的说法正确的是A．固定化酶技术就是固定反应物，将酶依附着载体围绕反应物旋转的技术B．固定化酶的优势在于能催化一系列的酶促反应C．固定化酶中的酶无法重复利用D．固定化酶是将酶固定在一定空间的技术解析:本题主要考查对固定化酶的概念及其作用特点的理解和掌握。从固定化酶的原理入手解答本题。固定化酶是指通过物理或化学的方法，将水溶性的酶与不溶性的载体结合，使酶固定在载体上，并在一定的空间范围内进行反应的酶。因此，固定化酶技术固定的不是反应物而是酶。而被固定的只是一种酶，所以不能催化一糸列的酶促反应，但固定的酶可能重复利用。答案:D【例2】（2022江苏卷）下列关于固定化酶和固定化细胞的叙述，不正确的是A．固定化细胞技术在多步连续催化反应方面优势明显B．固定化酶的应用中，要控制好pH、温度和溶解氧C．利用固定化酶降解水体中有机磷农药，需提供适宜的营养条件143\nD．利用固定化酵母细胞进行发酵，糖类的作用只是作为反应底物解析：本题考查固定化酶和固定化细胞的相关知识。解题过程中应注意酶发挥作用和细胞发挥作用所需的条件的异同。固定化细胞中含有多种酶，在多步连续催化反应方面优势明显，A正确。固定化酶不像普通酶那样对环境要求那么高，耐受性比较好，和溶解氧没什么关系，B错误。利用固定化酶降解水体中有机磷农药，纯粹的化学反应，不需要提供营养条件，固定化细胞发挥作用需要营养条件，C错误。D选项利用固定化酵母细胞进行发酵，糖类的作用作为反应底物也为碳源来维持酵母菌的生存，D错误。答案：A【例3】下面是制备固定化酵母菌细胞的实验步骤，请回答：活化酵母菌细胞→配制海藻酸钠溶液→海藻酸钠溶液与酵母菌细胞混合→固定化酵母菌细胞（1）在状态下，微生物处于休眠状态。活化就是让处于休眠状态的微生物重新恢复状态。活化前应选择足够大的容器，因为酵母菌细胞活化时。（2）影响实验成败的关键步骤是。（3）如果海藻酸钠浓度过低，形成的凝胶珠所包埋的酵母菌细胞数目。（4）观察形成凝胶珠的颜色和形状，如果颜色过浅，说明；如果形成的凝胶珠不是圆形或椭圆形，说明。（5）固定化细胞技术一般采用包埋法固定化，原因是。题型攻略【知识储备】酶和细胞的固定方法和特点143\n固定对象酶细胞适宜固定法化学结合法、物理吸附法包埋法特点体积小，固定一种酶包埋法容易丢失体积大，固定一系列酶难以化学结合和吸附发挥作用需要的条件适宜的温度、pH适宜的温度、pH还需要营养物质和氧气【方法技巧】固定化酶和固定化细胞技术包含内容多，属于重点，但是难度不大，主要是方法技术的掌握问题，需要花点时间比较，并且在理解的基础上记忆。热点题型8以微生物发酵原理为基础，解答与果酒、果醋、腐乳及其泡菜制作有关的试题【例1】(2022江苏)图甲是果醋发酵装置。发酵初期不通气，溶液中有气泡产生；中期可以闻到酒香；后期接种醋酸菌，适当升高温度并通气，酒香逐渐变成醋香。图乙中能表示整个发酵过程培养液pH变化的曲线是（）A．①B．②C．③D．④【例2】在果酒、果醋和腐乳制作中，都要防止微生物污染，有关叙述正确的是（   ）143\nA．果醋发酵阶段应封闭充气口，防止杂菌进入B．腌制腐乳的卤汤中应含有12％左右的酒精以抑制细菌的增殖C．利用自然菌种发酵果酒时，将封有葡萄汁的发酵瓶进行高压灭菌D．将长满毛霉的豆腐放在瓶中，并逐层加盐，接近瓶口部分的盐要铺薄一些解析：本题考查的是果酒、果醋、腐乳制作的基本过程及相关注意事项。弄清各制作过程的条件控制原理是正确解答该题的关键。醋酸菌是好氧菌，发酵的时候需要通入无菌空气；利用自然菌发酵时利用的就是葡萄汁中的酵母菌，高压灭菌会杀死酵母菌；腐乳制作时装坛时越靠近坛口盐越要厚一些。答案：B【例3】(2022海南卷生物)葡萄发酵可产生葡萄酒，请利用相关的知识回答问题：（1）利用葡萄制作葡萄酒的过程中，发挥作用的微生物是＿＿＿＿＿＿＿＿。（2）该微生物通过无氧呼吸可分解＿＿＿＿＿，产生的终产物是＿＿＿＿和＿＿＿＿。（3）甲、乙、丙三位同学将葡萄榨成汁后分别装入相应的发酵瓶中，在温度等适宜的条件下进行发酵，如图所示。发酵过程中，每隔一段时间均需排气一次。据图分析，甲和丙同学的操作有误，其中甲同学的错误是＿＿＿＿＿＿，导致发酵中出现的主要异常现象是＿＿＿＿＿＿＿＿。丙同学的错误是＿＿＿＿＿＿＿，导致发酵中出现的主要异常现象是＿＿＿＿＿＿＿＿＿。上述发酵过程结束后，甲、乙、丙同学实际得到的发酵产品依次是＿＿＿＿、＿＿＿＿、＿＿＿＿。（4）在上述制作葡萄酒的过程中，假设乙同学的某一步骤操作错误导致发酵瓶瓶塞被冲开，该操作错误是＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿。解析：本题考查制作果酒所用的微生物、发酵装置和发酵过程中应注意的问题。从葡萄酒生产所用的微生物的代谢特点、发酵过程中装置充气口和放气口的控制入手解答该题。酵母菌无氧呼吸可以产生酒精和CO2，是葡萄酒制作过程中发挥作用的微生物。143\n酵母菌只有在无氧条件下，才能进行无氧呼吸产生酒精；甲装置的充气口始终开放，不能创造瓶内无氧环境，不能用来生产果酒；在有氧条件下，醋酸菌可以能利用葡萄糖产生醋酸。酵母菌在发酵过程中产生的CO2导致乙装置中气压升高，要定期打开排气管进行放气。丙装置瓶中发酵液过多，淹没了排气管在瓶内的管口，不利于放气；同时导致瓶内氧气过少，不利于发酵前期酵母菌的大量繁殖。答案：（1）酵母菌（2）葡萄糖　　乙醇　CO2（3）未夹住发酵瓶的充气管发酵液从充气管流出，发酵液变酸瓶中发酵液过多，淹没了排气管在瓶内的管口葡萄醋（或果醋）葡萄酒（或果酒）　　葡萄酒（或果酒）（4）未及时排气题型攻略【方法技巧】①从醋酸菌和酵母菌的代谢类型、生存条件及两者在代谢上的联系等角度去理解果酒和果醋的制作原理；从材料的选择和处理、发酵液和发酵用具清洁度的保持、发酵条件的控制等角度综合理解果酒和果醋的制作过程；从微生物的数目、代谢产物产量、产品的色泽口味、装置内发生的能用肉眼观察到的变化及用设置对照实验的方法等角度对果酒和果醋制作结果进行分析和评价。②注意传统方法在腐乳制作过程中的应用及其原理。③从乳酸菌的代谢特征入手解答制作过程中的条件控制；从具体过程的作用、乳酸菌和其他微生物间的关系入手解答泡菜制作的过程中出现的一些异常现象。【易错指导】（1）关于腐乳制作的某些知识辨析不清：a腐乳制作时，参与的微生物很多，但主要是毛霉；b含水量70%为宜，过高、过低都影响腐乳的品质——形状、口味等；c卤汤中盐、酒、香辛料都有杀菌、防腐与调味的功能；d毛霉属于真菌，分为直立菌丝和匍匐菌丝，呈白色；e制作原理：毛霉产生蛋白酶和脂肪酶，将豆腐中的蛋白质、脂肪分解为多肽、甘油和脂肪酸等物质。（2）对微生物发酵过程中灭菌措施考虑不周：a果酒与果醋制作中原料的消毒：①榨汁前葡萄应先冲洗再去枝梗，因为在去梗的同时会使一些微生物侵入果实内部，给消毒带来一定的困难；②体积分数为70%的酒精杀菌效果最强，其原因是浓度过低，杀菌力弱；浓度过高，使菌体表面蛋白质凝固形成一层保护膜，乙醇分子不能渗入其内，因此杀菌效果受影响。b腐乳制作过程中的杀菌消毒：①制作腐乳的玻璃瓶用温水冲洗并用酒精消毒；②酒、盐、香辛料都有杀菌作用；③接种、封瓶时都要进行无菌操作。热点题型9掌握物质提取原理，解答从生物材料中提取特定成分的相关试题【例1】（2022海南）请回答下列与实验室提取芳香油有关的问题：（1）植物芳香油的提取可采用的方法有压榨法、和。143\n（2）芳香油溶解性的特点是不溶于，易溶于，因此可用作为提取剂来提取芳香油。（3）橘子果实含有芳香油，通常可用作为材料提取芳香油，而且提取时往往选用新鲜的材料，理由是。　　（4）对材料压榨后可得到糊状液体，为除去其中的固体物获得乳状液可采用的方法是。　　（5）得到的乳状液加入氯化钠并放置一段时间后，芳香油将分布于液体的层，原因是。加入氯化钠的作用是。　　（6）从乳状液中分离得到的芳香油中要加入无水硫酸钠，此剂的作用是。【例2】（2022新课标全国卷）下列是与芳香油提取有关的问题，请回答：（1）玫瑰精油适合用水蒸气蒸馏法提取，其理由是玫瑰精油具有        的性质。蒸馏时收集的蒸馏液       （是、不是）纯的玫瑰精油，原因是                   。（2）当蒸馏瓶中的水和原料量一定时，蒸馏过程中，影响精油提取量的主要因素有蒸馏时间和   。当原料量等其他条件一定时，提取量随蒸馏时间的变化趋势是              。（3）如果蒸馏过程中不进行冷却，则精油的提取量会          ，原因是                     。143\n（4）密封不严的瓶装玫瑰精油保存时最好放在温度          的地方，目的是                      。(5)某植物花中精油的相对含量随花的不同生长发育时期的变化趋势如下图所示。提取精油时采摘花的最合适时间为    天左右。（6）从薄荷叶中提取薄荷油时   （能、不能）采用从玫瑰花中提取玫瑰精油的方法，理由是   。答案:⑴易挥发、难溶于水、化学性质稳定 不是  玫瑰精油随水蒸气一起蒸馏出来，所得到的是油水混合物⑵蒸馏温度  143\n在一定的时间内提取量随蒸馏时间的延长而增加，一定时间后提取量不再增加  ⑶下降  部分精油会随水蒸气挥发而流失   ⑷较低  减少挥发（或防止挥发）⑸a ⑹能 薄荷油与玫瑰精油的化学性质相似【例3】Ⅰ.下面图一为胡萝卜素粗品鉴定装置示意图，图二为胡萝卜素的纸层析结果示意图，请据图回答下列问题。（1）图一中b的名称是，a的作用是，e为，对于e实验时应注意，f为，常用，如果层析液没及e会导致。（2）图二中A、B、C、D四点中，属于标准样品的样点是_____，属于提取样品的样点是_____。基线一般距底边________cm；在图中的层析谱中，①代表的物质是_______，②代表的物质是___________。Ⅱ.为了探讨提取溶剂系统对类胡萝卜素提取的影响，科研人员分别用六种不同的溶剂系统按相同的提取步骤进行提取，比较类胡萝卜素的含量，以寻找不同植物品种的最佳的提取溶剂，请据图表作答：。（1）表中所用的提取溶剂，均为有机溶剂，原因是____________。（2）在本实验中，提取步骤必需相同，理由：________________。（3）请依据图一，写出它的实验课题：______________________________，其实验自变量为__________，因变量为___________。（4）从图一和图二及两者比较中，你能得出哪两个结论？_________________________。解析：Ⅰ143\n.本题考查胡萝卜素粗品鉴定和层析结果分析。应从纸层析法原理与胡萝卜素、层析液的理化性质入手解答该题。对胡萝卜素提取粗品进行鉴定采用的是纸层析法，其原理即色素在滤纸上的运动速度不同，从而使各成分分开。因层析液易挥发，故应在色谱器上方用玻璃盖严。在进行点样时，应注意点样要快速细致，并保持滤纸干燥。层析液深不得超过滤纸基线，否则点样处的有机成分会溶于层析液中。Ⅱ.本题以探讨提取溶剂系统对类胡萝卜素提取影响的实验结果为载体，考查实验分析能力。解题时，应从胡萝卜素的提取原理和图形数据特征入手解答该题。根据胡萝卜素易溶于有机溶剂的特点，采取有机溶剂萃取的方法；为了确保单一变量，提取步骤必需相同；此实验为探究实验，实验课题由自变量+实验对象+因变量组成；图一、图二单独分析可知，枸杞的最佳提取剂为提取剂2，即已烷：二氧六环=84：16，试剂3提取效果最差；番茄的最佳提取剂为试剂1和3，试剂2提取效果最差；图一图二内部分析，是影响效果的不同；图一图二比较，是品种的不同。答案：Ⅰ.（1）色谱容器，防止层析液挥发，样品原点，点样应该快速细致并保持滤纸干燥，溶液石油醚，胡萝卜素溶解在层析液中，导致鉴定失败；（2）A和D；B和C；2，胡萝卜素；其他色素和杂质。Ⅱ.（1）有机溶剂能充分溶解类胡萝卜素；（2）确保单一变量；（3）探究六种溶剂系统对枸杞中类胡萝卜素提取的影响；六种溶剂；类胡萝卜素量；（5）结论一：六种溶剂对同一品种的类胡萝卜素的提取量影响不同；结论二：不同品种的最佳提取的溶剂种类不同。题型攻略【知识储备】蒸馏、压榨和萃取三种方法的比较提取方法水蒸气蒸馏压榨法有机溶剂萃取实验原理利用水蒸气将挥发性较强的芳香油携带出来通过机械加压,压榨出果皮中的芳香油使芳香油溶解在有机溶剂中，蒸发溶剂后就可获得芳香油方法步骤（1）水蒸气蒸馏（2）分离油层（3）除水过滤（1）石灰水浸泡、漂洗（2）压榨、过滤、静置（3）再次过滤（1）粉碎、干燥（2）萃取、过滤（3）浓缩适用范围适用于提取玫瑰油、薄荷油等挥发性强的芳香油适用于柑橘、柠檬等易焦糊原料的提取适用范围广，要求原料的颗粒要尽可能细小，能充分浸泡在有机溶液中143\n优点简单易行，便于分离生产成本低，易保持原料原有的结构和功能出油率高，易分离局限性水中蒸馏导致原料焦糊和有效成分水解等问题分离较为困难，出油率相对较低使用的有机溶剂处理不当会影响芳香油的质量特别注意：①水蒸气蒸馏要适当延长蒸馏时间，温度不能太高。②用于萃取的有机溶剂必须事先精制，除去杂质。③压榨时原料必须要浸透，这样压榨时不会滑脱，出油率高，不堵塞筛眼；使用石灰水充分浸泡原料，破坏细胞结构，分解果胶，防止橘皮压榨时滑脱，提高出油率。【易错指导】没有特别注意纸层析操作的注意事项：①层析时注意选择干净的滤纸，为了防止操作时对滤纸的污染，应尽量避免用手直接接触滤纸，可以带手套进行操作；②点样时应注意点样斑点不能太大（直径应小于0.5cm），如果用吹风机吹干，温度不宜过高，否则斑点会变黄；③将点好样的滤纸卷成筒状，卷纸时注意滤纸两边不能相互接触，以免因毛细管现象导致溶剂沿滤纸两边的移动加快，溶剂前沿不齐，影响结果；④层析液不可没及样品原点，以免色素溶解于层析液中，使鉴定失败；⑤层析是否提取到胡萝卜素，通过与标准样品中的β-胡萝卜素作对比予以确认。热点题型10掌握原理和流程，正确解答DNA和蛋白质技术的相关问题【例1】(2022江苏)下列关于DNA和蛋白质提取与分离实验的叙述，正确的有A．提取细胞中的DNA和蛋白质都需用蒸馏水涨破细胞B．用不同浓度NaCl溶液反复溶解与析出DNA可去除蛋白质C．蛋白质提取和分离过程中进行透析可去除溶液中的DNAD．蛋白质和DNA都可以用电泳的方法进行分离纯化143\n【例2】PCR（多聚酶链式反应）技术是一项在生物体外复制特定的DNA片段的核酸合成技术，下图表示合成过程，请据图分析回答：（1）A过程高温使DNA变性解旋，对该过程的原理叙述，正确的是。A.该过程用到耐高温的解旋酶破坏氢键B.该过程用到限制酶破坏磷酸二酯键C.该过程不需要解旋酶的作用D.该过程与人体细胞的过程完全相同（2）C过程要用到的酶是。这种酶在高温下仍保持活性，因此在PCR扩增时可以加入,（需要/不需要）再添加。PCR反应除提供酶外，还需要满足的基本条件有:。（3）如果把模板DNA的两条链用15N标记，游离的脱氧核苷酸不做标记，控制“94℃~55℃~72℃”温度循环3次，则在形成的子代DNA中含有15N标记的DNA占。（4）如果模板DNA分子共有a个碱基对，其中含有胞嘧啶m个，则该DNA复制10次，需要加入胸腺嘧啶脱氧核苷酸个。（5）PCR中由碱基错配引起的变异属于。假设对一个DNA进行扩增，第一次循环时某一条模板链上发生碱基错配，则扩增若干次后检测所用DNA的扩增片段，与原DNA相应片段相同的占。143\n答案:（1）C（2）TaqDNA聚合酶一次不需要DNA模板，分别与两条模板链相结合的两种引物，四种脱氧核苷酸，同时通过控制温度使DNA复制在体外反复进行（3）25%（4）（210-1）（a-m）（5）基因突变75%【例3】(2022江苏卷)某生物兴趣小组开展DNA粗提取的相关探究活动。具体步骤如下： 材料处理：称取新鲜的花菜、辣椒和蒜黄各2份，每份l0g。剪碎后分成两组，一组置于20℃、另一组置于一20℃条件下保存24h。 DNA粗提取：第一步：将上述材料分别放入研钵中，各加入l5mL研磨液，充分研磨。用两层纱布过滤。取滤液备用。第二步：先向6只小烧杯中分别注入10mL滤液，再加入20mL体积分数为95％的冷酒精溶液，然后用玻璃棒缓缓地向一个方向搅拌，使絮状物缠绕在玻璃棒上。第三步：取6支试管，分别加入等量的2mol／LNaCl溶液溶解上述絮状物。DNA检测：在上述试管中各加入4mL二苯胺试剂。混合均匀后，置于沸水中加热5min，待试管冷却后比较溶液的颜色深浅,结果如下表。材料保存温度花菜辣椒蒜黄20℃++++++-20℃+++++++++分析上述实验过程，回答下列问题：(1)该探究性实验课题名称是     。143\n(2)第二步中”缓缓地”搅拌，这是为了减少    。(3)根据实验结果，得出结论并分析。 ①结论1：与20℃相比，相同实验材料在-20℃条件下保存，DNA的提取量较多。   结论2：    。 ②针对结论I．请提出合理的解释：    。(4)氯仿密度大于水，能使蛋白质变性沉淀，与水和DNA均不相溶，且对DNA影响极小。为了进一步提高DNA纯度，依据氯仿的特性．在DNA粗提取第三步的基础上继续操作的步骤是：     ，然后用体积分数为95％的冷酒精溶液使DNA析出。解析：本题以实验过程和结果为载体，考查DNA粗提取与鉴定的基本原理、过程及实验的分析能力。熟记实验原理、能从表格中获取准确信息是正确解答该题的关键。（1）从表格可以看出，该实验有两个自变量：材料和温度。所以该探究性实验课题名称为探究不同材料和不同温度对DNA提取量的影响。低温抑制了相关酶的活性，DNA降解速度慢，提取的DNA较多。（2）第二步中用玻璃棒搅拌的目的是获取DNA絮状物，所以若速度快，易造成DNA断裂。（3）本实验的结论可从两个方面来考虑：①相同材料在不同温度下的结论；②不同材料在相同温度下的结论。（4）氯仿能使蛋白质变性，而对DNA影响极小，所以可将第三步获得的溶液与氯仿混合，又氯仿密度大于水，所以蛋白质沉淀位于溶液下部，DNA位于上清液中。题型攻略【知识储备】1.生物体内DNA复制与PCR反应的区别比较项目体内复制PCR反应解旋在解旋酶作用下，细胞提供能量，部分解开加热至90℃，双链全部解开，不需要解旋酶引物一小段RNA可以是RNA或单链DNA分子片段143\n特点边解旋边复制，半保留复制体外迅速扩增TaqDNA聚合酶不需要（只需DNA聚合酶）需要循环次数受生物体自身控制30多次相同点生物体内的DNA复制或PCR体外DNA扩增都需要模板，四种脱氧核苷酸，且都需要在一定的缓冲液中进行，都遵循半保留复制。2.血红蛋白的分离方法及相关原理方法原理凝胶色谱法根据相对分子质量的大小分离蛋白质电泳法根据各种分子带电性质的差异以及分子本身大小、形状的不同进行分离3.DNA粗提取与鉴定不同试剂用途及原理比较试剂浓度用途原理（“△”为实验的主要原理）NaCl溶液2mol/L溶解DNADNA在氯化钠溶液中的溶解度随溶液浓度的变化而改变，溶解度在2mol/L时最大、0.14mol/L时最小△0.14mol/L析出DNA0.015mol/L鉴定时的溶媒该浓度下也能溶解DNA酒精95%（体积分数）除杂以提纯DNADNA不溶于酒精，但是细胞中的某些物质则可以溶于酒精溶液△二苯胺鉴定剂DNA遇二苯胺（沸水浴）会染成蓝色△柠檬酸钠0.1g/mL抗凝剂除去血液中的钙离子，防止血液凝固【方法技巧】总结DNA粗提取与鉴定实验中的2次加蒸馏水、3次加氯化钠溶液和6次搅拌；生化类实验题除遵循生物实验题的一般解题规律外，还要掌握构成生物体各种化合物的化学性质、提取方法、试剂的使用方法（如斐林试剂和双缩脲试剂），根据试题提供的条件及实验原理，进行全面分析，得出试题的答案。143