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【步步高】2022届高考生物一轮集训 真题与练出高分 10.37基因工程 新人教版
【步步高】2022届高考生物一轮集训 真题与练出高分 10.37基因工程 新人教版
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【步步高】2022届高考生物一轮集训真题与练出高分10.37基因工程新人教版1.(2022·浙江卷,6)天然的玫瑰没有蓝色花,这是由于缺少控制蓝色色素合成的基因B,而开蓝色花的矮牵牛中存在序列已知的基因B。现用基因工程技术培育蓝玫瑰,下列操作正确的是( )A.提取矮牵牛蓝色花的mRNA,经逆转录获得互补的DNA,再扩增基因BB.利用限制性核酸内切酶从开蓝色花矮牵牛的基因文库中获取基因BC.利用DNA聚合酶将基因B与质粒连接后导入玫瑰细胞D.将基因B直接导入大肠杆菌,然后感染并转入玫瑰细胞答案 A解析 获取目的基因B,可先提取矮牵牛蓝色花的mRNA,经逆转录获得互补的DNA,再经PCR技术扩增,A正确;基因文库构建时是将目的基因与载体连接起来,形成重组载体,再导入受体菌中储存和扩增,提取目的基因时不需使用限制酶,B错误;连接目的基因与质粒的酶是DNA连接酶,C错误;将目的基因导入植物细胞,常用农杆菌转化法,不使用大肠杆菌,D错误。2.(2022·浙江卷,6)将ada(腺苷酸脱氨酶基因)通过质粒pET28b导入大肠杆菌并成功表达腺苷酸脱氨酶。下列叙述错误的是( )A.每个大肠杆菌细胞至少含一个重组质粒B.每个重组质粒至少含一个限制性核酸内切酶识别位点C.每个限制性核酸内切酶识别位点至少插入一个adaD.每个插入的ada至少表达一个腺苷酸脱氨酶分子答案 C解析 大肠杆菌成功表达出腺苷酸脱氨酶,说明这些大肠杆菌都至少含一个重组质粒,A项正确;作为载体的条件为至少含一个或多个酶切位点,所以作为载体的质粒至少含一个限制性核酸内切酶识别位点,B项正确;作为基因表达载体应包括目的基因、启动子、终止子、标记基因四部分,但并不是每个酶切位点都至少插入一个ada,C项错误;由于这些目的基因成功表达,所以每个ada至少表达一个腺苷酸脱氨酶分子,D项正确。3.(2022·新课标全国卷,40)根据基因工程的有关知识,回答下列问题:(1)限制性内切酶切割DNA分子后产生的片段,其末端类型有____________和____________。(2)质粒运载体用EcoRⅠ切割后产生的片段如下:AATTC……G G……CTTAA为使运载体与目的基因相连,含有目的基因的DNA除可用Eco7\nRⅠ切割外,还可用另一种限制性核酸内切酶切割,该酶必须具有的特点是________________________________________________________________________。(3)按其来源不同,基因工程中所使用的DNA连接酶有两类,即__________DNA连接酶和__________DNA连接酶。(4)反转录作用的模板是______________,产物是______________________。若要在体外获得大量反转录产物,常采用____________技术。(5)基因工程中除质粒外,____________和____________也可作为载体。(6)若用重组质粒转化大肠杆菌,一般情况下,不能直接用未处理的大肠杆菌作为受体细胞,原因是_____________________________________________________________。答案 (1)黏性末端 平末端 (2)切割产生的DNA片段末端与EcoRⅠ切割产生的末端相同(其他合理答案也可) (3)E·coli T4 (4)mRNA(或RNA) cDNA(或DNA) PCR (5)噬菌体 动植物病毒(其他合理答案也可) (6)未处理的大肠杆菌吸收质粒(外源DNA)的能力极弱(其他合理答案也可)解析 (1)DNA分子经限制酶切割产生的DNA片段末端通常有黏性末端和平末端两种类型。(2)为使运载体与目的基因相连,应使二者被切割后产生的末端相同,故用另一种限制酶切割产生的末端必须与EcoRⅠ切割产生的末端相同。(3)根据酶的来源不同,DNA连接酶分为E·coliDNA连接酶和T4DNA连接酶。(4)mRNA(或RNA)为模板,合成DNA的过程称为逆转录,若要体外获得大量DNA分子,可以使用RCR技术。(5)在基因工程中,通常利用质粒作为运载体,另外噬菌体和动植物病毒也可作为运载体。(6)大肠杆菌作为受体细胞时,常用Ca2+处理,使之成为能吸收周围环境中DNA分子的感受态细胞。4.(2022·江苏卷,32)图1表示含有目的基因D的DNA片段长度(bp即碱基对)和部分碱基序列,图2表示一种质粒的结构和部分碱基序列。现有MspⅠ、BamHⅠ、MboⅠ、SmaⅠ4种限制性核酸内切酶,它们识别的碱基序列和酶切位点分别为CCGG、GGATCC、GATC、CCCGGG。请回答下列问题:(1)图1的一条脱氧核苷酸链中相邻两个碱基之间依次由______________________连接。(2)若用限制酶SmaⅠ完全切割图1中DNA片段,产生的末端是____________末端,其产物长度为____________。7\n(3)若图1中虚线方框内的碱基对被T-A碱基对替换,那么基因D就突变为基因d。从杂合子中分离出图1及其对应的DNA片段,用限制酶SmaⅠ完全切割,产物中共有____________种不同长度的DNA片段。(4)若将图2中质粒和目的基因D通过同种限制酶处理后进行连接,形成重组质粒,那么应选用的限制酶是____________。在导入重组质粒后,为了筛选出含重组质粒的大肠杆菌,一般需要用添加____________的培养基进行培养。经检测,部分含有重组质粒的大肠杆菌菌株中目的基因D不能正确表达,其最可能的原因是________________________________________________________________________________________________________________________________________________。答案 (1)脱氧核糖、磷酸、脱氧核糖(2)平 537bp、790bp、661bp (3)4(4)BamHⅠ 抗生素B 同种限制酶切割形成的末端相同,部分目的基因D与质粒反向连接解析 (1)一条脱氧核苷酸链中相邻的两个碱基之间是通过“—脱氧核糖—磷酸—脱氧核糖—”相连的,要注意两条脱氧核苷酸链的相邻碱基之间通过氢键相连进行区分。(2)从SmaⅠ的识别序列和切点可见,其切割后产生的是平末端,图1中DNA片段有SmaⅠ的两个识别序列,故切割后产生的产物长度为537(534+3)bp、790(796-3-3)bp和661(658+3)bp三种。(3)图示方框内发生碱基对的替换后,形成的d基因失去了1个SmaⅠ的识别序列,故D基因、d基因用SmaⅠ完全切割后产物中除原有的3种长度的DNA片段外,还增加一种537+790bp的DNA片段。(4)目的基因的两端都有BamHⅠ的识别序列,质粒的启动子后的抗生素A抗性基因上也有BamHⅠ的识别序列,故应选用的限制酶是BamHⅠ,此时抗生素B抗性基因作为标记基因,故筛选时培养基中要添加抗生素B。若重组质粒已导入了受体细胞却不能表达,很可能是因为用同种限制酶切割后,目的基因和质粒有两种连接方式,导入受体细胞的重组质粒是目的基因和质粒反向连接形成的。u1.下列一般不作为基因工程中的标记基因的是( )A.四环素抗性基因B.绿色荧光蛋白基因C.产物具有颜色反应的基因D.贮藏蛋白的基因答案 D解析 标记基因位于载体(质粒)上,以利于重组DNA的鉴定和选择,如四环素抗性基因、绿色荧光蛋白基因、产物具有颜色反应的基因等。2.若要利用某目的基因(图甲)和P1噬菌体载体(图乙)构建重组DN7\nA(图丙),限制酶的酶切位点分别是BglⅡ(AGATCT)、EcoRⅠ(GAATTC)和Sau3AⅠ(GATC)。下列分析合理的是( )A.用EcoRⅠ切割目的基因和P1噬菌体载体B.用BglⅡ和EcoRⅠ切割目的基因和P1噬菌体载体C.用BglⅡ和Sau3AⅠ切割目的基因和P1噬菌体载体D.用EcoRⅠ和Sau3AⅠ切割目的基因和P1噬菌体载体答案 D解析 解答本题的关键是要看准切割后目的基因插入的方向,只有用EcoRⅠ和Sau3AⅠ切割目的基因和P1噬菌体载体,构建的重组DNA中RNA聚合酶在插入的目的基因上的移动方向才一定与图丙相同。3.如图表示利用农杆菌转化法获得某种转基因植物的部分操作步骤。以下说法错误的是( )A.利用含有四环素的培养基可将含Ⅱ的细菌筛选出来B.Ⅲ是农杆菌,通过步骤③将目的基因导入植株C.⑥可与多个核糖体结合,并可以同时翻译出多种蛋白质D.①过程的完成需要限制酶和DNA连接酶的参与答案 C解析 ⑥是一个mRNA分子,可与多个核糖体结合形成多聚核糖体,由于翻译的模板是同一个mRNA分子,故翻译出的是同一种蛋白质。4.研究人员将鱼的抗冻基因导入番茄体内,获得抗冻能力明显提高的番茄新品种。下列操作合理的是( )A.设计相应DNA单链片段作为引物,利用PCR技术扩增目的基因B.利用限制酶和DNA聚合酶构建基因表达载体C.将基因表达载体导入番茄细胞之前需用Ca2+处理细胞D.运用DNA分子杂交技术检测抗冻基因是否在番茄细胞中表达答案 A解析 利用限制性核酸内切酶和DNA连接酶构建基因表达载体;将基因表达载体导入原核细胞之前需用Ca2+处理,番茄细胞为真核细胞;运用抗原—抗体杂交技术可检测抗冻基因是否在番茄细胞中表达。5.如图是从酵母菌中获取某植物需要的某种酶的基因的流程,结合所学知识及相关信息回答下列问题:7\n(1)图中cDNA文库________________基因组文库(大于、等于、小于)。(2)①过程提取的DNA需要____________的切割,B过程是____________过程。(3)为在短时间内大量获得目的基因,可用的技术是______________________,其原理是________________________________________________________________________。(4)目的基因获取之后,需要进行____________________,其组成必须有____________________________及标记基因等,此步骤是基因工程的核心。(5)将该目的基因导入某双子叶植物细胞,常采用的方法是__________,其能否在此植物体内稳定遗传的关键是________________,可以用____________________技术进行检测。答案 (1)小于 (2)限制酶 逆转录(3)PCR DNA复制(4)基因表达载体的构建 启动子、终止子、目的基因(复制原点可不答)(5)农杆菌转化法 目的基因是否整合到植物细胞的染色体上 DNA分子杂交解析 (1)基因组文库是指将某生物的全部基因组DNA切割成一定长度的DNA片段克隆到某种载体上形成的集合;cDNA文库是由mRNA经逆转录形成的基因组成的,由于基因的选择性表达,cDNA文库小于基因组文库。(2)从供体细胞的DNA中获取目的基因,首先应用限制酶将目的基因从其所在的DNA分子上切割下来;B过程是以mRNA为模板合成DNA的过程,应为逆转录过程。(3)PCR技术是一种体外扩增DNA的方法,其原理为DNA复制,能将得到的目的基因在细胞外大量扩增。(4)基因表达载体包括目的基因、标记基因、启动子和终止子,其构建是基因工程的核心。(5)将目的基因导入某双子叶植物细胞常采用的方法是农杆菌转化法,目的基因只有整合到植物细胞的染色体上才能在植物体内稳定遗传,可通过DNA分子杂交的方法对目的基因是否整合到染色体上进行检测。6.在某些深海鱼中发现的抗冻蛋白基因afp对提高农作物的抗寒能力有较好的应用价值。如图所示是获得转基因莴苣的技术流程,请据图回答下列问题:(1)获取目的基因的主要途径包括从自然界已有的物种中分离和__________。(2)①过程需要的酶有____________、____________________。7\n(3)重组质粒除了带有抗冻蛋白基因afp,还必须含有启动子、终止子和____________,这样才能构成一个完整的基因表达载体。(4)如果受体细胞C1是土壤农杆菌,则将目的基因导入它的目的是利用农杆菌的______________,使目的基因进入受体细胞C2,并将其插入到受体细胞C2中______________________上,使目的基因的遗传特性得以稳定维持和表达,形成转基因莴苣。经②过程获得的转基因莴苣中的目的基因是否表达,在分子水平上可用____________法进行检测,如果出现杂交带,说明目的基因已经表达蛋白质产品,转基因莴苣培育成功。答案 (1)(用逆转录等方法进行)人工合成 (2)限制酶 DNA连接酶 (3)标记基因 (4)转化作用 染色体的DNA 抗原—抗体杂交解析 (1)获取目的基因的主要途径有从自然界已有的物种中分离和人工合成。(2)①过程为基因表达载体的构建过程,需要用到限制酶和DNA连接酶。(3)一个完整的基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因。(4)农杆菌转化法利用的是农杆菌的转化作用,将目的基因整合到受体细胞染色体的DNA上,进而使目的基因能够稳定遗传和表达。检测目的基因是否成功表达可采用抗原—抗体杂交法。7.科学家从预期人的生长激素的功能出发,推测相应的脱氧核苷酸序列,并人工合成了双链DNA片段,获得双链DNA。科学家将人的生长激素基因与大肠杆菌的质粒进行重组,并使其成功地在大肠杆菌中表达。已知限制酶Ⅰ的识别序列和切点是—GGATCC—,限制酶Ⅱ的识别序列和切点是—GATC—。据图回答:(1)为了精确地获取图中的重组质粒,应用____________切割质粒,用____________切割目的基因。(2)将基因表达载体导入大肠杆菌B之前,要将大肠杆菌B放入一定浓度的____________溶液中处理,使之成为感受态的大肠杆菌。(3)人的基因之所以能与大肠杆菌的质粒进行重组并发挥其功能,是因为二者都是_______________。人的生长激素基因能在细菌体内成功表达是因为______________。(4)将得到的大肠杆菌B涂布在一个含有氨苄青霉素的培养基上能够生长,说明该菌已导入了__________________,反之则没有导入。(5)上述方法制备人的生长激素,运用的现代生物技术是____________。答案 (1)限制酶Ⅰ 限制酶Ⅱ (2)CaCl2 (3)规则的双螺旋结构 二者共用一套(遗传)密码子 (4)普通质粒或重组质粒 (5)蛋白质工程7\n解析 (1)根据图示分析可知,目的基因插在了质粒中含抗四环素基因的部位,而该位置有限制酶Ⅰ和Ⅱ的识别位点,但限制酶Ⅱ会同时在GeneⅠ和Ⅱ处切开,因此在构建基因表达载体过程中,应用限制酶Ⅰ切割质粒。目的基因的两侧均含有能被限制酶Ⅱ识别的碱基序列,所以用限制酶Ⅱ切割目的基因,能够露出两端的黏性末端。因此,为了精确地获取图中的重组质粒,应分别用限制酶Ⅰ和限制酶Ⅱ切割质粒和目的基因。(2)将基因表达载体导入大肠杆菌B之前,要将大肠杆菌B放入一定浓度的CaCl2溶液中处理,使之成为感受态的大肠杆菌。(3)人的基因之所以能与大肠杆菌的DNA分子进行重组,是因为人的基因与大肠杆菌DNA分子的双螺旋结构相同。人的生长激素基因能在细菌体内成功表达是因为人和细菌共用一套(遗传)密码子。(4)将得到的大肠杆菌B涂布在一个含有氨苄青霉素的培养基上能够生长,说明该菌已导入了普通质粒或重组质粒,因为普通质粒或重组质粒中都含抗氨苄青霉素基因。(5)科学家从预期人的生长激素的功能出发,推测相应的脱氧核苷酸序列,并人工合成了双链DNA片段,获得双链DNA,从而合成人的生长激素,这运用了现代生物技术中的蛋白质工程。7
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高考 - 一轮复习
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